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阿伐他汀对高胆固醇血症ApoE基因敲除小鼠肝脏骨桥蛋白表达的影响及其分子机制
被引量：
1
1
作者
刘超
汪渊
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2010年第5期625-625,共1页
目的初步探讨阿伐他汀对高胆固醇血症ApoE基因敲除小鼠肝脏骨桥蛋白的表达的影响以及和MAPK信号通路的关系。方法 18只4周龄SPF级ApoE基因敲除小鼠,随机分为正常组、高胆固醇组、高胆固醇+阿伐他汀组,在SPF级小鼠饲养房中饲养12周。正...
目的初步探讨阿伐他汀对高胆固醇血症ApoE基因敲除小鼠肝脏骨桥蛋白的表达的影响以及和MAPK信号通路的关系。方法 18只4周龄SPF级ApoE基因敲除小鼠,随机分为正常组、高胆固醇组、高胆固醇+阿伐他汀组,在SPF级小鼠饲养房中饲养12周。正常组给予小鼠正常饲料喂养,高胆固醇组给予小鼠高胆固醇饲料(胆固醇0.5%,猪油10%,蛋黄粉10%,维持料59.5%,蔗糖20%)喂养,高胆固醇+阿伐他汀组在给予小鼠高胆固醇饲料喂养的同时,并用阿伐他汀5mg/(kg·d)灌胃,12周后获取血和肝脏。分析血清胆固醇和低密度脂蛋白的变化;肝脏组织切片用于HE染色以观察肝脏组织学病变;应用免疫组化PV法检测肝脏组织中OPN的表达;从冰冻肝脏组织中提取蛋白,用Westernblot方法检测OPN变化。我们首先用不同浓度(0、5%、10%)兔高胆固醇血清刺激人肝癌细胞(HepG2)24h,分析OPN表达和ERK、p38磷酸化水平变化情况,再选取明显诱导HepG2细胞OPN表达变化的高胆固醇血清浓度,同时用不同浓度的阿伐他汀刺激HepG2细胞24h,分析OPN表达和ERK、p38磷酸化水平变化。结果 ApoE基因敲除小鼠高胆固醇血症模型复制成功,ApoE基因敲除小鼠在高胆固醇饮食12周后,与正常对照相比血清中胆固醇和低密度脂蛋白含量显著增加(P<0.05,P<0.05);高胆固醇饮食12周加喂阿伐他汀,与高胆固醇饮食组相比血清中胆固醇和低密度脂蛋白含量显著降低(P<0.05,P<0.05)。ApoE基因敲除小鼠高胆固醇饮食12周后,HE染色显示小鼠肝脏出现弥漫性脂肪变性,以中央静脉周围最为明显,肝细胞体积增大,胞质内见大小不等的圆形空泡,细胞核居边缘;正常组肝细胞索排列正常,核圆、大、居中;而加喂阿伐他汀后小鼠肝细胞索排列紊乱,但无空泡,核居中。免疫组化和Westernblot则显示高胆固醇组小鼠肝脏组织中OPN与正常对照相比表达水平升高,而加喂阿伐他汀后,肝脏组织中OPN的表达有所下降。体外培养HepG2,用5%和10%兔高胆固醇血清刺激24h,与正常对照相比,OPN的表达和p38、ERK的磷酸化水平均呈升高趋势;10%兔高胆固醇血清刺激HepG2,同时用不同浓度的阿伐他汀刺激(0、2、4、8、16μmol/L)24h,2μmol/L阿伐他汀即可降低OPN的表达和ERK的磷酸化水平,之后随着阿伐他汀浓度的升高,OPN的表达和ERK的磷酸化水呈降低趋势;但在加入2μmol/L阿伐他汀后p38的磷酸化水平升高,之后随着阿伐他汀浓度的升高p38的磷酸化水平无明显变化。结论阿伐他汀不仅能降低高胆固醇血症ApoE基因敲除小鼠血清胆固醇浓度,抑制肝脂肪变性,还下调了OPN的表达;高胆固醇血清能够提高HepG2细胞OPN的表达,但阿伐他汀能够抑制高胆固醇血清提高HepG2细胞OPN表达的作用,阿伐他汀的这种作用可能与MAPK通路的p38和ERK的磷酸化水有关。
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关键词
APOE基因敲除小鼠
高
胆固醇
血症
阿伐他汀
小鼠肝脏
蛋白表达
骨桥蛋白
Westernblot方法
血清胆固醇浓度
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职称材料
