血管内皮生长因子单链抗体在大肠埃希菌中的高效表达

1

作者 张冀原 陈羽 +2 位作者 林涵 何晴 徐威 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2019年第2期50-55,共6页

以血管内皮生长因子单链抗体(pTA-anti-VEGF-scFv)为研究对象,考察不同培养基配方和培养条件对血管内皮生长因子单链抗体表达量的影响。经均匀设计试验,确定工程菌R22-4高效表达重组抗体的最佳培养基为以2×YT培养基为基础,添加质... 以血管内皮生长因子单链抗体(pTA-anti-VEGF-scFv)为研究对象,考察不同培养基配方和培养条件对血管内皮生长因子单链抗体表达量的影响。经均匀设计试验,确定工程菌R22-4高效表达重组抗体的最佳培养基为以2×YT培养基为基础,添加质量分数为0.3%葡萄糖、1.0%酪蛋白胨、0.4%玉米浆、0.133%KH_2PO_4、0.159 6%K_2HPO_4、0.532%NaCl、0.01%微量元素、0.04%维生素B_1;诱导条件为30℃、0.1 mmol/L IPTG(异丙基硫代半乳糖苷,Isopropylβ-D-Thiogalactoside)诱导5 h。经ELISA (酶联免疫吸附测定,enzyme linked immunosorbent assay)检测,血管内皮生长因子单链抗体的表达量是原始对照组的2.27倍,实现了血管内皮生长因子单链抗体在大肠埃希菌中的高效表达。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子单链抗体 条件优化 大肠埃希菌 表达

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抗人血管内皮生长因子单克隆抗体抑制人颊鳞癌生长的实验研究 被引量：7

2

作者 房思炼 王大章 +3 位作者 杨西川 李虹 郑光勇 张静仪 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期89-91,共3页

目的 :研究抗人血管内皮生长因子 (VEGF)单抗E1 1 抑制移植性人颊鳞癌血管生成 ,从而抑制颊癌生长的作用效果。方法 :接种人颊鳞癌BCaCD885细胞株的BALB c裸小鼠分别通过腹腔或瘤周皮下注射抗人VEGF单抗或生理盐水。每隔 3d测量瘤体积 1... 目的 :研究抗人血管内皮生长因子 (VEGF)单抗E1 1 抑制移植性人颊鳞癌血管生成 ,从而抑制颊癌生长的作用效果。方法 :接种人颊鳞癌BCaCD885细胞株的BALB c裸小鼠分别通过腹腔或瘤周皮下注射抗人VEGF单抗或生理盐水。每隔 3d测量瘤体积 1次 ,接种后第 18天处死裸鼠并称取瘤重 ,计算抑瘤率。结果 :①不同给药途径的抗人VEGF单抗对颊癌的生长均有明显的抑制作用 ,与生理盐水组相比较有显著性差异 ,其抑瘤率分别为 6 0 1%、6 9 9%。②腹腔、瘤周皮下两种注射方式比较 ,瘤周皮下组的抑瘤效果更为显著。结论 :肿瘤中的VEGF是抗肿瘤血管生成的理想靶目标 ,而抗人VEGF单抗又是该抑癌新途径的理想选择 。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子 单克隆抗体 肿瘤生长 血管生成 动物模型 颊鳞癌 抑制作用 颊癌

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抗人血管内皮生长因子单克隆抗体对荷人颊癌裸鼠血清中血管内皮生长因子水平的影响 被引量：1

3

作者 房思炼 王大章 +2 位作者 张静仪 郑光勇 杨西川 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期320-322,共3页

目的　定量测定抗人血管内皮生长因子 (VEGF)单抗E1 1 组、生理盐水组荷人颊癌裸鼠血清中VEGF含量并进行比较 ,以观察E1 1 对体内可溶性VEGF水平的影响。方法　接种人颊鳞癌的BALB c裸小鼠分别通过腹腔或瘤周皮下注射E1 1 或生理盐水。... 目的　定量测定抗人血管内皮生长因子 (VEGF)单抗E1 1 组、生理盐水组荷人颊癌裸鼠血清中VEGF含量并进行比较 ,以观察E1 1 对体内可溶性VEGF水平的影响。方法　接种人颊鳞癌的BALB c裸小鼠分别通过腹腔或瘤周皮下注射E1 1 或生理盐水。接种后第 18天处死 ,收集裸鼠血清 ,采用改进的间接ELISA法定量测定VEGF含量。结果　E1 1 组裸鼠血清中VEGF含量均显著低于生理盐水组 ,其中E1 1 瘤周皮下组VEGF水平最低 ,仅 (1 17±0 13) μg L。结论　抗人VEGF单抗是通过中和VEGF而阻断其发挥促肿瘤血管生成的作用 ,从而产生抑瘤效应。荷人颊癌裸鼠血清中VEGF的水平与其荷瘤的瘤重呈正相关关系 ,提示恶性肿瘤患者血清中的VEGF是新的肿瘤标志物。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子 单克隆抗体 酶联免疫吸附实验

