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长PCR扩增人血清白蛋白基因反应条件及体系的确立
1
作者
乔宪凤
郑新民
+1 位作者
熊忠良
华文君
《湖北农业科学》
北大核心
2001年第4期73-75,共3页
从人的血液中提取基因组的DNA作为模板 ,通过对长PCR反应条件体系的优化 ,获得基因组中大片段的人血清白蛋白基因 (HSA)。
关键词
人
血清白蛋白基因
大片段DNA
长PCR
反应条件
反应体系
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职称材料
人重组血清白蛋白基因T载体和pET28a表达载体的构建及鉴定
2
作者
云妙英
王涛
+2 位作者
肖宇红
张京文
陈正华
《首都医科大学学报》
CAS
2006年第5期639-642,共4页
目的构建重组人血清白蛋白(rHSA)表达基因的克隆载体及表达载体,为下一步的蛋白表达和构建rHSA融合基因打下基础。方法从人胎盘中提取总RNA,利用RT-PCR方法构建cDNA-mRNA杂交链,然后用人血清白蛋白表达基因的特异引物进行PCR,PCR产物回...
目的构建重组人血清白蛋白(rHSA)表达基因的克隆载体及表达载体,为下一步的蛋白表达和构建rHSA融合基因打下基础。方法从人胎盘中提取总RNA,利用RT-PCR方法构建cDNA-mRNA杂交链,然后用人血清白蛋白表达基因的特异引物进行PCR,PCR产物回收后与T载体连接,经过转化、质粒酶切、测序等一系列手段对插入情况和序列是否正确进行鉴定。用另一组带有酶切位点的引物和pfu酶进行PCR,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切PCR回收片段及pET28a表达载体,二者经过连接、转化、质粒酶切、测序等手段重新鉴定序列是否正确。结果插入到T载体和pET28a载体中的序列为1 830 bp的带有24个氨基酸信号肽的基因片段,此序列和GenBank中公布的rHSA序列相一致,并显示在485、750、1 685等位点可能有等位基因多态性。结论从胎盘中提取mRNA后,利用RT-PCR构建的人血清白蛋白基因序列完全正确,为下一步的工作提供了基础。
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关键词
人
血清白蛋白基因
载体
序列鉴定
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职称材料
三种DNA片段在小鼠体内共整合效率的研究
被引量：
1
3
作者
褚晓红
郑新民
+2 位作者
杨公社
胡锦平
翁经强
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期97-101,共5页
以小鼠为研究对象,把人的三种DNA片断-血清白蛋白基因(HSA)、DNA修复基因hFEN1和非编码大片断CIT987SK-384D8用显微注射法分批导入小鼠受精卵雄原核,移植到假孕母鼠体内,产生的65只F1代仔鼠中,经PCR和Southernblotting检测,12只仔鼠体...
以小鼠为研究对象,把人的三种DNA片断-血清白蛋白基因(HSA)、DNA修复基因hFEN1和非编码大片断CIT987SK-384D8用显微注射法分批导入小鼠受精卵雄原核,移植到假孕母鼠体内,产生的65只F1代仔鼠中,经PCR和Southernblotting检测,12只仔鼠体内含有导入的DNA段,其中HSA和CIT987SK-384D8的共整合率是1.298%,与hFEN1的共整合率是0.552%,显微注射法的总整合率是3.84%,总有效率是1.92%.从而为转基因动物的研制提供了科学的探索的一种有效的途径.
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关键词
转
基因
小鼠
共整合
共整合效率
DNA片断
血清白蛋白基因
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职称材料
题名
长PCR扩增人血清白蛋白基因反应条件及体系的确立
1
作者
乔宪凤
郑新民
熊忠良
华文君
机构
湖北省农业科学院生物技术研究所
出处
《湖北农业科学》
北大核心
2001年第4期73-75,共3页
文摘
从人的血液中提取基因组的DNA作为模板 ,通过对长PCR反应条件体系的优化 ,获得基因组中大片段的人血清白蛋白基因 (HSA)。
关键词
人
血清白蛋白基因
大片段DNA
长PCR
反应条件
反应体系
分类号
R394.8 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
人重组血清白蛋白基因T载体和pET28a表达载体的构建及鉴定
2
作者
云妙英
王涛
肖宇红
张京文
陈正华
机构
中国科学院西北高原生物研究所
北京大学公共卫生学院
甘肃亚盛集团博士后工作站
甘肃农业大学农学院
出处
《首都医科大学学报》
CAS
2006年第5期639-642,共4页
文摘
目的构建重组人血清白蛋白(rHSA)表达基因的克隆载体及表达载体,为下一步的蛋白表达和构建rHSA融合基因打下基础。方法从人胎盘中提取总RNA,利用RT-PCR方法构建cDNA-mRNA杂交链,然后用人血清白蛋白表达基因的特异引物进行PCR,PCR产物回收后与T载体连接,经过转化、质粒酶切、测序等一系列手段对插入情况和序列是否正确进行鉴定。用另一组带有酶切位点的引物和pfu酶进行PCR,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切PCR回收片段及pET28a表达载体,二者经过连接、转化、质粒酶切、测序等手段重新鉴定序列是否正确。结果插入到T载体和pET28a载体中的序列为1 830 bp的带有24个氨基酸信号肽的基因片段,此序列和GenBank中公布的rHSA序列相一致,并显示在485、750、1 685等位点可能有等位基因多态性。结论从胎盘中提取mRNA后,利用RT-PCR构建的人血清白蛋白基因序列完全正确,为下一步的工作提供了基础。
关键词
人
血清白蛋白基因
载体
序列鉴定
Keywords
recombinant human serum albumin（rHSA）, vector
sequencing
分类号
Q781 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
三种DNA片段在小鼠体内共整合效率的研究
被引量：
1
3
作者
褚晓红
郑新民
杨公社
胡锦平
翁经强
机构
浙江省农业科学院畜牧兽医研究所
湖北省农业科学院生物技术研究所
西北农林科技大学动物科技学院
出处
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期97-101,共5页
基金
湖北省武汉市科技计划资助项目(20006002081)
国家攻关资助项目(2002BA514A-7-6).
文摘
以小鼠为研究对象,把人的三种DNA片断-血清白蛋白基因(HSA)、DNA修复基因hFEN1和非编码大片断CIT987SK-384D8用显微注射法分批导入小鼠受精卵雄原核,移植到假孕母鼠体内,产生的65只F1代仔鼠中,经PCR和Southernblotting检测,12只仔鼠体内含有导入的DNA段,其中HSA和CIT987SK-384D8的共整合率是1.298%,与hFEN1的共整合率是0.552%,显微注射法的总整合率是3.84%,总有效率是1.92%.从而为转基因动物的研制提供了科学的探索的一种有效的途径.
关键词
转
基因
小鼠
共整合
共整合效率
DNA片断
血清白蛋白基因
Keywords
HSA
hFEN1
CIT987SK-384D8
transgenic mice
cointegration
integration efficiency
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
长PCR扩增人血清白蛋白基因反应条件及体系的确立
乔宪凤
郑新民
熊忠良
华文君
《湖北农业科学》
北大核心
2001
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
人重组血清白蛋白基因T载体和pET28a表达载体的构建及鉴定
云妙英
王涛
肖宇红
张京文
陈正华
《首都医科大学学报》
CAS
2006
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
三种DNA片段在小鼠体内共整合效率的研究
褚晓红
郑新民
杨公社
胡锦平
翁经强
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004
1
在线阅读
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职称材料
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