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S.Heidelberg血清型特异性基因筛选及PCR检测方法的建立与应用
1
作者
翟立公
郭元新
+1 位作者
王俊颖
王蓓蓓
《食品与机械》
CSCD
北大核心
2018年第6期50-54,57,共6页
海德尔堡沙门氏菌(Salmonella enterica serovar Heidelberg,SH)是沙门氏菌属内重要的致病性血清型。通过对SH基因组序列进行BLAST比对和PCR验证,筛选出了4个SH血清型特异性基因(SeHA_C2639、SeHA_C2640、SeHA_C3259和SeHA_C3258)。以Se...
海德尔堡沙门氏菌(Salmonella enterica serovar Heidelberg,SH)是沙门氏菌属内重要的致病性血清型。通过对SH基因组序列进行BLAST比对和PCR验证,筛选出了4个SH血清型特异性基因(SeHA_C2639、SeHA_C2640、SeHA_C3259和SeHA_C3258)。以SeHA_C3258作为靶点设计引物pHAm8(350bp)和沙门氏菌属特异性引物139-141(284bp),建立SH的PCR检测方法,并对其应用效果进行评价。结果表明,经55株不同血清型的沙门氏菌和其他常见食源性致病菌证明,该检测体系具有较好的特异性,纯菌菌落灵敏度为6.1×10~2 CFU/mL。以浓度为N×10~5~N×10~1 CFU/mL的大肠杆菌或鼠伤寒沙门氏菌为干扰菌时,该体系对10~2 CFU/mL的SH检测结果无影响。人工污染SH的牛奶样品,经8h培养,检测限达1.52CFU/mL。该检测方法能快速、准确检测出食品中的SH,有利于在食品安全领域中的应用。
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关键词
海德尔堡沙门氏菌
血清型特异性基因
聚合酶链式反应
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职称材料
甲型副伤寒沙门菌特异性基因筛选及PCR检测体系建立
被引量：
4
2
作者
翟立公
王俊颖
+4 位作者
张小雨
孟欣
崔葆
赵婉晴
牛萍
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期151-157,共7页
以甲型副伤寒沙门菌为检测目标,通过比较基因组和聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)验证方法筛选到4个该血清型的特异性基因,其中以gene_3105作为该血清型的检测靶点设计引物PA23;并结合沙门菌属特异性引物139-141,建立一...
以甲型副伤寒沙门菌为检测目标,通过比较基因组和聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)验证方法筛选到4个该血清型的特异性基因,其中以gene_3105作为该血清型的检测靶点设计引物PA23;并结合沙门菌属特异性引物139-141,建立一种甲型副伤寒沙门菌的PCR检测方法。优化PCR反应体系,并对该检测体系的特异性、灵敏度、抗干扰能力及人工污染样品检出限等方面进行评价。结果表明,当样品中含有甲型副伤寒沙门菌时,该体系能扩增出2条特异性条带,含有其他血清型的沙门菌仅能扩增出284 bp条带,不含沙门菌无扩增条带产生。灵敏度评价表明,基因组DNA和纯菌菌落检出限分别为32.4 pg/μL和4.3×10~3 CFU/m L;抗干扰能力实验显示,当鸡肉背景菌群和猪肉背景菌群浓度在10~6 CFU/m L和4.87×10~7 CFU/m L时,检出限为6.43×10~4 CFU/m L。当无菌的鸡肉和猪肉样品中添加N CFU/25 g甲型副伤寒沙门菌时,经10 h增菌,检测结果为阳性(0<N<10)。实验建立甲型副伤寒沙门菌PCR检测方法具有较好的特异性和灵敏度,有很好的应用价值,可在食品安全领域广泛应用。
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关键词
甲型副伤寒沙门菌
比较
基因
组
血清型特异性基因
聚合酶链式反应
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职称材料
德尔卑沙门氏菌血清型分子检测靶点筛选及多重PCR检测方法的建立
被引量：
1
3
作者
翟立公
杨剑婷
+2 位作者
李永泉
王水平
王俊颖
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第7期269-275,共7页
利用比较基因组技术筛选到德尔卑沙门氏菌(Salmonella Derby, SD)的血清型特异性基因,以此为靶点设计引物与139-141引物共同构建多重PCR检测体系,对其特异性、菌落灵敏度、抗干扰能力及人工污染等方面进行评价。当扩增出171、284和512 b...