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血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体的制备及鉴定 被引量：1

4

作者 石琦 单冰 +4 位作者 高晨 姜慧英 张宝云 韩俊 董小平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期142-143,146,共3页

目的:制备血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体(mAb),并对其特性进行鉴定。方法:以重组His-Trx-VEGF1-165蛋白为抗原,通过免疫、融合、克隆和筛选等方法制备VEGF mAb,制备小鼠腹水并测定其效价、染色体数目及免疫球蛋白亚类,用Western blo... 目的:制备血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体(mAb),并对其特性进行鉴定。方法:以重组His-Trx-VEGF1-165蛋白为抗原,通过免疫、融合、克隆和筛选等方法制备VEGF mAb,制备小鼠腹水并测定其效价、染色体数目及免疫球蛋白亚类,用Western blot方法分析其特异性。结果:成功筛选出能稳定分泌的VEGF mAb杂交瘤细胞株4E4-H5,制备腹水的ELISA效价为1∶106;染色体数目为105条;抗体分型为IgG1亚型,κ轻链;Western blot证实所获得的mAb可与VEGF全长蛋白发生特异性反应,但是与融合蛋白的标签蛋白His-Trx不发生反应。结论:制备的杂交瘤细胞株能稳定分泌高滴度和高特异性的VEGF mAb,为建立能够用于肝癌诊断的血清VEGF检测技术提供了参考。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验

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抗人血管内皮生长因子单克隆抗体抑癌作用的形态学观察及作用机制探讨 被引量：2

5

作者 房思炼 王大章 +3 位作者 杨西川 何志秀 张杰 郑光勇 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期138-140,146,共4页

目的 :研究抗人血管内皮生长因子 (VEGF)单抗E1 1 抑制颊癌组织的形态学改变 ,并探讨E1 1 抑癌效应的机制。方法 :接种人颊鳞癌的BALB c裸小鼠分别通过腹腔或瘤周皮下注射抗人VEGF单抗或生理盐水。接种后第 18天处死 ,取颊癌组织进行光... 目的 :研究抗人血管内皮生长因子 (VEGF)单抗E1 1 抑制颊癌组织的形态学改变 ,并探讨E1 1 抑癌效应的机制。方法 :接种人颊鳞癌的BALB c裸小鼠分别通过腹腔或瘤周皮下注射抗人VEGF单抗或生理盐水。接种后第 18天处死 ,取颊癌组织进行光镜及透射电镜观察。结果 :E1 1 组颊癌组织中血管分布稀少、存在囊性变坏死区及癌细胞坏死、凋亡等。此外还有血管内皮细胞变性、凋亡及血管壁受破坏、管腔变窄和堵塞等血管系统的异常改变。而生理盐水组癌组织血管丰富 ,颊癌组织结构完整。结论 展开更多

关键词 血管内皮生长因子 单克隆抗体 肿瘤 血管生成 形态学 抑癌作用 颊癌 动物实验

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血管内皮生长因子抗体对卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响 被引量：1

6

作者 李力 王丽梅 张玮 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2002年第3期190-193,共4页

目的 :探讨血管内皮生长因子抗体对卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法 :采用体外实验的方法将不同浓度的血管内皮生长因子抗体作用卵巢癌细胞系SKOV3。用RT PCR和免疫组化法测定处理前后卵巢癌细胞系SKOV3中血管内皮生长因子mRNA... 目的 :探讨血管内皮生长因子抗体对卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法 :采用体外实验的方法将不同浓度的血管内皮生长因子抗体作用卵巢癌细胞系SKOV3。用RT PCR和免疫组化法测定处理前后卵巢癌细胞系SKOV3中血管内皮生长因子mRNA和蛋白的表达。采用ELISA法测定SKOV3分泌血管内皮生长因子的含量 ,采用MTT和细胞直接计数方法测定处理前后卵巢癌细胞系SKOV3的抑制率和增殖速度。结果 :不同浓度的血管内皮生长因子抗体作用于卵巢癌细胞株SKOV3后 ,其生长抑制率和细胞增殖速度与对照相比较 ,无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;不同浓度的血管内皮生长因子抗体作用于卵巢癌细胞株SKOV3后 ,其血管内皮生长因子mRNA、蛋白及其受体表达水平呈下调趋势 ;不同浓度的血管内皮生长因子抗体作用于卵巢癌细胞株SKOV3后 ,其血管内皮生长因子分泌明显下降 (P <0 .0 5 )。结论 :血管内皮生长因子抗体对卵巢癌细胞株SKOV3体外生长无直接影响 ,但血管内皮生长因子抗体可下调血管内皮生长因子mRNA、蛋白及其受体表达水平。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子抗体 卵巢癌 血管内皮生长因子 体外实验 免疫组织化学 逆转录-聚合酶链反应

