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血管基膜衍生多功能肽在大肠杆菌中的表达及抗肿瘤活性的测定
被引量：
10
1
作者
彭淑平
方唯意
+3 位作者
蒋日成
周建国
董琳
曹建国
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期678-682,共5页
目的 构建血管基膜衍生多功能肽(VBMDMP)原核表达载体、诱导表达GST-VBMDMP融合蛋白,观察其对Lewis肺癌自发转移瘤模型的影响。方法 人工合成VB-MDMP DNA序列(人源性IgG3上游铰链区连接肽连接的Tumstatin的两个功能区获得性肽基因序列)...
目的 构建血管基膜衍生多功能肽(VBMDMP)原核表达载体、诱导表达GST-VBMDMP融合蛋白,观察其对Lewis肺癌自发转移瘤模型的影响。方法 人工合成VB-MDMP DNA序列(人源性IgG3上游铰链区连接肽连接的Tumstatin的两个功能区获得性肽基因序列),构建克隆载体PUC19-VBMDMP,亚克隆到pGEX-4T-1原核表达载体上,经测序和酶切分析鉴定获得了未发生移码突变的PGEX-4T-1-VBMDMP融合载体质粒。转化入大肠杆菌后,用 IPTG诱导表达融合蛋白。Glutathione sepharose 4B层析柱纯化蛋白表达产物。采用Lewis肺癌自发转移瘤模型,检测VBMDMP的抗肿瘤作用。结果 成功的构建pUC19-VB-MDMP克隆和pGEX-4T-1-VBMDMP表达载体,在大肠杆菌获得稳定表达,用Glutathione sepharose 4B层析柱获得纯化的GST-VBMDMP融合蛋白。VBMDMP(GST-VBM-DMP 10、6、2 mg·kg^(-1))对小鼠Lewis肺癌原发瘤具有抑制作用(瘤重抑制率分别为95.5％,80.4％,60.05％)。VBMDMP(GST-VBMDMP 10,6,2 mg·kg^(-1))对小鼠Lewis肺癌自发性肺转移具有抑制作用(自发性肺转移瘤结节抑制率分别为94.8％,86.4％,73.9％)。结论 VBM-DMP对小鼠Lewis肺癌原发瘤和肺转移具有抑制作用。
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关键词
血管基膜衍生多功能肽
原核表达
LEWIS肺癌
治疗作用
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职称材料
血管基膜衍生多功能肽的表达及其生物活性的鉴定
2
作者
戴文建
张曼
+1 位作者
彭淑平
曹建国
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2006年第6期423-428,共6页
目的：在毕赤酵母中表达血管基膜衍生多功能肽（vascular basement membrane—derived mulifunctional peptide，VB—MDMP），并鉴定其生物学活性。方法：利用PCR技术获得融合了谷胱甘肽转移酶（GST）的肿瘤抑素（tumstatin）活性成分的...
目的：在毕赤酵母中表达血管基膜衍生多功能肽（vascular basement membrane—derived mulifunctional peptide，VB—MDMP），并鉴定其生物学活性。方法：利用PCR技术获得融合了谷胱甘肽转移酶（GST）的肿瘤抑素（tumstatin）活性成分的GST—VBMDMP基因，克隆到pPIC9K载体；然后原生质体转化法转化毕赤酵母细胞，行多克隆筛选和表型鉴定。获得His’Muts表型的转化子，在MGY培养液中30℃摇床培养，每24h从培养液中转移1ml培养液上清于-70℃保存，并保持培养瓶中培养液的量和培养液中甲醇0．5％的浓度不变，第9天行SDS—PAGE检测表达的蛋白并纯化，然后进行细胞和动物生物活性检测。结果：SDS—PAGE发现阳性重组子在MGY培养液中表达的蛋白量在1～7d逐渐增加，到第8天后开始减少，用Gluta—thioneSepharose4B亲和层析柱纯化获得GST—VBMDMP融合蛋白；GST—VBMDMP能抑制C57BL／6鼠动脉内皮细胞管状结构的形成；同时GST—VBMDMP（2、6、10mg／kg）对小鼠Lewis肺癌原发瘤（瘤重抑制率分别为96．6％、82．1％、61．2％）和自发性肺转移瘤（瘤结节抑制率分别为96．8％、87．9％、75、3％）均具有明显的抑制作用（P〈0.01）。结论：VBMDMP能够抑制鼠动脉内皮细胞管状结构的形成，并对小鼠Lewis肺癌原发瘤和肺转移具有明显的抑制作用。
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关键词
血管基膜衍生多功能肽
抗肿瘤
血管
形成抑制剂
血管
基底膜
内皮细胞
血管
化
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职称材料
题名
血管基膜衍生多功能肽在大肠杆菌中的表达及抗肿瘤活性的测定
被引量：
10
1
作者
彭淑平
方唯意
蒋日成
周建国
董琳
曹建国
机构
南华大学肿瘤研究所
中南大学肿瘤所重点实验室
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期678-682,共5页
基金
湖南省教育厅科研项目资助课题
No 99C202
+1 种基金
湖南省卫生厅重点科研项目资助课题
