CTRP3对TGF-β_1诱导的血管外膜成纤维细胞增殖及α-SMA表达的影响 被引量：7

1

作者 林绍慧 盛净 +3 位作者 马绍骏 陆平 蔡文玮 胡萍 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期274-278,共5页

目的探讨C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的血管外膜成纤维细胞(AFs)增殖以及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的调节作用。方法采用细胞贴壁法培养SD大鼠胸主动脉AFs;CCK-8检测不同浓度CTRP3(0.1、1、10... 目的探讨C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的血管外膜成纤维细胞(AFs)增殖以及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的调节作用。方法采用细胞贴壁法培养SD大鼠胸主动脉AFs;CCK-8检测不同浓度CTRP3(0.1、1、10和50μg/mL)对AFs增殖的影响;免疫荧光、Real-Time PCR和Western blotting检测CTRP3对AFsα-SMA表达的影响。结果 CTRP3可呈剂量依赖性抑制TGF-β1诱导的AFs增殖,随着浓度升高,其抑制能力增强,浓度为10μg/mL时,其对AFs增殖的抑制作用最强(P<0.01);免疫荧光、Real-Time PCR和Western blotting结果显示,CTRP3可明显抑制TGF-β1诱导的α-SMA mRNA和蛋白表达(P<0.01)。结论 CTRP3可在体外抑制TGF-β1诱导AFs的增殖和α-SMA表达,提示其潜在的改善病理性血管重构作用。 展开更多

关键词 血管外膜成纤维细胞 C1 q肿瘤坏死因子相关蛋白 3 转化生长因子β1 Α-平滑肌肌动蛋白 增殖

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干扰素诱导蛋白16对人脑血管外膜成纤维细胞增殖与迁移的影响及其机制 被引量：10

2

作者 黄晶 宋方 +1 位作者 龙向淑 吴强 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期584-589,共6页

目的:研究干扰素诱导蛋白16(IFI16)对人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAFs)增殖与迁移的影响及其可能机制。方法:在HBVAFs中转染针对IFI16基因的小分子干扰RNA(siRNA)48 h后,用2×106U/L干扰素-α(IFN-α)处理转染IFI16 siRNA细胞24 h。... 目的:研究干扰素诱导蛋白16(IFI16)对人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAFs)增殖与迁移的影响及其可能机制。方法:在HBVAFs中转染针对IFI16基因的小分子干扰RNA(siRNA)48 h后,用2×106U/L干扰素-α(IFN-α)处理转染IFI16 siRNA细胞24 h。流式细胞术测定细胞周期,细胞划线法与Transwell法测定细胞迁移能力。应用real-time PCR法和蛋白免疫印迹(Western blotting)法分别测定细胞中IFI16、p53及p21 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果:转染IFI16 siRNA后,HBVAFs中IFI16、p53及p21 mRNA和蛋白表达水平下调,增加了细胞G1/S期转换。IFN-α可诱导HBVAFs中IFI16、p53及p21mRNA和蛋白表达水平上调,同时抑制细胞G1/S期转换与细胞迁移,但在转染了IFI16 siRNA的HBVAFs中IFN-α的上述作用受到抑制。结论:IFI16表达可以抑制HBVAFs增殖和迁移,其机制可能与激活p53和p21的表达有关。 展开更多

关键词 干扰素诱导蛋白 血管外膜成纤维细胞 细胞增殖 细胞迁移

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IFN-α通过IFI16抑制人脑血管外膜成纤维细胞增殖并促进细胞凋亡 被引量：5

3

作者 黄晶 宋方 +2 位作者 龙向淑 田茂波 吴强 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期494-497,共4页