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抗人血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体轻链可变区基因的克隆和序列分析 被引量：1

7

作者 杨西川 王大章 +3 位作者 郑光勇 程云 李伯安 李静 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期195-197,I011,共3页

为构建和表达抗人血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）工程抗体奠定基础，从分泌抗人ＶＥＧＦ抗体的杂交瘤细胞株中提取总ＲＮＡ，利用反转录－聚合酶链反应方法，克隆抗人ＶＥＧＦ单克隆抗体轻链可变区基因，将其重组入ｐＥＧＭＲ－ＴＶｅｃ... 为构建和表达抗人血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）工程抗体奠定基础，从分泌抗人ＶＥＧＦ抗体的杂交瘤细胞株中提取总ＲＮＡ，利用反转录－聚合酶链反应方法，克隆抗人ＶＥＧＦ单克隆抗体轻链可变区基因，将其重组入ｐＥＧＭＲ－ＴＶｅｃｔｏｒ测序载体测序。结果表明轻链可变区序列全长３３３ｂｐ，编码１１１个氨基酸，通过国际联机检索及Ｋａｂａｔ库扫描证实，该轻链可变区符合小鼠免疫球蛋白轻链可变区基因特征，同源性高达８９．３％，归属小鼠轻链可变区基因第Ⅲ亚组。 展开更多

关键词 血管 内皮生长因子 单克隆抗体 轻链可变区

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血管内皮生长因子及贝伐单抗在小梁切除术后伤口愈合过程中的作用 被引量：9

8

作者 江晓丹 李学民 王薇 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1136-1139,共4页

青光眼患者小梁切除术成功的关键在于术后伤口的愈合以及瘢痕化。伤口愈合延迟，甚至不愈合将导致术后滤过泡的过度渗漏和术后低眼压，伤口过度愈合以及瘢痕化则会导致术后高眼压。临床上应用抗代谢药物，如丝裂霉素C（MMC）和5-氟尿嘧... 青光眼患者小梁切除术成功的关键在于术后伤口的愈合以及瘢痕化。伤口愈合延迟，甚至不愈合将导致术后滤过泡的过度渗漏和术后低眼压，伤口过度愈合以及瘢痕化则会导致术后高眼压。临床上应用抗代谢药物，如丝裂霉素C（MMC）和5-氟尿嘧啶（5-Fu）等可降低术后过度的伤口愈合以及瘢痕化，但是伴有低眼压、眼内炎以及感觉迟钝等不良反应，个别患者对抗代谢药物不敏感。研究表明，在小梁切除模型中结膜下注射转化生长因子-β的单克隆抗体CAT-152能有效降低术后的瘢痕化，为青光眼术后抗瘢痕治疗带来了曙光，然而在临床试验中，其与对照组相比较并没有显著差异。近些年，越来越多的证据显示血管内皮生长因子（VEGF）抗体在小梁切除术后伤口愈合过程中有着重要的影响。本文中对小梁切除术后伤口愈合的机制和VEGF及其抗体贝伐单抗在伤口愈合中的作用进行综述。 展开更多

关键词 青光眼 小梁切除术 伤口愈合 血管内皮生长因子抗体

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拮抗血管内皮生长因子对骨折愈合影响的实验研究 被引量：3

9

作者 初同伟 王正国 朱佩芳 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期13-14,I002,共3页

为探讨拮抗血管内皮生长因子 (VEGF)对骨折愈合的影响 ,制作兔左桡骨中段骨折模型 ,给实验组动物在 3周内应用VEGF多克隆抗体 (4 0 0ng腹腔注射 ,每 3天 1次 ) ,分别于伤后 1、3、5、8周摄骨折部位X线片 ,并取骨折端标本脱钙进行光镜及... 为探讨拮抗血管内皮生长因子 (VEGF)对骨折愈合的影响 ,制作兔左桡骨中段骨折模型 ,给实验组动物在 3周内应用VEGF多克隆抗体 (4 0 0ng腹腔注射 ,每 3天 1次 ) ,分别于伤后 1、3、5、8周摄骨折部位X线片 ,并取骨折端标本脱钙进行光镜及电镜观察。结果显示 ,实验组动物伤后初期骨细胞坏死增多 ,虽然伤后 72h骨折端成纤维细胞出现增生现象 ,但 1～ 5周骨折端均有灶性坏死出现 ,3周时骨折部位血管生成明显减少 ,电镜下发现骨折端成纤维细胞和成骨细胞细胞器存在变性 ,伤后第 8周骨折端以纤维组织连接为主。X线片上见骨不连样改变。提示骨折端VEGF表达障碍可能是导致骨不连的重要原因之一。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子 多克隆抗体 骨折愈合 VEGF

