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反义α肌动蛋白基因腺病毒载体对TGF-β1刺激的肾小管上皮细胞转分化的影响被引量：2: 1; 作者干磊吴雄飞吴亿《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第13期1301-1304,共4页; 目的观察大鼠血管平滑肌α肌动蛋白基因反义腺病毒载体(pAdanti-α-SMA)转染对转化生长因子β1(TGF-β1)所诱导的肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(TEMT)的影响。方法pAdanti-α-SMA载体构建并鉴定,转染肾小管上皮细胞(TEC)后免疫荧... 展开更多; 关键词血管平滑肌α肌动蛋白基因反义腺病毒载体转化生长因子Β1 肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化; 在线阅读下载PDF 职称材料

反义BTEB2腺病毒载体的构建及其在血管平滑肌细胞中的表达被引量：4: 2; 作者李德何国祥唐波《医学研究生学报》 CAS 2004年第5期398-400,403,共4页; 目的 :构建反义BTEB2重组腺病毒载体 ,以研究BTEB2反义RNA对血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖及动脉再狭窄的影响。　方法 :从培养的大鼠VSMC中提取总RNA ,通过RT PCR制备BTEB2cDNA ,将BTEB2cDNA反向连接至腺病毒穿梭质粒pDC31 5中 ,构建重组... 展开更多; 关键词 BTEB2 反义RNA 腺病毒载体血管平滑肌细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

大鼠SOCS3基因重组腺病毒载体的构建及转染血管平滑肌细胞后的表达被引量：2: 3; 作者向水董念国 +3 位作者刘金平史嘉玮肖雅琼王玉《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期556-561,共6页; 目的构建携带大鼠SOCS3基因的重组腺病毒载体并转染大鼠血管平滑肌细胞,评价其转染效果,为血管增殖性疾病转基因治疗的实验研究奠定基础。方法用BamHⅠ和EcoRⅠ将目的基因pUC57-Simple-rSOCS3及腺病毒穿梭载体pYr-adshuttle-4(带GFP标记... 展开更多; 关键词 SOCS3 腺病毒载体转基因治疗血管平滑肌细胞血管增殖性疾病; 在线阅读下载PDF 职称材料

腺病毒介导BTEB2反义RNA对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用被引量：2: 4; 作者李德何国祥 +1 位作者唐波唐兵《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期388-391,共4页; 目的　构建携带反义锌指转录因子 2 (basictranscriptionelementbindingprotein 2 ,BTEB2 )基因的重组腺病毒载体并研究BTEB2反义RNA对平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecell,VSMC)增殖的影响。方法　从培养的大鼠VSMC中提取总RNA ,通过... 展开更多; 关键词 BTEB2 反义RNA 腺病毒载体血管平滑肌细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

人KLK1和EGFP双顺反子重组腺病毒构建及其在血管平滑肌细胞中的表达被引量：6: 5; 作者余惠珍谢良地 +3 位作者朱鹏立许昌声王华军李体远《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期411-416,共6页; 目的:构建携EGFP为报告基因和人组织激肽释放酶1(hKLK1)基因双顺反子的重组腺病毒(Ad-hKLK1-IRES-EGFP),并观察在自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞(VSMCs)中的表达变化。方法:通过双酶切质粒pBluescritII KS-hKLK1,将hKLK1基因定向... 展开更多; 关键词基因人组织激肽释放酶重组腺病毒载体血管平滑肌细胞绿色荧光蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