目的:探讨干扰素-α(IFN-α)是否通过诱导干扰素诱导蛋白16(IFI16)表达抑制人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAFs)增殖与促进细胞凋亡。方法:应用转染针对IFI16基因的小干扰RNA(siRNA)和/或IFN-α瞬时干预体外培养的HBVAFs。通过蛋白免疫印迹(... 目的:探讨干扰素-α(IFN-α)是否通过诱导干扰素诱导蛋白16(IFI16)表达抑制人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAFs)增殖与促进细胞凋亡。方法:应用转染针对IFI16基因的小干扰RNA(siRNA)和/或IFN-α瞬时干预体外培养的HBVAFs。通过蛋白免疫印迹(Western blot)法和Real-time PCR法测定细胞中IFI16、P53、P21蛋白和mRNA表达水平的变化。用MTT法检测细胞活力,流式细胞术测定细胞周期及凋亡。结果:与未干预组比较,IFN-α(2 000~5 000 kU/L)干预HBVAFs后,IFI16蛋白表达水平明显上调,但不同浓度IFN-α组之间无统计学差异。使用2 000 kU/L IFN-α可诱导HBVAFs中P53及P21蛋白和mRNA表达水平上调,同时抑制细胞增殖与促进细胞凋亡。但在转染了IFI16 siRNA的HBVAFs中IFN-α的上述作用受到了抑制。结论:IFN-α抑制HBVAFs增殖与促进其凋亡的作用可能部分与其诱导IFI16表达有关。 展开更多

关键词 干扰素诱导蛋白 干扰素-Α 血管外膜成纤维细胞 增殖 凋亡

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干扰素诱导蛋白p204过表达抑制大鼠主动脉血管外膜成纤维细胞凋亡、增殖与迁移 被引量：4

4

作者 宋方 田茂波 +2 位作者 肖燕 龙向淑 吴强 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2015年第11期1110-1114,共5页

目的:观察干扰素诱导蛋白p204过表达对大鼠主动脉血管外膜成纤维细胞(VAFs)凋亡、增殖与迁移的影响。方法:分别应用携带p204基因(Ifi204)的慢病毒颗粒(Ifi204-Lv组)、空载慢病毒颗粒(Con-Lv组)感染VAFs,未经处理的VAFs作为阴性对照组。... 目的:观察干扰素诱导蛋白p204过表达对大鼠主动脉血管外膜成纤维细胞(VAFs)凋亡、增殖与迁移的影响。方法:分别应用携带p204基因(Ifi204)的慢病毒颗粒(Ifi204-Lv组)、空载慢病毒颗粒(Con-Lv组)感染VAFs,未经处理的VAFs作为阴性对照组。用噻唑蓝(MTT)比包法检测VAFs增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,细胞划痕法和Transwell法测定细胞迁移情况,应用实时定量逆转录-聚合酶链反应(realtime q RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blotting)分别检测p204、抑癌因子p53及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p21WAF(p21)的mRNA和蛋白表达。结果:Ifi204-Lv组与Con-Lv组、阴性对照组相比较,细胞增殖降低[(吸光度值),48 h:0.53±0.05 vs 0.66±0.03、0.63±0.06;72 h.0.89±0.06 vs 1.02±0.06、1.01±0.07]及迁移距离缩短[(像素),61.00±1.83 vs 74.50±6.25、75.50±7.85]、数量降低(61.75±10.69 vs 155.25±10.21、153.75±9.40),差异均有统计学意义(P均<0.05),但组问比较细胞凋亡率差异无统计学意义。与Con-Lv组、阴性对照组相比,Ifi204-Lv组的p204(3.45±0.15 vs 2.09±0.10、2.06±0.09)、p53(3.41±0.09 vs2.06±0.07、2.10±0.06)及p21(3.0l±0.08 vs2.05±0.06、2.11±0.08)的mRNA和蛋白表达均上调,差异均有统计学葸义(P均<0.05)。结论:p204过表达可抑制大鼠VAFs增殖与迁移,其机制可能部分与激活p53及p21表达有关。 展开更多

关键词 干扰素诱导蛋白 P204 血管外膜成纤维细胞 凋亡 增殖 迁移

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RhoA对AngⅡ诱导的血管外膜成纤维细胞增殖的影响 被引量：3

5

作者 楚玉峰 陈闻东 +1 位作者 朱鼎良 高平进 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1181-1184,共4页