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膀胱移行细胞癌患者血液中血管内皮生长因子的研究 被引量：1

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作者 郭正辉 梅骅 +3 位作者 黄健 姚友生 许可慰 江春 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期526-528,共3页

目的 :探讨膀胱移行细胞癌患者血液中血管内皮生长因子 (VEGF)的表达及意义。方法 :采用双抗体夹心ELISA法对 42例膀胱移行细胞癌患者及 10例正常人血液中VEGF的检测 ,研究膀胱移行细胞癌患者在化疗或手术前、后血液中VEGF的表达 ,以及... 目的 :探讨膀胱移行细胞癌患者血液中血管内皮生长因子 (VEGF)的表达及意义。方法 :采用双抗体夹心ELISA法对 42例膀胱移行细胞癌患者及 10例正常人血液中VEGF的检测 ,研究膀胱移行细胞癌患者在化疗或手术前、后血液中VEGF的表达 ,以及不同瘤级和不同浸润深度患者血液中VEGF的表达。结果 :在术前、吡柔比星灌注化疗后、肿瘤切除后 5 - 7d ,病人血液中VEGF值明显高于正常人 ;在化疗或手术后 ,患者血液中VEGF的水平明显下降。随着瘤级的升高或浸润深度的增加 ,患者血液中VEGF的水平也增高。结论 :检测膀胱癌患者血液中的VEGF的水平 ,监测它的变化 ,对预测肿瘤恶性潜能、以及了解肿瘤的治疗效果和肿瘤的发展情况 ,有重要的临床意义。 展开更多

关键词 膀胱移行细胞癌 患者 血液 血管内皮生长因子 膀胱肿瘤 吡柔比星 双抗体夹心ELISA法

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血管内皮细胞生长因子抑制剂对成骨肉瘤生长的影响 被引量：3

11

作者 蔡槱伯 张伟 《首都医科大学学报》 CAS 2002年第2期153-155,共3页

通过动物接种方法研究血管内皮细胞生长因子 (VEGF)抗体对骨肉瘤生长的抑制作用。将OS 732骨肉瘤细胞以 1 0 70 / (mL·只 )的剂量接种于BALB/C型裸鼠腋窝部皮下 ,并分成 4组 :A组于接种次日于瘤体局部注射VEGF抗体 ,B组于接种后 ... 通过动物接种方法研究血管内皮细胞生长因子 (VEGF)抗体对骨肉瘤生长的抑制作用。将OS 732骨肉瘤细胞以 1 0 70 / (mL·只 )的剂量接种于BALB/C型裸鼠腋窝部皮下 ,并分成 4组 :A组于接种次日于瘤体局部注射VEGF抗体 ,B组于接种后 2周瘤体局部注射抗体 ,C组于接种次日于瘤体局部注射PBS ,D组不注射抗体。VEGF注射剂量为 2 0 0 μg/ (只·次 ) ,每周 3次 ,共 3周。 4周后处死A、C2组裸鼠 ,6周后处死B、D 2组裸鼠。每组均取出瘤组织作病理切片。计算肿瘤体积及肿瘤内微血管密度 ,并对结果进行分析。结果显示 ,A组的肿瘤体积小于B、C、D 3组 ,在接种后 2 5d与D组有统计学差异 (P <0 .0 5 ) ;B、C、D 3组间无统计学差异。 4组肿瘤内微血管密度的比较 ,无统计学差异。提示 ,VEGF抗体对骨肉瘤早期的生长有明显的抑制作用 ,可作为转移病灶的预防及治疗方法之一。 展开更多

关键词 血管内皮细胞生长因子 成骨肉瘤 VEGF抗体 动物实验 微血管密度

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血浆血管内皮细胞生长因子与肝细胞癌临床特征的相关性 被引量：3

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作者 孙继泽 郭启勇 关美玉 《中国介入影像与治疗学》 CSCD 2005年第3期180-183,共4页