利用比较基因组技术筛选到德尔卑沙门氏菌(Salmonella Derby, SD)的血清型特异性基因,以此为靶点设计引物与139-141引物共同构建多重PCR检测体系,对其特异性、菌落灵敏度、抗干扰能力及人工污染等方面进行评价。当扩增出171、284和512 bp电泳条带时,检测结果为阳性。通过该方法检测39株沙门氏菌和18株非沙门氏菌,表现出100%特异性,该检测体系的DNA灵敏度为383.2 pg/μL,菌落灵敏度为52 CFU/mL。当SD与自然(猪肉、鸡肉和牛肉)的背景菌群浓度比为1∶10~4时,该检测体系能获得清晰、准确的3条扩增条带。在人工污染的猪肉、鸡肉和牛肉样品的检测中,增菌10 h,检测灵敏度为3.8 CFU/25g。该检测方法准确灵敏的检测SD,可在食品安全领域得到广泛应用。
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关键词
德尔卑沙门氏菌
多重PCR
血清型特异性基因
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职称材料
题名
S.Heidelberg血清型特异性基因筛选及PCR检测方法的建立与应用
1
作者
翟立公
郭元新
王俊颖
王蓓蓓
机构
安徽科技学院
出处
《食品与机械》
CSCD
北大核心
2018年第6期50-54,57,共6页
基金
高校优秀青年人才支持计划重点项目(编号:gxyqZD2016219)
安徽科技学院人才引进项目(编号:SPYJ201602)
文摘
海德尔堡沙门氏菌(Salmonella enterica serovar Heidelberg,SH)是沙门氏菌属内重要的致病性血清型。通过对SH基因组序列进行BLAST比对和PCR验证,筛选出了4个SH血清型特异性基因(SeHA_C2639、SeHA_C2640、SeHA_C3259和SeHA_C3258)。以SeHA_C3258作为靶点设计引物pHAm8(350bp)和沙门氏菌属特异性引物139-141(284bp),建立SH的PCR检测方法,并对其应用效果进行评价。结果表明,经55株不同血清型的沙门氏菌和其他常见食源性致病菌证明,该检测体系具有较好的特异性,纯菌菌落灵敏度为6.1×10~2 CFU/mL。以浓度为N×10~5~N×10~1 CFU/mL的大肠杆菌或鼠伤寒沙门氏菌为干扰菌时,该体系对10~2 CFU/mL的SH检测结果无影响。人工污染SH的牛奶样品,经8h培养,检测限达1.52CFU/mL。该检测方法能快速、准确检测出食品中的SH,有利于在食品安全领域中的应用。
关键词
海德尔堡沙门氏菌
血清型特异性基因
聚合酶链式反应
Keywords
S. Heidelberg
serotype specific genes
PCR
分类号
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
甲型副伤寒沙门菌特异性基因筛选及PCR检测体系建立
被引量：
4
2
作者
翟立公
王俊颖
张小雨
孟欣
崔葆
赵婉晴
牛萍
机构
安徽科技学院食品药品学院
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期151-157,共7页
基金
安徽高校自然科学研究重点项目(KJ2016A182)
安徽科技学院人才引进项目(SPYJ201602)
安徽科技学院大学生创新项目(16ZCX34)
文摘
以甲型副伤寒沙门菌为检测目标,通过比较基因组和聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)验证方法筛选到4个该血清型的特异性基因,其中以gene_3105作为该血清型的检测靶点设计引物PA23;并结合沙门菌属特异性引物139-141,建立一种甲型副伤寒沙门菌的PCR检测方法。优化PCR反应体系,并对该检测体系的特异性、灵敏度、抗干扰能力及人工污染样品检出限等方面进行评价。结果表明,当样品中含有甲型副伤寒沙门菌时,该体系能扩增出2条特异性条带,含有其他血清型的沙门菌仅能扩增出284 bp条带,不含沙门菌无扩增条带产生。灵敏度评价表明,基因组DNA和纯菌菌落检出限分别为32.4 pg/μL和4.3×10~3 CFU/m L;抗干扰能力实验显示,当鸡肉背景菌群和猪肉背景菌群浓度在10~6 CFU/m L和4.87×10~7 CFU/m L时,检出限为6.43×10~4 CFU/m L。当无菌的鸡肉和猪肉样品中添加N CFU/25 g甲型副伤寒沙门菌时,经10 h增菌,检测结果为阳性(0<N<10)。实验建立甲型副伤寒沙门菌PCR检测方法具有较好的特异性和灵敏度,有很好的应用价值,可在食品安全领域广泛应用。
关键词
甲型副伤寒沙门菌
比较
基因
组
血清型特异性基因
聚合酶链式反应
Keywords
Salmonella Paratyphi A
comparative genomics
serotype-specific genes
PCR
分类号
TS201.6 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
德尔卑沙门氏菌血清型分子检测靶点筛选及多重PCR检测方法的建立
被引量：
1
3
作者
翟立公
杨剑婷
李永泉
王水平
王俊颖
机构
安徽科技学院食品工程学院
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第7期269-275,共7页
基金
高校优秀青年人才支持计划重点项目(gxyqZD20 16219)
安徽科技学院人才引进项目(SPYJ201602)
文摘
利用比较基因组技术筛选到德尔卑沙门氏菌(Salmonella Derby, SD)的血清型特异性基因,以此为靶点设计引物与139-141引物共同构建多重PCR检测体系,对其特异性、菌落灵敏度、抗干扰能力及人工污染等方面进行评价。当扩增出171、284和512 bp电泳条带时,检测结果为阳性。通过该方法检测39株沙门氏菌和18株非沙门氏菌,表现出100%特异性,该检测体系的DNA灵敏度为383.2 pg/μL,菌落灵敏度为52 CFU/mL。当SD与自然(猪肉、鸡肉和牛肉)的背景菌群浓度比为1∶10~4时,该检测体系能获得清晰、准确的3条扩增条带。在人工污染的猪肉、鸡肉和牛肉样品的检测中,增菌10 h,检测灵敏度为3.8 CFU/25g。该检测方法准确灵敏的检测SD,可在食品安全领域得到广泛应用。
关键词
德尔卑沙门氏菌
多重PCR
血清型特异性基因
Keywords
Salmonella Derby
multiplex PCR
serotype-specific genes
分类号
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
作者
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发文年
被引量
操作
1
S.Heidelberg血清型特异性基因筛选及PCR检测方法的建立与应用
翟立公
郭元新
王俊颖
王蓓蓓
《食品与机械》
CSCD
北大核心
2018
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
甲型副伤寒沙门菌特异性基因筛选及PCR检测体系建立
翟立公
王俊颖
张小雨
孟欣
崔葆
赵婉晴
牛萍
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018
4
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职称材料
3
德尔卑沙门氏菌血清型分子检测靶点筛选及多重PCR检测方法的建立
翟立公
杨剑婷
李永泉
王水平
王俊颖
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2019
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