目的构建dominant negative N19RhoA重组腺病毒并感染血管外膜成纤维细胞(AF),观察RhoA对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的AF增殖的影响。方法运用pAdEasy-1腺病毒载体系统,细菌同源重组法构建含目的基因N19RhoA的腺病毒重组质粒pAd-CMV-N19Rh... 目的构建dominant negative N19RhoA重组腺病毒并感染血管外膜成纤维细胞(AF),观察RhoA对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的AF增殖的影响。方法运用pAdEasy-1腺病毒载体系统,细菌同源重组法构建含目的基因N19RhoA的腺病毒重组质粒pAd-CMV-N19RhoA-eGFP,并感染体外培养的大鼠AF,然后用1×10-7mol/L的AngⅡ处理24 h。Rho pull-down分析法测定RhoA活性;BrdU ELISA法检测AF的增殖情况。以同时构建的pAd-CMV-eGFP作为对照。结果1×10-7mol/L AngⅡ处理感染pAd-CMV-N19 RhoA-eGFP的AF 30 min后,其GTP-RhoA的表达明显升高,提示AngⅡ可激活RhoA信号分子;感染pAd-CMV-N19 RhoA-eGFP的AF,AngⅡ诱导的BrdU掺入明显受到抑制。结论RhoA信号分子对AngⅡ诱导的AF增殖具有调节作用。 展开更多

关键词 血管紧张素Ⅱ RHOA 血管外膜成纤维细胞 增殖 腺病毒

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丹参有效成分最佳配伍对载脂蛋白E^(-/-)小鼠血管外膜成纤维细胞增殖的影响 被引量：4

6

作者 张帅 安胜军 +6 位作者 崔清卓 周勇杰 武若愚 宁浚达 冯慧敏 张宇 徐红俊 《世界中医药》 CAS 2023年第3期320-323,共4页

目的:探讨丹参水溶性有效成分最佳配伍(SABP)对载脂蛋白E^(-/-)小鼠体内和体外血管外膜成纤维细胞(VAFs)增殖的干预作用。方法:对原代培养C57BL/6J小鼠、载脂蛋白E^(-/-)小鼠VAFs,体外分别给予正常培养基、SABP、瑞舒伐他汀。将载脂蛋白... 目的:探讨丹参水溶性有效成分最佳配伍(SABP)对载脂蛋白E^(-/-)小鼠体内和体外血管外膜成纤维细胞(VAFs)增殖的干预作用。方法:对原代培养C57BL/6J小鼠、载脂蛋白E^(-/-)小鼠VAFs,体外分别给予正常培养基、SABP、瑞舒伐他汀。将载脂蛋白E^(-/-)小鼠分为模型组、SABP组、瑞舒伐他汀组,C57BL/6J小鼠作正常对照组,原代培养给药后的各组小鼠VAFs,采用CCK-8法检测VAFs的增殖情况。结果:体外和体内结果均显示,SABP和瑞舒伐他汀均明显抑制了载脂蛋白E^(-/-)小鼠VAFs的增殖,且SABP作用更显著。结论:SABP对载脂蛋白E^(-/-)小鼠VAFs的增殖有明显的抑制作用,有望改善血管重构,成为治疗心血管疾病替代药物。 展开更多

关键词 丹参 丹酚酸A 丹酚酸B 丹参素 原儿茶醛 血管外膜成纤维细胞 增殖 血管重塑

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尼莫地平调控IRS-1对人脑血管外膜成纤维细胞活力和凋亡的影响 被引量：3

7

作者 袁岗 肖宗宇(指导) +2 位作者 李文辉 曹立新 惠超杰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1171-1176,共6页

