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基于PTEN/mTOR/HIF-1α通路的血筒素调控氧糖剥夺PC12细胞自噬机制研究
1
作者
陈笑一
彭南波
+2 位作者
田梦芝
龙佳欣
杜可
《天然产物研究与开发》
北大核心
2025年第3期430-437,共8页
本研究旨在探讨血筒素(schisanlactone E,SE)通过磷酸酯酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog,PTEN)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycinm,mTOR)/缺氧诱导因子1亚基α(hypoxia-inducible factor 1α,H...
本研究旨在探讨血筒素(schisanlactone E,SE)通过磷酸酯酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog,PTEN)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycinm,mTOR)/缺氧诱导因子1亚基α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)通路调节PC12细胞自噬抗氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)的作用机制。构建OGD-PC12细胞体外模型,分为正常组(Con)、OGD组、SE组、PTEN抑制剂(bisperoxovanadium,Bpv)组、Bpv+SE组。通过噻唑蓝染色(MTT)法、流式细胞术、透射电镜法、单丹磺酰尸胺荧光染色(monodansylcadaverine,MDC)法、Western blot法检测相关指标。结果表明,与OGD组相比,SE组细胞存活率提高(P<0.01),凋亡率降低(P<0.01),SE组和Bpv组细胞自噬小体和溶酶体数量均减少(P<0.01),自噬小体的荧光强度均减弱(P<0.01),螯合体1(sequestosome1,p62)、磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)/mTOR蛋白表达量均升高(P<0.01或P<0.05),微管相关蛋白轻链3-II/I(microtubule-associated protein1 light chain 3-II/I,LC3-II/LC3-I)、苄氯素1(recombinant beclin1,Beclin1)、PTEN、HIF-1α蛋白表达量均降低(P<0.01);与Bpv组相比,Bpv+SE组细胞自噬小体及溶酶体数量减少(P<0.01),自噬小体荧光强度减弱(P<0.01),p62、p-mTOR/mTOR蛋白表达量升高(P<0.01或P<0.05),LC3-II/LC3-I、Beclin1、PTEN、HIF-1α蛋白表达量降低(P<0.01)。提示,SE在0.1μmol/L浓度下能够达到抗神经元自噬损伤最佳效果,发挥抑制OGD-PC12细胞自噬损伤的作用;通过加入PTEN抑制,能够上调mTOR,继而下调HIF-1α,并且在SE与PTEN抑制剂联合用药后效果更为明显。本研究可为地方天然民族产物SE研发和其抗缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)缺血损伤的分子机制提供一定实验室依据,并对地方民族天然产物服务人类健康、促进地方经济发展累积经验。
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关键词
血筒素
氧糖剥夺
细胞自噬
PTEN/mTOR/HIF-1α
PTEN抑制剂
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职称材料
题名
基于PTEN/mTOR/HIF-1α通路的血筒素调控氧糖剥夺PC12细胞自噬机制研究
1
作者
陈笑一
彭南波
田梦芝
龙佳欣
杜可
机构
湖南中医药大学
出处
《天然产物研究与开发》
北大核心
2025年第3期430-437,共8页
基金
湖南省自然科学基金(2020JJ9050)
湖南省普通高等学校教学改革研究项目(HNJG-2022-0134)
+1 种基金
研究生创新创业训练计划(CX20230828)
大学生创新创业训练计划(S202310541068)。
文摘
本研究旨在探讨血筒素(schisanlactone E,SE)通过磷酸酯酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog,PTEN)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycinm,mTOR)/缺氧诱导因子1亚基α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)通路调节PC12细胞自噬抗氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)的作用机制。构建OGD-PC12细胞体外模型,分为正常组(Con)、OGD组、SE组、PTEN抑制剂(bisperoxovanadium,Bpv)组、Bpv+SE组。通过噻唑蓝染色(MTT)法、流式细胞术、透射电镜法、单丹磺酰尸胺荧光染色(monodansylcadaverine,MDC)法、Western blot法检测相关指标。结果表明,与OGD组相比,SE组细胞存活率提高(P<0.01),凋亡率降低(P<0.01),SE组和Bpv组细胞自噬小体和溶酶体数量均减少(P<0.01),自噬小体的荧光强度均减弱(P<0.01),螯合体1(sequestosome1,p62)、磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)/mTOR蛋白表达量均升高(P<0.01或P<0.05),微管相关蛋白轻链3-II/I(microtubule-associated protein1 light chain 3-II/I,LC3-II/LC3-I)、苄氯素1(recombinant beclin1,Beclin1)、PTEN、HIF-1α蛋白表达量均降低(P<0.01);与Bpv组相比,Bpv+SE组细胞自噬小体及溶酶体数量减少(P<0.01),自噬小体荧光强度减弱(P<0.01),p62、p-mTOR/mTOR蛋白表达量升高(P<0.01或P<0.05),LC3-II/LC3-I、Beclin1、PTEN、HIF-1α蛋白表达量降低(P<0.01)。提示,SE在0.1μmol/L浓度下能够达到抗神经元自噬损伤最佳效果,发挥抑制OGD-PC12细胞自噬损伤的作用;通过加入PTEN抑制,能够上调mTOR,继而下调HIF-1α,并且在SE与PTEN抑制剂联合用药后效果更为明显。本研究可为地方天然民族产物SE研发和其抗缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)缺血损伤的分子机制提供一定实验室依据,并对地方民族天然产物服务人类健康、促进地方经济发展累积经验。
关键词
血筒素
氧糖剥夺
细胞自噬
PTEN/mTOR/HIF-1α
PTEN抑制剂
Keywords
schisanlactone E
oxygen-glucose deprivation
cellular autophagy
PTEN/mTOR/HIF-1α
PTEN inhibitor
分类号
R932 [医药卫生—生药学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于PTEN/mTOR/HIF-1α通路的血筒素调控氧糖剥夺PC12细胞自噬机制研究
陈笑一
彭南波
田梦芝
龙佳欣
杜可
《天然产物研究与开发》
北大核心
2025
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