反义VEGF 165基因关节腔注射抑制大鼠胶原性关节炎形成的病理观察被引量：3: 6; 作者王建华黄华杨 +2 位作者尹庆水刘延龄黄盛东《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期99-100,共2页; 目的:观察反义血管内皮生长因子(VEGF)165基因体内转染对大鼠类风湿关节炎形成的影响。方法:Wistard大鼠30只,关节炎诱导2周后随机等分为3组,并分别给予相应处理:A组(关节腔注射100μl生理盐水)、B组(关节腔注射100μl空病毒载体)和C组... 展开更多; 关键词腺病毒载体反义基因血管内皮生长因子类风湿关节炎; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名反义α肌动蛋白基因腺病毒载体对TGF-β1刺激的肾小管上皮细胞转分化的影响被引量：2: 1; 作者干磊吴雄飞吴亿; 机构第三军医大学西南医院肾科; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第13期1301-1304,共4页; 文摘目的观察大鼠血管平滑肌α肌动蛋白基因反义腺病毒载体(pAdanti-α-SMA)转染对转化生长因子β1(TGF-β1)所诱导的肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(TEMT)的影响。方法pAdanti-α-SMA载体构建并鉴定,转染肾小管上皮细胞(TEC)后免疫荧光染色和Western blot检测α-SMA水平。实验分为5组,A组:正常肾小管上皮细胞(TEC,对照组);B组:TEC+2μlpAdanti-α-SMA;C组:TEC+1μg天然TGF-β1;D组:TEC+1μg天然TGF-β1+2μlpA-danti-α-SMA;E组:TEC+1μg天然TGF-β1+10μlpAdanti-α-SMA。结果成功构建pAdanti-α-SMA,pAdanti-α-SMA转染TEC后抑制了TGF-β1诱导的TEC的α-SMA水平并呈剂量依赖性。结论pAdanti-α-SMA可有效地抑制肾小管上皮细胞的肌成纤维细胞转分化。; 关键词血管平滑肌α肌动蛋白基因反义腺病毒载体转化生长因子Β1 肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化; Keywords antisense vascular smooth muscle alpha adenovirus vector transforming growth factor betel tubular epithelial myofibroblast transdifferentiation; 分类号 R322.61 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] R329.24 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名反义BTEB2腺病毒载体的构建及其在血管平滑肌细胞中的表达被引量：4: 2; 作者李德何国祥唐波; 机构第三军医大学西南医院心内科; 出处《医学研究生学报》 CAS 2004年第5期398-400,403,共4页; 文摘目的 :构建反义BTEB2重组腺病毒载体 ,以研究BTEB2反义RNA对血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖及动脉再狭窄的影响。　方法 :从培养的大鼠VSMC中提取总RNA ,通过RT PCR制备BTEB2cDNA ,将BTEB2cDNA反向连接至腺病毒穿梭质粒pDC31 5中 ,构建重组穿梭质粒pDC31 5ASBTEB2 ,将其与腺病毒基因组质粒pBHGloxΔE1 ,3Cre共转染 2 93细胞获得重组腺病毒 ,采用PCR方法对其进行鉴定 ;用重组腺病毒感染VSMC ,通过RT PCR检测BTEB2反义RNA在VSMC中的表达。　结果 :在病变 2 93细胞的冻融上清中含有反义BTEB2重组腺病毒 ,其滴度为 5×1 0 9ml。VSMC被重组腺病毒感染后 ,可检测到BTEB2反义RNA的表达。　结论 :成功构建了反义BTEB2重组腺病毒载体 ;重组腺病毒可在VSMC中表达BTEB2反义RNA 。; 关键词 BTEB2 反义RNA 腺病毒载体血管平滑肌细胞; Keywords BTEB2 Antisense RNA Adenovirus vector Vascular smooth muscle cells; 分类号 Q754 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大鼠SOCS3基因重组腺病毒载体的构建及转染血管平滑肌细胞后的表达被引量：2: 3; 作者向水董念国刘金平史嘉玮肖雅琼王玉; 机构华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系; 出处《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期556-561,共6页; 文摘目的构建携带大鼠SOCS3基因的重组腺病毒载体并转染大鼠血管平滑肌细胞,评价其转染效果,为血管增殖性疾病转基因治疗的实验研究奠定基础。