为利用原核表达系统表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,并评估其免疫原性。从禽腺病毒血清4型病毒中提取fiber-2基因,经密码子优化后构建重组表达载体pET-30a-fiber-2;将所获得的质粒转入原核表达系统,经诱导表达获得fiber-2蛋白;利用获得...为利用原核表达系统表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,并评估其免疫原性。从禽腺病毒血清4型病毒中提取fiber-2基因,经密码子优化后构建重组表达载体pET-30a-fiber-2;将所获得的质粒转入原核表达系统,经诱导表达获得fiber-2蛋白;利用获得的fiber-2蛋白制备疫苗,并以7日龄无特定病原(specific pathogen free,SPF)鸡为免疫对象,采用琼脂凝胶免疫扩散试验(agar gel precipitation,AGP)测定抗体效价,并开展攻毒保护试验。结果显示:重组表达载体pET-30a-fiber-2构建成功,fiber-2蛋白为部分可溶性表达;免疫后,SPF鸡体内产生的抗体效价为1∶2~1∶16,且保护效率达到100%。结果表明,该研究成功利用原核表达系统高效表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,且该蛋白具有良好的免疫原性,为禽腺病毒相关亚单位疫苗的研发提供新的思路。展开更多
文摘为利用原核表达系统表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,并评估其免疫原性。从禽腺病毒血清4型病毒中提取fiber-2基因,经密码子优化后构建重组表达载体pET-30a-fiber-2;将所获得的质粒转入原核表达系统,经诱导表达获得fiber-2蛋白;利用获得的fiber-2蛋白制备疫苗,并以7日龄无特定病原(specific pathogen free,SPF)鸡为免疫对象,采用琼脂凝胶免疫扩散试验(agar gel precipitation,AGP)测定抗体效价,并开展攻毒保护试验。结果显示:重组表达载体pET-30a-fiber-2构建成功,fiber-2蛋白为部分可溶性表达;免疫后,SPF鸡体内产生的抗体效价为1∶2~1∶16,且保护效率达到100%。结果表明,该研究成功利用原核表达系统高效表达禽腺病毒血清4型fiber-2蛋白,且该蛋白具有良好的免疫原性,为禽腺病毒相关亚单位疫苗的研发提供新的思路。