目的:探讨尼莫地平对人脑血管外膜成纤维细胞活力、凋亡的影响及其对胰岛素受体底物-1(IRS-1)的调控机制。方法:体外培养人脑血管外膜成纤维细胞,分为NC组、IFN-α组和共同处理组,其中共同处理组分别采用不同浓度(50、100、200μg/ml)... 目的:探讨尼莫地平对人脑血管外膜成纤维细胞活力、凋亡的影响及其对胰岛素受体底物-1(IRS-1)的调控机制。方法:体外培养人脑血管外膜成纤维细胞,分为NC组、IFN-α组和共同处理组,其中共同处理组分别采用不同浓度(50、100、200μg/ml)的尼莫地平与IFN-α共同处理人脑血管外膜成纤维细胞,分别记作IFN-α+Nimo 50μg/ml组、IFN-α+Nimo 100μg/ml组、IFN-α+Nimo 200μg/ml组;MTT检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;qRT-PCR与Western blot分别检测IRS-1表达;分别将pcDNA、pcDNA-IRS-1转染至细胞,分别将si-con、si-IRS-1转染至细胞随后采用尼莫地平处理细胞,采用上述方法检测细胞活力及凋亡率。结果:NC组、IFN-α组、IFN-α+Nimo 50μg/ml组、IFN-α+Nimo 100μg/ml组、IFN-α+Nimo 200μg/ml组72 h时细胞活力分别为1.16±0.09、0.71±0.07、0.88±0.06、0.96±0.08、1.03±0.11;细胞凋亡率分别为(3.51±0.32)%、(21.84±2.23)%、(14.39±1.15)%、(9.18±1.03)%、(8.37±0.94)%;IRS-1蛋白表达水平分别为0.67±0.06、0.19±0.03、0.33±0.04、0.47±0.05、0.59±0.06,NC组、IFN-α组、IFN-α+Nimo 50μg/ml组、IFN-α+Nimo 100μg/ml组、IFN-α+Nimo 200μg/ml组上述指标比较差异有统计学意义(P<0.05)。IFN-α+pcDNA组与IFN-α+pcDNA-IRS-1组72 h时细胞活力分别为0.76±0.06、1.04±0.07;细胞凋亡率分别为(20.75±2.07)%、(11.35±1.43)%,IFN-α+pcDNA组与IFN-α+pcDNA-IRS-1组上述指标比较差异有统计学意义(P<0.05)。IFN-α+Nimo+si-con组与IFN-α+Nimo+si-IRS-1组72 h时细胞活力分别为1.03±0.09、0.79±0.06;细胞凋亡率分别为(10.75±1.08)%、(15.36±1.25)%,IFN-α+Nimo+si-con组与IFN-α+Nimo+si-IRS-1组上述指标比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:尼莫地平可能通过上调IRS-1表达从而影响人脑血管外膜成纤维细胞增殖及凋亡。 展开更多

关键词 尼莫地平 IRS-1 人脑血管外膜成纤维细胞 细胞活力 凋亡

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晚期糖基化终产物对大鼠血管外膜成纤维细胞中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶p22phox亚基及活性氧表达的影响 被引量：5

8

作者 刘亚洋 李鹤 +1 位作者 吴宗贵 汤锡友 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2012年第3期228-231,共4页

目的:探讨晚期糖基化终产物(AGE)对大鼠血管外膜成纤维细胞(AF)中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶p22phox亚基及活性氧表达的影响。方法:用组织贴块法培养SD大鼠的血管外膜成纤维细胞,用逆转录—聚合酶链反应、蛋白质印迹检测不... 目的:探讨晚期糖基化终产物(AGE)对大鼠血管外膜成纤维细胞(AF)中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶p22phox亚基及活性氧表达的影响。方法:用组织贴块法培养SD大鼠的血管外膜成纤维细胞,用逆转录—聚合酶链反应、蛋白质印迹检测不同浓度的糖基化人血清白蛋白(AGE-HSA,分为对照组、100μg/ml AGE-HSA组,200μg/ml AGE-HSA组、300μg/ml AGE-HSA组)对NADPH氧化酶p22phox亚基信使核糖核酸(mRNA)及蛋白的表达的影响,并观察不同干预因素[分为对照组1、200μg/ml AGE-HSA组(200μg/ml处理组1)、200μg/ml AGE-HSA+50μg/ml抗RAGE中和抗体组(抗RAGE中和抗体组1)及200μg/ml AGE-HSA+30 nmol/L坎地沙坦组(坎地沙坦组1)对AGE-HSA上调NADPH氧化酶p22phox亚基mRNA和蛋白表达的影响。用2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐检测不同干预因素[空白对照组、AGE-HSA 200μg/ml组(200μg/ml处理组2)、200μg/ml AGE-HSA+50μg/ml抗RAGE中和抗体组(抗RAGE中和抗体组2)、200μg/ml AGE-HSA+30μmol/L夹竹桃素组(夹竹桃组),200μg/ml AGE-HSA+30 nmol/L坎地沙坦组(坎地沙坦组2)对血管外膜成纤维细胞内活性氧表达的影响。结果:3个浓度(100μg/ml、200μg/ml和300μg/ml)的AGE-HSA组均与对照组比较,血管外膜成纤维细胞NADPH氧化酶p22phox亚基mRNA及蛋白的表达随AGE-HSA增加呈浓度依赖性上调;抗RAGE中和抗体组1、坎地沙坦组1比200μg/ml处理组1的p22phox mRNA及蛋白表达降低;抗RAGE中和抗体组2、夹竹桃素组2及坎地沙坦组2比200μg/mlAGE-HSA处理组2血管外膜成纤维细胞内活性氧相对荧光强度降低,上述比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:AGE-HSA经由RAGE影响活性氧与NADPH氧化酶p22phox亚基的表达上调,活性氧的上调与NADPH氧化酶p22phox亚基表达相关。NADPH氧化酶抑制剂及坎地沙坦可通过下调NADPH氧化酶p22phox亚基的表达减少血管外膜成纤维细胞内活性氧的产生。 展开更多