题名
阿伐他汀对高胆固醇血症ApoE基因敲除小鼠肝脏骨桥蛋白表达的影响及其分子机制
被引量：
1
1
作者
刘超
汪渊
机构
安徽医科大学基础医学院
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2010年第5期625-625,共1页
文摘
目的初步探讨阿伐他汀对高胆固醇血症ApoE基因敲除小鼠肝脏骨桥蛋白的表达的影响以及和MAPK信号通路的关系。方法 18只4周龄SPF级ApoE基因敲除小鼠,随机分为正常组、高胆固醇组、高胆固醇+阿伐他汀组,在SPF级小鼠饲养房中饲养12周。正常组给予小鼠正常饲料喂养,高胆固醇组给予小鼠高胆固醇饲料(胆固醇0.5%,猪油10%,蛋黄粉10%,维持料59.5%,蔗糖20%)喂养,高胆固醇+阿伐他汀组在给予小鼠高胆固醇饲料喂养的同时,并用阿伐他汀5mg/(kg·d)灌胃,12周后获取血和肝脏。分析血清胆固醇和低密度脂蛋白的变化;肝脏组织切片用于HE染色以观察肝脏组织学病变;应用免疫组化PV法检测肝脏组织中OPN的表达;从冰冻肝脏组织中提取蛋白,用Westernblot方法检测OPN变化。我们首先用不同浓度(0、5%、10%)兔高胆固醇血清刺激人肝癌细胞(HepG2)24h,分析OPN表达和ERK、p38磷酸化水平变化情况,再选取明显诱导HepG2细胞OPN表达变化的高胆固醇血清浓度,同时用不同浓度的阿伐他汀刺激HepG2细胞24h,分析OPN表达和ERK、p38磷酸化水平变化。结果 ApoE基因敲除小鼠高胆固醇血症模型复制成功,ApoE基因敲除小鼠在高胆固醇饮食12周后,与正常对照相比血清中胆固醇和低密度脂蛋白含量显著增加(P<0.05,P<0.05);高胆固醇饮食12周加喂阿伐他汀,与高胆固醇饮食组相比血清中胆固醇和低密度脂蛋白含量显著降低(P<0.05,P<0.05)。ApoE基因敲除小鼠高胆固醇饮食12周后,HE染色显示小鼠肝脏出现弥漫性脂肪变性,以中央静脉周围最为明显,肝细胞体积增大,胞质内见大小不等的圆形空泡,细胞核居边缘;正常组肝细胞索排列正常,核圆、大、居中;而加喂阿伐他汀后小鼠肝细胞索排列紊乱,但无空泡,核居中。免疫组化和Westernblot则显示高胆固醇组小鼠肝脏组织中OPN与正常对照相比表达水平升高,而加喂阿伐他汀后,肝脏组织中OPN的表达有所下降。体外培养HepG2,用5%和10%兔高胆固醇血清刺激24h,与正常对照相比,OPN的表达和p38、ERK的磷酸化水平均呈升高趋势;10%兔高胆固醇血清刺激HepG2,同时用不同浓度的阿伐他汀刺激(0、2、4、8、16μmol/L)24h,2μmol/L阿伐他汀即可降低OPN的表达和ERK的磷酸化水平,之后随着阿伐他汀浓度的升高,OPN的表达和ERK的磷酸化水呈降低趋势;但在加入2μmol/L阿伐他汀后p38的磷酸化水平升高,之后随着阿伐他汀浓度的升高p38的磷酸化水平无明显变化。结论阿伐他汀不仅能降低高胆固醇血症ApoE基因敲除小鼠血清胆固醇浓度,抑制肝脂肪变性,还下调了OPN的表达;高胆固醇血清能够提高HepG2细胞OPN的表达,但阿伐他汀能够抑制高胆固醇血清提高HepG2细胞OPN表达的作用,阿伐他汀的这种作用可能与MAPK通路的p38和ERK的磷酸化水有关。
关键词
APOE基因敲除小鼠
高
胆固醇
血症
阿伐他汀
小鼠肝脏
蛋白表达
骨桥蛋白
Westernblot方法
血清胆固醇浓度
分类号
R972.6 [医药卫生—药品]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
阿伐他汀对高胆固醇血症ApoE基因敲除小鼠肝脏骨桥蛋白表达的影响及其分子机制
刘超
汪渊
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2010
1
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