方法用BamHⅠ和EcoRⅠ将目的基因pUC57-Simple-rSOCS3及腺病毒穿梭载体pYr-adshuttle-4(带GFP标记)行双酶切。回收酶切质粒的目的片段进行连接,产物转化至DH5α感受态。提取质粒酶切鉴定正确后测序。通过LR体外同源重组将rSOCS3表达框构建至pAd/PL-DEST腺病毒表达载体上。将腺病毒线性化后转染HEK293细胞包装腺病毒,PCR鉴定此腺病毒中是否含有rSOCS3基因。放大培养并收集病毒,TCD法测定病毒滴度。将此病毒感染大鼠血管平滑肌细胞,荧光显微镜观察感染效率,real-time PCR及免疫印迹检测SOCS3mRNA及蛋白表达。结果 rSOCS3腺病毒穿梭质粒酶切鉴定正确,测序与rSOCS3基因库中的序列完全相符。PCR鉴定pAd/PL-DEST腺病毒表达载体成功携带目的基因rSOCS3。TCD法测定的最终滴度为2×1010pfu/mL。荧光显微镜观察此病毒感染血管平滑肌细胞的效率在80%以上,real-time PCR及免疫印迹检测结果显示血管平滑肌细胞中SOCS3mRNA及蛋白表达明显上调。结论成功构建携带大鼠SOCS3基因的腺病毒载体,并在血管平滑肌细胞中高表达,为血管增殖性疾病转基因治疗的实验研究奠定了基础,具有一定的应用价值。; 关键词 SOCS3 腺病毒载体转基因治疗血管平滑肌细胞血管增殖性疾病; Keywords SOCS3 adenovirus vector transgenic therapy vascular smooth muscle cells vascular proliferative disease; 分类号 R349.8 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名腺病毒介导BTEB2反义RNA对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用被引量：2: 4; 作者李德何国祥唐波唐兵; 机构第三军医大学西南医院心血管内科重庆介入心脏病学研究所; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期388-391,共4页; 文摘目的　构建携带反义锌指转录因子 2 (basictranscriptionelementbindingprotein 2 ,BTEB2 )基因的重组腺病毒载体并研究BTEB2反义RNA对平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecell,VSMC)增殖的影响。方法　从培养的大鼠VSMC中提取总RNA ,通过RT PCR制备BTEB2cDNA ,将其反向克隆至腺病毒载体 ,构建携带反义BTEB2基因的重组腺病毒Ad .ASBTEB2 ;用Ad .ASBTEB2转染VSMC ,通过RT -PCR检测BTEB2反义RNA在VSMC中的表达 ;经免疫印迹法分析BTEB2反义RNA对BTEB2蛋白质表达的抑制作用 ;通过MTT比色法和流式细胞仪分别检测BTEB2反义RNA对VSMC增殖及细胞周期的影响。结果　构建的重组腺病毒载体经鉴定正确 ,其滴度为 5× 10 9/ml ;VSMC被重组腺病毒感染后 ,可检测到BTEB2反义RNA的表达 ;Ad .ASBTEB2转染可明显抑制VSMC的BTEB2蛋白表达及血清诱导的VSMC增殖 ,使VSMC出现明显的G0 /G1期阻滞。结论　成功构建了携带反义BTEB2基因的重组腺病毒载体 ;重组腺病可在VSMC中表达BTEB2反义RNA ;; 关键词 BTEB2 反义RNA 腺病毒载体血管平滑肌细胞; Keywords BTEB2 antisense RNA adenoviral vector vascular smooth muscle cell; 分类号 R322.12 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] R329.28 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人KLK1和EGFP双顺反子重组腺病毒构建及其在血管平滑肌细胞中的表达被引量：6: 5; 作者余惠珍谢良地朱鹏立许昌声王华军李体远; 机构福建省高血压病研究所福建医科大学省立临床医学院二内科深圳市人民医院; 出处《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期411-416,共6页; 基金福建省教授发展基金资助项目(No.JS06042) 福建省医学创新课题资助项目(No.2007-CX-14); 文摘目的:构建携EGFP为报告基因和人组织激肽释放酶1(hKLK1)基因双顺反子的重组腺病毒(Ad-hKLK1-IRES-EGFP),并观察在自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞(VSMCs)中的表达变化。