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干斑法保存血浆中HBV、HCV、HIV病毒核酸及其保存效期研究
1
作者 张菁 邵春燕 +3 位作者 任苓苓 高玲玲 王明慧 骆群 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1869-1874,共6页
目的:建立一种以干斑法为基础制作的血液采集卡保存血浆中病毒核酸的方法,通过建立阿伦尼乌斯方程,预测该种保存方法保存核酸的效期,并论证该种保存方法在血站留存血液样本进行核酸复测的可行性。方法:分别将HBV、HCV、HIV核酸阳性的血... 目的:建立一种以干斑法为基础制作的血液采集卡保存血浆中病毒核酸的方法,通过建立阿伦尼乌斯方程,预测该种保存方法保存核酸的效期,并论证该种保存方法在血站留存血液样本进行核酸复测的可行性。方法:分别将HBV、HCV、HIV核酸阳性的血浆样本制备成保存卡,以干浆斑的形式进行保存;将制备的保存卡分别放置于37、45、50和55℃条件下进行加速保存实验,不定期取出各个温度条件下的保存卡片,进行核酸提取操作,纯化出待测核酸样本,进行后续PCR测试,并记录CT值;根据阿伦尼乌斯方程建立起失效时间与储存温度之间的模型,进而推测出血液采集卡在规定保存温度条件下保存核酸的有效期。结果:HBV、HCV、HIV 3种核酸阳性的血浆样本,在使用干斑法保存时,其保存效期与温度的回归方程分别为:y=-11546x+31.74、y=-12949x+36.88、y=-12204x+34.48,线性回归的相关系数r均>0.98。预测HBV、HCV和HIV 3种病毒核酸使用干斑法保存时,在4℃的保存温度下,其保存效期分别为20792、19289和14285 d;在20℃的保存温度下,保存效期分别为2135、1502和1289 d。结论:血液样本中常见的3种病毒核酸,使用干斑法保存时,在加速破坏实验中符合一级反应模式,核酸降解速度与保存的绝对温度之间的关系符合阿伦尼乌斯方程。经过该方程的推算,使用干斑法保存血浆核酸样本,在不高于20℃的保存条件下,核酸稳定性效期最低可达3.5年,基本可满足血站血液样本留样保存年限的要求。 展开更多
关键词 干斑法 阿伦尼乌斯方程 血液采集卡 核酸 稳定性
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