目的通过检测肝细胞癌(HCC)患者肝动脉栓塞术前血浆血管内皮细胞生长因子(VEGF),考察VEGF表达与肿瘤大小、边界、门脉癌栓、远隔转移之间的相关性。方法收集介入治疗前HCC患者46例,VEGF定量检测采用双抗体夹心酶ABC ELISA法。根据血浆V... 目的通过检测肝细胞癌(HCC)患者肝动脉栓塞术前血浆血管内皮细胞生长因子(VEGF),考察VEGF表达与肿瘤大小、边界、门脉癌栓、远隔转移之间的相关性。方法收集介入治疗前HCC患者46例,VEGF定量检测采用双抗体夹心酶ABC ELISA法。根据血浆VEFG表达水平将患者分为阳性组(32例)和阴性组(14例),对肿瘤大小、边界、门脉癌栓、远隔转移情况进行组间对比。CT和DSA间接门脉造影获得的图像进行对比评估。结果VEGF阳性表达率69.56%(32/46),阴性表达率30.44%(14/46)。VEGF阳性组肿瘤直径>5cm者26例(81.25%),阴性组12例(85.75%),两组间无显著性差异(P>0.05)。CT片上阳性组肿瘤边界清楚15例(46.88%),阴性组边界清楚8例(57.14%),组间无显著性差异。阳性组门脉癌栓发生率62.50%(20/32),阴性组14.29%(2/14),两组间有极显著性差异(P<0.01)。阳性组远隔转移8例;阴性组无远隔转移,经检验P<0.05。结论血浆VEGF高表达可以提示门脉癌栓或远隔转移的存在,而与肿瘤大小、边界无关。血浆VEGF可能成为观察肿瘤门脉癌栓及远隔转移的指标。 展开更多

关键词 肝细胞癌 血管内皮细胞生长因子(VEGF) 相关性 血浆 临床特征 ABC-ELISA法 显著性差异 门脉癌栓 肿瘤大小 VEGF表达 肝动脉栓塞 介入治疗前 双抗体夹心 阳性表达率 定量检测 门脉造影 肿瘤直径 0.05 阴性 边界 转移 患者

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血管内皮生长因子受体抗体-KH902治疗渗出性年龄相关性黄斑变性的1期临床研究

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作者 苗媛 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2011年第2期200-200,共1页

目的KH902是一种含有人体血管内皮生长因子受体1和2重点区域及人免疫球蛋白Fc段的人完全融合蛋白。本研究探讨KH902的安全性、耐受性和生物活性。方法选取由渗出性年龄相关性黄斑变性（age—relatedmaculardegeneration，AMD）引起的脉... 目的KH902是一种含有人体血管内皮生长因子受体1和2重点区域及人免疫球蛋白Fc段的人完全融合蛋白。本研究探讨KH902的安全性、耐受性和生物活性。方法选取由渗出性年龄相关性黄斑变性（age—relatedmaculardegeneration，AMD）引起的脉络膜新生血管（choroidalneovascularization，CNV）患者28例，病变≤12个视盘直径，最佳矫正视力（visualacuity，VA）≤55个字母。单次玻璃体内注射KH902，共设置6个剂量，从第1个剂量开始注射，如果注射后14d采用该剂量不发生剂量依赖性毒性反应，则继续用下一个剂量。 展开更多

关键词 渗出性年龄相关性黄斑变性 血管内皮生长因子受体1 临床研究 受体抗体 剂量依赖性 玻璃体内注射 脉络膜新生血管 治疗

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抗血管内皮生长因子治疗湿性年龄相关性黄斑变性的效果及复发因素分析 被引量：22

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作者 程子芳 王雨生 +3 位作者 王海燕 孙董洁 朱锦婷 李曼红 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期20-26,共7页