方法:通过双酶切质粒pBluescritII KS-hKLK1,将hKLK1基因定向克隆至带有IRES-EGFP的腺病毒穿梭质粒pDC316中,构建成重组穿梭质粒,将其与腺病毒骨架质粒pBHGloxE1,3Cre共转染293A细胞,经包装并获得重组腺病毒,用PCR、酶切及测序方法对其进行鉴定,测定病毒滴度;用重组腺病毒感染VSMCs,用荧光显微镜下观察到的绿色荧光来测定感染率,用RT-PCR和Western blotting法测定hKLK1基因在VSMCs中的表达。结果:PCR、酶切和测序表明携EGFP的重组穿梭质粒pDC316-hKLK1-IRES-EGFP构建正确,并与骨架质粒在293A细胞中成功包装出重组腺病毒Ad-hKLK1-IRES-EGFP,其滴度为4.5×1011/L。重组腺病毒感染VSMCs后,在荧光显微镜下观察到明亮绿色荧光蛋白表达,感染率高达90%以上,可检测到hKLK1基因的mRNA及蛋白表达,并与感染时间(1 d-7 d)有显著依赖关系,峰值感染复数为100 MOI。结论:成功构建并包装了携EGFP和hKLK1基因的双顺反子重组腺病毒载体系统Ad-hKLK1-IRES-EGFP;感染VSMCs可检测到基因hKLK1和EGFP的独立共同高表达,该系统为一直观、安全、高效的基因转移系统。; 关键词基因人组织激肽释放酶重组腺病毒载体血管平滑肌细胞绿色荧光蛋白; Keywords Genes, human tissue kallikrein Recombinant adenovirus vector Vascular smooth muscle cells Green fluorescent protein; 分类号 R363 [医药卫生—病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名反义VEGF 165基因关节腔注射抑制大鼠胶原性关节炎形成的病理观察被引量：3: 6; 作者王建华黄华杨尹庆水刘延龄黄盛东; 机构广州军区广州总医院骨科第二军医大学长海医院胸心外科实验室; 出处《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期99-100,共2页; 基金广东省卫生厅科研基金(A2003589); 文摘目的:观察反义血管内皮生长因子(VEGF)165基因体内转染对大鼠类风湿关节炎形成的影响。方法:Wistard大鼠30只,关节炎诱导2周后随机等分为3组,并分别给予相应处理:A组(关节腔注射100μl生理盐水)、B组(关节腔注射100μl空病毒载体)和C组(关节腔注射100μl反义VEGF165重组腺病毒); 4周后处死大鼠,对关节炎的发病情况、病理评分、X线放射学评分结果进行对比研究。结果:给药4周后,C组大鼠的关节肿胀程度明显轻于A、B组; C组的病理评分低于A、B组;藏红花红染色显示C组关节软骨多糖破坏轻于A、B组。结论:腺病毒介导的反义VEGF基因转染可以有效地减轻胶原性关节炎的症状,减轻滑膜血管翳对关节软骨的破坏和病理改变。; 关键词腺病毒载体反义基因血管内皮生长因子类风湿关节炎; 分类号 R593.22 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	反义α肌动蛋白基因腺病毒载体对TGF-β1刺激的肾小管上皮细胞转分化的影响	干磊吴雄飞吴亿	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	反义BTEB2腺病毒载体的构建及其在血管平滑肌细胞中的表达	李德何国祥唐波	《医学研究生学报》 CAS	2004	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	大鼠SOCS3基因重组腺病毒载体的构建及转染血管平滑肌细胞后的表达	向水董念国刘金平史嘉玮肖雅琼王玉	《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2012	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	腺病毒介导BTEB2反义RNA对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用	李德何国祥唐波唐兵	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2005	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	人KLK1和EGFP双顺反子重组腺病毒构建及其在血管平滑肌细胞中的表达	余惠珍谢良地朱鹏立许昌声王华军李体远	《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心	2008	6	在线阅读下载PDF 职称材料
6	反义VEGF 165基因关节腔注射抑制大鼠胶原性关节炎形成的病理观察	王建华黄华杨尹庆水刘延龄黄盛东	《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2005	3	在线阅读下载PDF 职称材料