关键词 晚期糖基化终产物 晚期糖基化终产物受体 血管外膜成纤维细胞 NADPH氧化酶 P22PHOX

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尾加压素Ⅱ促进血管外膜成纤维细胞表达肿瘤坏死因子α及其机制 被引量：2

9

作者 胡艳超 韩拓 +4 位作者 贾珊 徐阳 张春艳 张岩 王聪霞 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期23-26,54,共5页

目的研究尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,UⅡ)对大鼠血管外膜成纤维细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响和可能的细胞内信号转导机制。方法贴块法培养大鼠胸主动脉血管外膜成纤维细胞,取3～5代细胞于无血清DMEM培养基中加入不同浓度UⅡ(10-10... 目的研究尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,UⅡ)对大鼠血管外膜成纤维细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响和可能的细胞内信号转导机制。方法贴块法培养大鼠胸主动脉血管外膜成纤维细胞,取3～5代细胞于无血清DMEM培养基中加入不同浓度UⅡ(10-10～10^(-7) mol/L)孵育1～24h,观察UⅡ促进TNF-α分泌的浓度、时间曲线。在培养的细胞中加入不同信号转导通路抑制剂,处理30min后,加入UⅡ(10^(-7) mol/L)共孵育6h。提取上清,采用酶联免疫吸附测定法检测TNF-α分泌水平。结果 !UⅡ呈浓度、时间依赖性促进外膜成纤维细胞中TNF-α分泌,10^(-7) mol/L、6h达高峰(P<0.01)。(2)UⅡ促进外膜成纤维细胞分泌TNF-α的作用能被UⅡ受体阻断剂SB710411(10^(-7) mol/L)、蛋白激酶C抑制剂H7(10^(-5) mol/L)、ERK1/2抑制剂PD980959(10^(-5) mol/L)所抑制(P <0.01)。结论 UⅡ呈时间依赖性及浓度依赖性方式促进血管外膜成纤维细胞TNF-α表达,该作用通过激活UⅡ受体、蛋白激酶C和ERK1/2等信号通路来实现。 展开更多

关键词 尾加压素Ⅱ 肿瘤坏死因子Α 血管外膜成纤维细胞 心血管重塑

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血管外膜成纤维细胞及其还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶激活在血管损伤中的作用 被引量：5

10

作者 王洋 雷燕 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2015年第4期404-407,共4页

血管外膜是血管壁最复杂的组成部分,血管外膜成纤维细胞(AF)是血管外膜主要的细胞成分,在血管的病理生理过程中发挥着重要作用。AF的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶激活与活性氧生成是多种血管损伤的始发阶段和共同机制... 血管外膜是血管壁最复杂的组成部分,血管外膜成纤维细胞(AF)是血管外膜主要的细胞成分,在血管的病理生理过程中发挥着重要作用。AF的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶激活与活性氧生成是多种血管损伤的始发阶段和共同机制。本综述对AF及其NADPH氧化酶、活性氧在血管损伤中的作用进行了总结。 展开更多