目的评价玻璃体腔注射抗血管内皮生长因子(VEGF)药物治疗湿性年龄相关性黄斑变性(wAMD)的复发情况及其影响因素。方法采用病例对照研究,纳入2015年10月至2017年4月于空军军医大学西京医院眼科门诊行抗VEGF治疗的临床检查确诊为wAMD患者3... 目的评价玻璃体腔注射抗血管内皮生长因子(VEGF)药物治疗湿性年龄相关性黄斑变性(wAMD)的复发情况及其影响因素。方法采用病例对照研究,纳入2015年10月至2017年4月于空军军医大学西京医院眼科门诊行抗VEGF治疗的临床检查确诊为wAMD患者38例40眼。所有患眼均采用3+按需治疗(PRN)的康柏西普或雷珠单抗注射液治疗方案,至少随访12个月。采用国际标准对数视力表检测患眼最佳矫正视力(BCVA),同时行光相干断层扫描(OCT)检查视网膜形态学特征并测量黄斑中心凹视网膜厚度(CRT)。根据治疗后12个月随访期内是否出现复发分为复发组和非复发组,并采用多元Logistic回归分析影响复发的相关因素;观察完成负荷期治疗后1个月以及随访期末时术眼形态学和视力应答效果。结果所有术眼在治疗后12个月的随访过程中均至少出现1次视网膜积液完全吸收,其中21眼wAMD复发,占52.5%;初次积液吸收时BCVA(LogMAR)值越低,wAMD复发风险越高[OR=16.70,95%CI=1.22~100.00,P<0.05]。复发组平均接受治疗(5.8±2.3)次,明显多于未复发组的(3.5±1.4)次,差异有统计学意义(t=3.64,P<0.05);复发组和未复发组间治疗前后BCVA变化值比较差异无统计学意义(t=-1.52,P>0.05);复发组终末随访时平均BCVA(LogMAR)为0.73±0.34,较复发时的0.81±0.37明显改善,终末随访时CRT为(187.2±81.7)μm,较复发时的(234.2±74.5)μm明显降低,差异均有统计学意义(t=2.14、2.62,均P<0.05)。所有术眼中形态学应答良好者35眼,占87.5%;形态学应答不良者5眼,占12.5%,继续治疗(3.2±2.2)次后积液吸收。形态学应答良好眼在负荷期治疗后1个月时平均BCVA(LogMAR)较初次积液吸收时明显改善,差异有统计学意义(t=-2.23,P<0.05)。术眼终末随访期CRT较治疗前明显变薄,差异有统计学意义(Z=-4.62,P<0.01)。结论规范的抗VEGF药物治疗wAMD在短期内安全、有效,但仍具有较高的复发率。初次积液吸收时更好的BCVA是wAMD复发的危险因素。患者在治疗后需要长期随访以防复发。形态学应答良好患者视网膜初次积液吸收后仍需完成负荷期治疗以提高视力。 展开更多

关键词 年龄相关性黄斑变性/药物疗法 血管内皮生长因子 血管生成抑制剂/治疗应用 单克隆抗体/治疗应用 复发

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胃癌肝转移患者治疗过程中血管内皮细胞生长因子水平的变化 被引量：2

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作者 陈明祥 李扬 +2 位作者 吕俊明 张信强 陈加顺 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1653-1655,共3页

目的:检测胃癌肝转移患者治疗前后的血浆可溶性血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平,并探讨其临床意义。方法:采用定量酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测43例胃癌肝转移患者治疗前后和20例浅表性胃炎患者(对照组)的血浆可溶性VEGF水平。结果... 目的:检测胃癌肝转移患者治疗前后的血浆可溶性血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平,并探讨其临床意义。方法:采用定量酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测43例胃癌肝转移患者治疗前后和20例浅表性胃炎患者(对照组)的血浆可溶性VEGF水平。结果:胃癌肝转移患者血浆可溶性VEGF水平显著高于对照组。经治疗后病情好转的胃癌肝转移患者[疗效评价为完全缓解(CR)或部分缓解(PR)],其血浆可溶性VEGF水平较治疗前明显下降,两者之间的差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后病情进展的胃癌肝转移患者[疗效评价为疾病进展(PD)],其血浆可溶性VEGF水平较治疗前明显升高,两者之间的差异有统计学意义(P<0.05)。在经治疗后病情稳定的胃癌肝转移患者[疗效评价为疾病稳定(SD)],其血浆可溶性VEGF水平与治疗前的差异无统计学意义。结论:用ELISA方法检测血浆可溶性VEGF浓度对于评价胃癌肝转移的治疗疗效有一定的参考价值。 展开更多

关键词 胃癌 血管内皮细胞生长因子 酶联免疫吸附试验双抗体夹心法 化疗

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IL-6R抗体调节PMMA骨水泥介导的滑膜成纤维细胞MMPs和血管化因子mRNA表达 被引量：1

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作者 陶可 曾晖 +5 位作者 熊奡 唐新宇 张勇 康斌 辛风 桂先革 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2011年第6期477-483,共7页

