应激会对动物的学习记忆能力产生影响,这种影响呈一种倒U型关系,即当应激强度过大或时间过长时这种影响往往是一种损伤,而适度的应激会对学习记忆产生促进作用。目前认为应激激活了下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamo-pituitary-adrenal,H...应激会对动物的学习记忆能力产生影响,这种影响呈一种倒U型关系,即当应激强度过大或时间过长时这种影响往往是一种损伤,而适度的应激会对学习记忆产生促进作用。目前认为应激激活了下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamo-pituitary-adrenal,HPA)轴,诱导糖皮质激素的释放。适量的糖皮质激素会促进长时程增强(long-term potentiation,LTP)的形成,从而促进学习记忆。血清/糖皮质激素诱导激酶(serum and glucocorticoid regulated protein kinase,SGK)作为糖皮质激素诱导的一个激酶,参与了多种离子通道的调节,能够促进神经元的存活和轴突的再生。研究发现SGK的表达也会促进空间学习记忆能力。展开更多
目的构建含有小鼠血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶3(serum and glucocorticoid-induced protein kinase 3,SGK3)基因的真核表达载体pcDNA3.1-MYC-SGK3-mCherry,并观察和验证其在转染细胞HEK293中的表达。方法通过聚合酶链式反应将实验室...目的构建含有小鼠血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶3(serum and glucocorticoid-induced protein kinase 3,SGK3)基因的真核表达载体pcDNA3.1-MYC-SGK3-mCherry,并观察和验证其在转染细胞HEK293中的表达。方法通过聚合酶链式反应将实验室保存的真核表达质粒pcDNA3.1-MYC-SGK3中目的基因SGK3与mCherry融合并扩增出来,然后定向克隆至pcDNA3.1-MYC质粒中,经限制性内切酶消化和测序证实后,通过脂质体法转染HEK293细胞,Western blotting法检测目的基因的蛋白表达情况。结果测序结果与之前预期结果相符,证实pcDNA3.1-MYC-SGK3-mCherry真核表达载体构建成功。Western blotting结果显示,转染pcDNA3.1-MYC-SGK3-mCherry的HEK293细胞出现清晰的阳性反应条带,说明目的片段成功表达。结论pcDNA3.1-MYC-SGK3-mCherry真核表达载体构建成功。展开更多
文摘应激会对动物的学习记忆能力产生影响,这种影响呈一种倒U型关系,即当应激强度过大或时间过长时这种影响往往是一种损伤,而适度的应激会对学习记忆产生促进作用。目前认为应激激活了下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamo-pituitary-adrenal,HPA)轴,诱导糖皮质激素的释放。适量的糖皮质激素会促进长时程增强(long-term potentiation,LTP)的形成,从而促进学习记忆。血清/糖皮质激素诱导激酶(serum and glucocorticoid regulated protein kinase,SGK)作为糖皮质激素诱导的一个激酶,参与了多种离子通道的调节,能够促进神经元的存活和轴突的再生。研究发现SGK的表达也会促进空间学习记忆能力。
文摘目的构建含有小鼠血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶3(serum and glucocorticoid-induced protein kinase 3,SGK3)基因的真核表达载体pcDNA3.1-MYC-SGK3-mCherry,并观察和验证其在转染细胞HEK293中的表达。方法通过聚合酶链式反应将实验室保存的真核表达质粒pcDNA3.1-MYC-SGK3中目的基因SGK3与mCherry融合并扩增出来,然后定向克隆至pcDNA3.1-MYC质粒中,经限制性内切酶消化和测序证实后,通过脂质体法转染HEK293细胞,Western blotting法检测目的基因的蛋白表达情况。结果测序结果与之前预期结果相符,证实pcDNA3.1-MYC-SGK3-mCherry真核表达载体构建成功。Western blotting结果显示,转染pcDNA3.1-MYC-SGK3-mCherry的HEK293细胞出现清晰的阳性反应条带,说明目的片段成功表达。结论pcDNA3.1-MYC-SGK3-mCherry真核表达载体构建成功。