关键词 血管外膜成纤维细胞 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶 血管损伤

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重组海葵溶细胞素及平颏海蛇磷脂酶A_2对血管外膜成纤维细胞增殖的影响 被引量：1

11

作者 欧阳平 姜孝玉 +2 位作者 杨文利 赖文岩 徐安龙 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第2期158-160,共3页

目的观察重组海葵溶细胞素(rSrc)及平颏海蛇磷脂酶A2(rPLA2)对成纤维细胞增殖的影响。方法体外培养成纤维细胞,应用不同浓度的rSrc和rPLA2分别进行作用并设立对照进行比较,采用非放射性的MTS/PES法确定成纤维细胞的增殖状态。结果各组... 目的观察重组海葵溶细胞素(rSrc)及平颏海蛇磷脂酶A2(rPLA2)对成纤维细胞增殖的影响。方法体外培养成纤维细胞,应用不同浓度的rSrc和rPLA2分别进行作用并设立对照进行比较,采用非放射性的MTS/PES法确定成纤维细胞的增殖状态。结果各组细胞增殖率分别为:对照组0.840±0.061、rSrc 100 μg/ml组0.263±0.044、rSrc 10 μg/ml组0.418±0.054、rSrc 1 μg/ml组0.605±0.063、rSrc 100 ng/ml组0.772±0.054、rSrc 10 ng/ml组0.906±0.072、rPLA2 100 μg/ml组0.498±0.076、rPLA2 10 μg/ml组0.937±0.112、rPLA2 1 μg/ml组0.978±0.145。统计分析显示,低至1 μg/ml的rSrc仍能明显抑制大鼠成纤维细胞的增殖(P<0.01),并呈现剂量依赖性(P<0.05)。rPLA2 100 μg/ml组与对照组相比细胞增殖率有显著差异(P<0.05);rPLA2 10 μg/ml和rPLA2 1 μg/ml组与对照组相比均无显著差异(P>0.05)。结论rSrc和rPLA2分别对血管外膜成纤维细胞增殖有一定的抑制作用。 展开更多

关键词 重组海葵溶细胞素 平颏海蛇磷脂酶A2 血管外膜成纤维细胞 细胞增殖 抑制作用

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17β-雌二醇抑制碱性成纤维细胞生长因子诱导的血管外膜成纤维细胞增殖 被引量：3

12

作者 胡飞雪 王庭槐 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2006年第2期122-125,共4页

目的探讨17β-雌二醇（E2）对碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）诱导的血管外膜成纤雏细胞（VAF）增殖的影响。方法将培养的血管外膜成纤维细胞分4组：对照组，单纯bFGF组，单纯E2组，bFGF4＋E2组。用3^H-Tdr掺入反映细胞DNA合成、3^H-Pro... 目的探讨17β-雌二醇（E2）对碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）诱导的血管外膜成纤雏细胞（VAF）增殖的影响。方法将培养的血管外膜成纤维细胞分4组：对照组，单纯bFGF组，单纯E2组，bFGF4＋E2组。用3^H-Tdr掺入反映细胞DNA合成、3^H-Proline掺入反映细胞的胶原合成状况；用Western Breeze检测血管外膜成纤维细胞中细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）、丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1（MKP-1）的蛋白表达及活性。结果bFGF使血管外膜成纤维细胞DNA合成增加18-23倍、胶原合成增加17-21倍、细胞数目增加18—22倍，E2可使bFGF的这些促血管外膜成纤维细胞增殖效应降低约50％。bFGF使VAF中ERK蛋白表达量增加350％，使ERK磷酸化蛋白表达量增加120％，B使bFGF诱导的VAF中ERK蛋白表达量下降44％，ERK磷酸化蛋白表达量下降22％；E2使bFGF诱导的VAF中MKP-1的蛋白表达量增加154％。结论E2可抑制bFGF诱导的VAF增殖，其抑制VAF增殖与抑制、VAF中ERK蛋白表达，降低ERK活性，促进MKP-1表达有关。 展开更多

关键词 雌二醇 成纤维细胞生长因子2 血管外膜成纤维细胞

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NR1D1在血管外膜成纤维细胞增殖和迁移中的作用 被引量：1