目的探讨IL-6R抗体对PMMA骨水泥介导的滑膜成纤维细胞MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA表达的调节。方法从全髋关节置换术中获取滑膜组织消化并传代培养。倒置相差显微镜对滑膜细胞进行形态学观察,免疫细胞化学(SABC法)染色对滑膜成纤维... 目的探讨IL-6R抗体对PMMA骨水泥介导的滑膜成纤维细胞MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA表达的调节。方法从全髋关节置换术中获取滑膜组织消化并传代培养。倒置相差显微镜对滑膜细胞进行形态学观察,免疫细胞化学(SABC法)染色对滑膜成纤维细胞进行鉴定。根据加入不同培养物,实验分为3组:PMMA组:75μg/mL PMMA骨水泥颗粒;IL-6R抗体组:10 ng/mL IL-6R抗体+75μg/mL PMMA骨水泥颗粒;空白对照组。采用细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测IL-6R抗体、PMMA对滑膜成纤维细胞增殖活力影响;实时荧光定量PCR(real timefluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)检测MMP-1、MMP-3、VEGF和PDGF mRNA表达。结果原代滑膜细胞贴壁后,初期为短梭形。连续3次传代后,95%以上细胞为长梭形成纤维细胞样细胞。SABC法染色检测结果显示:上述成纤维样细胞抗CD68抗体阴性,抗vimentin抗体呈棕黄色,为阳性反应。CCK-8检测显示:与PMMA组和空白对照组相比,IL-6R抗体组吸光度(A)值明显降低(P<0.01);而空白对照组与PMMA组间吸光度(A)值无统计学差异(P>0.05)。FQ-PCR检测发现:与PMMA组和空白对照组相比,IL-6R抗体组中MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA的表达明显受到抑制(P<0.01);PMMA组中MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF表达较空白对照组升高(P<0.05)。结论 IL-6R抗体能显著抑制滑膜成纤维细胞MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGFmRNA的表达,为生物制剂预防和治疗假体无菌性松动提供分子生物学的理论依据。 展开更多

关键词 IL-6R抗体 聚甲基丙烯酸甲酯 骨水泥 滑膜成纤维细胞 基质金属蛋白酶-1 基质金属蛋白酶-3 血管内皮生长因子 血小板衍生生长因子

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抗KDR单链抗体的构建、表达及生物学活性鉴定 被引量：4

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作者 李容 熊冬生 +4 位作者 许元富 邵晓枫 范冬梅 朱祯平 杨纯正 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期39-42,共4页

目的: 构建并表达抗人血管内皮生长因子受体KDR单链抗体(scFv)蛋白, 并测定其生物学活性。方法: 设计合成抗KDR单抗 (mAb)Ycom1D3VH、VL引物, 通过重叠延伸拼接 (splicingoverlapextensive, SOE)PCR, 在VH 和VL基因间引入柔性短肽(Gly4S... 目的: 构建并表达抗人血管内皮生长因子受体KDR单链抗体(scFv)蛋白, 并测定其生物学活性。方法: 设计合成抗KDR单抗 (mAb)Ycom1D3VH、VL引物, 通过重叠延伸拼接 (splicingoverlapextensive, SOE)PCR, 在VH 和VL基因间引入柔性短肽(Gly4Ser)3, 构建抗KDRscFv基因并进行序列分析。将其克隆入pAYZH原核表达载体, 在大肠杆菌中诱导表达, 并以ELISA及免疫荧光结合实验测定重组蛋白的生物学活性。结果: 序列分析表明, 抗KDRscFv基因的全长为 729bp, 编码 243个氨基酸。将重组体表达产物进行SDS PAGE及Westernblot分析显示, 融合蛋白的相对分子质量(Mr)约为 30 000, 同预期的结果一致。表达产物主要以不溶性包涵体的形式存在, 表达量占菌体总蛋白的 20%。表达产物经变性、纯化及体外复性后, 纯度达 90%以上。ELISA和竞争性免疫荧光结合实验显示, 重组小分子scFv可与可溶性KDR抗原及表达KDR受体的人脐静脉内皮细胞特异性结合, 保留了亲本mAb的抗原结合活性。结论: 成功地构建了抗KDRscFv基因, 并在大肠杆菌中功能性表达, 为靶向诊断、治疗及进一步基因工程改造奠定了基础。 展开更多

关键词 KDR 血管内皮生长因子 单链抗体 基因表达

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重组可溶性KDR及其抗体对内皮细胞的增殖抑制作用 被引量：4

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作者 刘丽 肖畅 +1 位作者 王烨 曹颖 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2002年第1期23-26,共4页

