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血清淀粉样P成分转基因小鼠模型的建立
1
作者
郭云云
张英汉
+1 位作者
耿建国
辛亚平
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2006年第17期4242-4244,共3页
目的:建立可表达血清淀粉样P成分(SAP)转基因小鼠模型,以研究SAP基因的功能。方法:采用基因重组技术将SAP基因插入到pCMV-Tag5A真核表达载体上。经BciVI限制性内切酶酶切后,琼脂糖凝胶电泳回收2.7 kb目的片断,受精卵原核显微注射法将其...
目的:建立可表达血清淀粉样P成分(SAP)转基因小鼠模型,以研究SAP基因的功能。方法:采用基因重组技术将SAP基因插入到pCMV-Tag5A真核表达载体上。经BciVI限制性内切酶酶切后,琼脂糖凝胶电泳回收2.7 kb目的片断,受精卵原核显微注射法将其注入雄原核,制备转基因小鼠。采用PCR法在基因水平筛选SAP转基因小鼠阳性小鼠;免疫沉淀法结合免疫印迹法在蛋白水平检测SAP基因在PCR阳性转基因小鼠中的表达情况。结果:成功构建了pCMV-Tag5A/mSAP真核表达载体。经显微注射法将2.7 kb线性目的基因片断注射入受精卵雄原核,移植入代孕母鼠,所生127只小鼠,其中PCR鉴定获得10只转基因阳性小鼠。免疫沉淀法和免疫印记法随机检测83#♂founder、7#♀founder与C57 BL/6J小鼠回交F1代PCR阳性转基因小鼠血清中外源SAP基因蛋白水平的表达,发现均有表达。结论:该研究以C57BL/6J小鼠为研究对象,成功地产生能稳定遗传SAP基因的过表达转基因小鼠模型,它将有利于研究SAP基因在炎症、淀粉样沉淀、自身免疫系统中的作用。
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关键词
血清淀粉样p成分
显微注射
转基因小鼠
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职称材料
血清淀粉样P物质对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的影响
2
作者
赵金珍
陈思
+3 位作者
胡露
梁亚玲
郭凯
郭志刚
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期977-981,共5页
目的研究血清淀粉样P物质(SAP)对血清对氧磷酶1(PON1)活性、炎症因子单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及Apo E-/-小鼠动脉粥样硬化发生发展的影响,探讨SAP调节动脉粥样硬化的可能机制。方法 C57/BL6雄性小鼠6只为正常组,予普通饮食喂养;雄性Ap...
目的研究血清淀粉样P物质(SAP)对血清对氧磷酶1(PON1)活性、炎症因子单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及Apo E-/-小鼠动脉粥样硬化发生发展的影响,探讨SAP调节动脉粥样硬化的可能机制。方法 C57/BL6雄性小鼠6只为正常组,予普通饮食喂养;雄性Apo E-/-小鼠12只高脂饲料喂养12周,随机分为SAP组和PBS组,每组各6只,SAP组予腹腔注射SAP(6mg/g),隔天1次,共14d,PBS组予腹腔注射PBS(6mg/g),隔天1次,共14d。第16周时收集各组血液及动脉标本,检测小鼠血清血脂4项和PON1活性,ELISA检测血清SAP和MCP-1水平,HE染色观察动脉斑块大小,油红O染色观察斑块内脂质沉积情况,免疫组化检测斑块内SAP的表达。结果与正常组相比,PBS组和SAP组小鼠血清PON1活性明显下降(P<0.01),MCP-1水平明显增高(P<0.01),血管内大量斑块形成;与PBS组相比,SAP组小鼠血清PON1活性增高(P=0.046),MCP-1水平明显下降(P=0.032),血管内斑块面积减少(P=0.001),斑块内油红O阳性脂肪细胞数量减少(P=0.03)。结论 SAP可能通过提高PON1活性、降低MCP-1水平而延缓动脉粥样硬化的发生发展。
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关键词
血清淀粉样p成分
动脉粥
样
硬化
对氧磷酶1
单核细胞趋化蛋白-1
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职称材料
SAP基因注射干预小鼠SLE样综合征的发生
被引量：
1
3
作者
吴瑾
吴厚生
+1 位作者
屠红
熊思东
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第8期567-571,共5页
目的 :研究SAP基因注射对SLE发病的干预作用 ,并进一步探讨SAP发挥作用的可能机制。方法 :通过RT PCR方法克隆SAP基因 ,构建其真核表达质粒pcDNA3 SAP ,观察SAP基因注射对活化淋巴细胞免疫诱导小鼠产生的SLE样综合征的干预作用 ,以ELIS...