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作者 王明亮 胡陶 +3 位作者 王强 杨耀 孙雄山 杨大春 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期537-543,共7页

目的探讨核受体亚家族1组D成员1(nuclear receptor subfamily 1,group D,member 1,NR1D1)在小鼠血管外膜成纤维细胞(adventitial fibroblasts,AFs)增殖和迁移中的作用及机制。方法培养C57BL/6J小鼠原代AFs,用携带Nr1d1基因的腺病毒转染... 目的探讨核受体亚家族1组D成员1(nuclear receptor subfamily 1,group D,member 1,NR1D1)在小鼠血管外膜成纤维细胞(adventitial fibroblasts,AFs)增殖和迁移中的作用及机制。方法培养C57BL/6J小鼠原代AFs,用携带Nr1d1基因的腺病毒转染AFs过表达NR1D1,用SKL2001恢复β-连环蛋白(β-catenin)表达。增殖细胞核抗原(Ki-67)细胞免疫荧光染色和CCK-8试剂盒用于检测细胞增殖,划痕实验用于检测细胞迁移速度。qPCR检测Nr1d1的mRNA水平,Western blot检测NR1D1、β-catenin蛋白水平。为了探究NR1D1在血管内膜增生中的作用,将20只雄性野生型C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、颈动脉内皮损伤组、假手术+SR9009(NR1D1激动剂)组以及颈动脉内皮损伤+SR9009组,每组5只。造模完成后按组分别腹腔注射DMSO或SR9009(100 mg·kg^(-1)·d^(-1)),持续14 d。造模成功28 d后取材,HE染色观察颈动脉内膜增生程度。结果过表达NR1D1明显降低Ki-67阳性细胞率(P<0.01)及总细胞数目(P<0.01),并且使AFs划痕愈合速度减慢(P<0.01)。过表达NR1D1明显抑制β-catenin表达(P<0.05)。SKL2001恢复β-catenin表达后,过表达NR1D1对AFs增殖和迁移的抑制作用消失(P<0.01)。上调NR1D1活性能减轻颈动脉内皮损伤后内膜增生(P<0.01)。结论NR1D1可能通过抑制β-catenin表达,从而抑制小鼠AFs的增殖和迁移。 展开更多

关键词 血管外膜成纤维细胞 细胞增殖 细胞迁移 内膜增生 Β-连环蛋白 NR1D1

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羟基红花黄色素A通过激活自噬抑制ANGⅡ诱导的VAFs迁移 被引量：4

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作者 崔清卓 刘博宇 +5 位作者 李颖云 郑玉光 安胜军 刘玉 李爱英 赵京山 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1680-1687,共8页

目的探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)诱导的血管外膜成纤维细胞(vascular adventitial fibroblasts,VAFs)迁移的作用。方法组织法培养SD大鼠VAFs,细胞分为正常组、AngⅡ组、HSY... 目的探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)诱导的血管外膜成纤维细胞(vascular adventitial fibroblasts,VAFs)迁移的作用。方法组织法培养SD大鼠VAFs,细胞分为正常组、AngⅡ组、HSYA组、HSYA与自噬抑制剂Bafilomycin A1共处理组、Bafilomycin A1组;采用免疫荧光实验鉴定VAFs;CCK-8法分别建立AngⅡ和HSYA的量效时效曲线;划痕实验检测细胞迁移;采用MDC法检测各组细胞自噬小体数量;Western blot实验检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62表达。结果培养的细胞鉴定为VAFs;AngⅡ呈剂量、时间依赖性增强VAFs细胞活力,HSYA呈剂量、时间依赖性抑制VAFs细胞活力;AngⅡ明显促进VAFs迁移,HSYA以及HSYA和Baf共处理均可抑制AngⅡ诱导的VAFs迁移,而Baf处理则促进VAFs迁移;HSYA明显增加了自噬斑点数量,并促进自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin1的表达,抑制p62蛋白表达。结论HSYA通过激活自噬抑制AngⅡ诱导的VAFs迁移,改善血管重构。 展开更多

关键词 羟基红花黄色素A 血管外膜成纤维细胞 血管紧张素Ⅱ 迁移 自噬 血管重构

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