目的 :分析可溶性KDR(sKDR)及其抗体对内皮细胞增殖的抑制作用。方法 :通过ELISA分析大肠杆菌表达的sKDR纯化产物与VEGF16 5结合的能力 ;sKDR免疫家兔制备KDR2 6 2抗血清 ,Wensternblot分析该抗血清与KDR2 6 2蛋白结合的特异性 ;用3 H ... 目的 :分析可溶性KDR(sKDR)及其抗体对内皮细胞增殖的抑制作用。方法 :通过ELISA分析大肠杆菌表达的sKDR纯化产物与VEGF16 5结合的能力 ;sKDR免疫家兔制备KDR2 6 2抗血清 ,Wensternblot分析该抗血清与KDR2 6 2蛋白结合的特异性 ;用3 H TdR掺入法 ,MTT法和细胞计数 3种方法分析重组sKDR及其抗体对内皮细胞的增殖抑制作用。结果 :sKDR蛋白可与VEGF16 5特异性结合 ,肝素可增强其结合能力。KDR2 6 2抗血清具有特异性识别KDR蛋白的能力 ,其滴度为 1∶2 0 0 0。用3 H TdR掺入法和MTT 2种方法分析sKDR蛋白及其抗体对内皮细胞的增殖抑制作用结果一致 ,sKDR蛋白浓度在 10 μg/ml,2μg/ml,0 .4μg/ml时对内皮细胞增殖抑制率平均为 5 6 %,44 %和 32 %;抗KDR2 6 2抗体在稀释度为 5 0 ,2 0 0和 80 0倍时对内皮细胞增殖的抑制率平均为 70 %,5 6 %和 43%。细胞计数法测定结果 ,sKDR及抗KDR2 6 2抗体组与VEGF16 5单独刺激组 ,GST和PBS对照组相比 ,内皮细胞增殖被明显抑制 ,随浓度增加抑制活性明显增强 ,但抗体的抑制活性比sKDR蛋白高。结论 :大肠杆菌表达的sKDR及其抗体对内皮细胞均具有明显的增殖抑制作用。 展开更多

关键词 重组可溶性KDR 抗体 内皮细胞 抑制作用 血管内皮细胞生长因子 抗血管形成 细胞增殖

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VEGF_(165)基因联合抗细胞间黏附分子-1单克隆抗体对内膜损伤后血管重塑的影响 被引量：2

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作者 成业东 肖建如 +1 位作者 方平 蔡丽萍 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1020-1022,共3页

目的:探讨VEGF165基因联合抗细胞间黏附分子-1(ICAM-1)单克隆抗体对大鼠股动脉内膜损伤后血管重塑的影响。方法:采用球囊拉伤术制备SD大鼠(40只)股动脉内膜损伤模型,将动物随机分为联合组、基因组、抗体组及手术对照组(各10只),通过尾... 目的:探讨VEGF165基因联合抗细胞间黏附分子-1(ICAM-1)单克隆抗体对大鼠股动脉内膜损伤后血管重塑的影响。方法:采用球囊拉伤术制备SD大鼠(40只)股动脉内膜损伤模型,将动物随机分为联合组、基因组、抗体组及手术对照组(各10只),通过尾静脉分别注射加有VEGF165cDNA+抗ICAM-1单克隆抗体、VEGF165cDNA、抗ICAM-1单克隆抗体的生理盐水1 ml,手术对照组仅注射生理盐水1 ml。分别于注射后24 h或14 d观察各组动物注射后股动脉内膜的变化,并应用免疫组织化学染色、光镜和电镜等方法检测损伤局部血管内膜的变化情况。结果:注射后24 h,联合组损伤血管内膜处有极少量中性粒细胞浸润,抗体组次之,基因组有较多中性粒细胞浸润,而手术对照组损伤内膜有大量的中性粒细胞浸润。注射后14 d,联合组损伤血管内膜厚度明显小于其他各组(P<0.05),且内膜有大量VEGF蛋白表达。结论:VEGF基因与抗ICAM-1单克隆抗体联合应用可减轻损伤血管内皮细胞的再损伤,抑制损伤血管内膜的增生。提示两者联合有利于防止血管病理性狭窄的发生。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子类 胞间黏附分子1 抗体 单克隆 血管重构

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VEGF抗体对骨肉瘤OS-732血管生成的抑制作用 被引量：4

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作者 李颖嘉 王东 +1 位作者 高奉浔 陈俐 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第7期495-498,共4页

目的：研究血管内皮生长因子（VascularendothelialgrowthfactorVEGF）抗体的抗骨肉瘤血管生成作用。方法：应用鸡胚尿囊膜（ChickembryoChorioallantoicmembrane，CAM）模型观察VEGF抗体对骨肉瘤血管生成及肿瘤生长的影响。结果：VEGF... 目的：研究血管内皮生长因子（VascularendothelialgrowthfactorVEGF）抗体的抗骨肉瘤血管生成作用。方法：应用鸡胚尿囊膜（ChickembryoChorioallantoicmembrane，CAM）模型观察VEGF抗体对骨肉瘤血管生成及肿瘤生长的影响。结果：VEGF抗体组血管数目在给予抗体后第2、4、6、8天均显著低于PBS对照组（P＜0．05或P＜0．01），光镜下瘤细胞减少，新生血管腔减少。结论：VEGF抗体对骨肉瘤治疗具有良好的应用前景。 展开更多

关键词 血管内皮 生长因子 骨肉瘤 抗体 OS-732

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