目的 :研究SAP基因注射对SLE发病的干预作用 ,并进一步探讨SAP发挥作用的可能机制。方法 :通过RT PCR方法克隆SAP基因 ,构建其真核表达质粒pcDNA3 SAP ,观察SAP基因注射对活化淋巴细胞免疫诱导小鼠产生的SLE样综合征的干预作用 ,以ELISA方法检测抗dsDNA抗体的产生情况 ,以免疫荧光法检测肾脏免疫复合物沉积 ;通过巨噬细胞吞噬实验观察SAP与DNA结合后对DNA清除的影响 ;用增殖实验检测巨噬细胞吞噬SAP结合的DNA后对预致敏淋巴细胞活化的影响。结果 :SAP基因注射可有效干预小鼠SLE样综合征的发生 ,SAP与活化淋巴细胞DNA结合后可明显促进巨噬细胞对DNA的吞噬 ,并且巨噬细胞吞噬SAP结合的DNA后不引起预致敏淋巴细胞的增殖。结论
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关键词
血清淀粉样p成分
(SA
p
)
DNA
系统性红斑狼疮
基因注射
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职称材料
题名
血清淀粉样P成分转基因小鼠模型的建立
1
作者
郭云云
张英汉
耿建国
辛亚平
机构
西北农林科技大学动物科技学院
中国科学院生化细胞所
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2006年第17期4242-4244,共3页
基金
国家自然科学基金(39925015项目)
文摘
目的:建立可表达血清淀粉样P成分(SAP)转基因小鼠模型,以研究SAP基因的功能。方法:采用基因重组技术将SAP基因插入到pCMV-Tag5A真核表达载体上。经BciVI限制性内切酶酶切后,琼脂糖凝胶电泳回收2.7 kb目的片断,受精卵原核显微注射法将其注入雄原核,制备转基因小鼠。采用PCR法在基因水平筛选SAP转基因小鼠阳性小鼠;免疫沉淀法结合免疫印迹法在蛋白水平检测SAP基因在PCR阳性转基因小鼠中的表达情况。结果:成功构建了pCMV-Tag5A/mSAP真核表达载体。经显微注射法将2.7 kb线性目的基因片断注射入受精卵雄原核,移植入代孕母鼠,所生127只小鼠,其中PCR鉴定获得10只转基因阳性小鼠。免疫沉淀法和免疫印记法随机检测83#♂founder、7#♀founder与C57 BL/6J小鼠回交F1代PCR阳性转基因小鼠血清中外源SAP基因蛋白水平的表达,发现均有表达。结论:该研究以C57BL/6J小鼠为研究对象,成功地产生能稳定遗传SAP基因的过表达转基因小鼠模型,它将有利于研究SAP基因在炎症、淀粉样沉淀、自身免疫系统中的作用。
关键词
血清淀粉样p成分
显微注射
转基因小鼠
Keywords
Serum amyloid
p
com
p
onent
Micminjection
Transgenic mouse
分类号
Q343.1 [生物学—遗传学]
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职称材料
题名
血清淀粉样P物质对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的影响
2
作者
赵金珍
陈思
胡露
梁亚玲
郭凯
郭志刚
机构
南方医科大学南方医院惠侨医疗中心
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期977-981,共5页
基金
国家自然科学基金面上项目(81370380)
广东省自然科学基金面上项目(s2013010014739)~~
文摘