No 2001-Y055
文摘
目的 构建血管基膜衍生多功能肽(VBMDMP)原核表达载体、诱导表达GST-VBMDMP融合蛋白,观察其对Lewis肺癌自发转移瘤模型的影响。方法 人工合成VB-MDMP DNA序列(人源性IgG3上游铰链区连接肽连接的Tumstatin的两个功能区获得性肽基因序列),构建克隆载体PUC19-VBMDMP,亚克隆到pGEX-4T-1原核表达载体上,经测序和酶切分析鉴定获得了未发生移码突变的PGEX-4T-1-VBMDMP融合载体质粒。转化入大肠杆菌后,用 IPTG诱导表达融合蛋白。Glutathione sepharose 4B层析柱纯化蛋白表达产物。采用Lewis肺癌自发转移瘤模型,检测VBMDMP的抗肿瘤作用。结果 成功的构建pUC19-VB-MDMP克隆和pGEX-4T-1-VBMDMP表达载体,在大肠杆菌获得稳定表达,用Glutathione sepharose 4B层析柱获得纯化的GST-VBMDMP融合蛋白。VBMDMP(GST-VBM-DMP 10、6、2 mg·kg^(-1))对小鼠Lewis肺癌原发瘤具有抑制作用(瘤重抑制率分别为95.5％,80.4％,60.05％)。VBMDMP(GST-VBMDMP 10,6,2 mg·kg^(-1))对小鼠Lewis肺癌自发性肺转移具有抑制作用(自发性肺转移瘤结节抑制率分别为94.8％,86.4％,73.9％)。结论 VBM-DMP对小鼠Lewis肺癌原发瘤和肺转移具有抑制作用。
关键词
血管基膜衍生多功能肽
原核表达
LEWIS肺癌
治疗作用
Keywords
vascular basement membrane-de-rived multifunctional peptide
prokaryotic expres-sion
Lewis lung carcinoma
therapeutic action
分类号
R322.12 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R341 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
血管基膜衍生多功能肽的表达及其生物活性的鉴定
2
作者
戴文建
张曼
彭淑平
曹建国
机构
湖南环境生物职业技术学院
中南大学肿瘤研究所
南华大学肿瘤研究所
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2006年第6期423-428,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30472040)
文摘
目的：在毕赤酵母中表达血管基膜衍生多功能肽（vascular basement membrane—derived mulifunctional peptide，VB—MDMP），并鉴定其生物学活性。方法：利用PCR技术获得融合了谷胱甘肽转移酶（GST）的肿瘤抑素（tumstatin）活性成分的GST—VBMDMP基因，克隆到pPIC9K载体；然后原生质体转化法转化毕赤酵母细胞，行多克隆筛选和表型鉴定。获得His’Muts表型的转化子，在MGY培养液中30℃摇床培养，每24h从培养液中转移1ml培养液上清于-70℃保存，并保持培养瓶中培养液的量和培养液中甲醇0．5％的浓度不变，第9天行SDS—PAGE检测表达的蛋白并纯化，然后进行细胞和动物生物活性检测。结果：SDS—PAGE发现阳性重组子在MGY培养液中表达的蛋白量在1～7d逐渐增加，到第8天后开始减少，用Gluta—thioneSepharose4B亲和层析柱纯化获得GST—VBMDMP融合蛋白；GST—VBMDMP能抑制C57BL／6鼠动脉内皮细胞管状结构的形成；同时GST—VBMDMP（2、6、10mg／kg）对小鼠Lewis肺癌原发瘤（瘤重抑制率分别为96．6％、82．1％、61．2％）和自发性肺转移瘤（瘤结节抑制率分别为96．8％、87．9％、75、3％）均具有明显的抑制作用（P〈0.01）。结论：VBMDMP能够抑制鼠动脉内皮细胞管状结构的形成，并对小鼠Lewis肺癌原发瘤和肺转移具有明显的抑制作用。
关键词
血管基膜衍生多功能肽
抗肿瘤
血管
形成抑制剂
血管
基底膜
内皮细胞
血管
化
Keywords
vascular basement membrane-derived muhifunctional peptide
anti-tumor
angiogenesis inhibitor
vascular basement membrane
tube structure formation of endothelial cell
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
血管基膜衍生多功能肽在大肠杆菌中的表达及抗肿瘤活性的测定
彭淑平
方唯意
蒋日成
周建国
董琳
曹建国
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
10
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
血管基膜衍生多功能肽的表达及其生物活性的鉴定
戴文建
张曼
彭淑平
曹建国
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2006
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