目的研究血清淀粉样P物质(SAP)对血清对氧磷酶1(PON1)活性、炎症因子单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及Apo E-/-小鼠动脉粥样硬化发生发展的影响,探讨SAP调节动脉粥样硬化的可能机制。方法 C57/BL6雄性小鼠6只为正常组,予普通饮食喂养;雄性Apo E-/-小鼠12只高脂饲料喂养12周,随机分为SAP组和PBS组,每组各6只,SAP组予腹腔注射SAP(6mg/g),隔天1次,共14d,PBS组予腹腔注射PBS(6mg/g),隔天1次,共14d。第16周时收集各组血液及动脉标本,检测小鼠血清血脂4项和PON1活性,ELISA检测血清SAP和MCP-1水平,HE染色观察动脉斑块大小,油红O染色观察斑块内脂质沉积情况,免疫组化检测斑块内SAP的表达。结果与正常组相比,PBS组和SAP组小鼠血清PON1活性明显下降(P<0.01),MCP-1水平明显增高(P<0.01),血管内大量斑块形成;与PBS组相比,SAP组小鼠血清PON1活性增高(P=0.046),MCP-1水平明显下降(P=0.032),血管内斑块面积减少(P=0.001),斑块内油红O阳性脂肪细胞数量减少(P=0.03)。结论 SAP可能通过提高PON1活性、降低MCP-1水平而延缓动脉粥样硬化的发生发展。
关键词
血清淀粉样p成分
动脉粥
样
硬化
对氧磷酶1
单核细胞趋化蛋白-1
Keywords
serum amyloid
p
-com
p
onent
atherosclerosis
p
araoxonase 1
monocyte chemotactic
p
rotein 1
分类号
R543.5 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
SAP基因注射干预小鼠SLE样综合征的发生
被引量：
1
3
作者
吴瑾
吴厚生
屠红
熊思东
机构
复旦大学上海医学院免疫学系
上海交通大学肿瘤研究所
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第8期567-571,共5页
基金
国家重点基础研究发展规划 ( 2 0 0 1CB5 10 0 0 6)资助项目
文摘
目的 :研究SAP基因注射对SLE发病的干预作用 ,并进一步探讨SAP发挥作用的可能机制。方法 :通过RT PCR方法克隆SAP基因 ,构建其真核表达质粒pcDNA3 SAP ,观察SAP基因注射对活化淋巴细胞免疫诱导小鼠产生的SLE样综合征的干预作用 ,以ELISA方法检测抗dsDNA抗体的产生情况 ,以免疫荧光法检测肾脏免疫复合物沉积 ;通过巨噬细胞吞噬实验观察SAP与DNA结合后对DNA清除的影响 ;用增殖实验检测巨噬细胞吞噬SAP结合的DNA后对预致敏淋巴细胞活化的影响。结果 :SAP基因注射可有效干预小鼠SLE样综合征的发生 ,SAP与活化淋巴细胞DNA结合后可明显促进巨噬细胞对DNA的吞噬 ,并且巨噬细胞吞噬SAP结合的DNA后不引起预致敏淋巴细胞的增殖。结论
关键词
血清淀粉样p成分
(SA
p
)
DNA
系统性红斑狼疮
基因注射
Keywords
Serum amyloid
p
com
p
onent (SA
p
)
DNA
Systemic lu
p
us erythematosus
Gene injection
分类号
R392.3 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
血清淀粉样P成分转基因小鼠模型的建立
郭云云
张英汉
耿建国
辛亚平
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2006
0
在线阅读
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职称材料
2
血清淀粉样P物质对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的影响
赵金珍
陈思
胡露
梁亚玲
郭凯
郭志刚
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
SAP基因注射干预小鼠SLE样综合征的发生
吴瑾
吴厚生
屠红
熊思东
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004
1
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职称材料
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