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异种HSP_(70)及固相抗体法体外扩增人γδT细胞的比较 被引量：3
1
作者 高诗娟 施广霞 +2 位作者 张素梅 钱振超 何维 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期845-849,共5页
目的 :比较异种HSP70 及固相抗体法体外扩增人γδT细胞。方法 :分别用固相抗体法、HSP70BCG 及小鼠榄香烯复合瘤苗热休克蛋白 70 肽复合物 (HSP70m 肽复合物 )体外扩增人PBMCs的γδT细胞 ,流式细胞仪检测细胞表型及亚型分布 ,RT PCR... 目的 :比较异种HSP70 及固相抗体法体外扩增人γδT细胞。方法 :分别用固相抗体法、HSP70BCG 及小鼠榄香烯复合瘤苗热休克蛋白 70 肽复合物 (HSP70m 肽复合物 )体外扩增人PBMCs的γδT细胞 ,流式细胞仪检测细胞表型及亚型分布 ,RT PCR检测各亚型基因的取用。MTT检测γδT细胞的细胞毒作用。结果 :培养 14天后 ,抗体法扩增的PMBCs总数增加 30～ 4 0倍 ,γδT细胞的比率由 3.2 %提高到 86 .7% ;HSP70BCG 组PBMCs总数增加 7～ 8倍 ,γδT细胞的比率由 3.2 %提高到 71.32 % ;HSP70m 肽复合物组PBMCs总数增加 4～ 5倍 ,γδT细胞的比率由 3.2 %提高到 2 7.2 6 %。抗体及HSP70BCG 扩增的γδT细胞以表达Vγ9 Vδ2亚型为主 ,且Vδ1、Vδ2、Vδ3三种基因均得到取用 ,对Daudi具较高的杀伤活性。结论 :抗体及HSP70BCG 均能扩增出高纯度的γδT细胞 ,且具有完整的受体库 ,扩增的γδT细胞具细胞毒活性。 展开更多
关键词 ΓΔT细胞 固相抗体法 HSP70BCG HSP70m-肽复合物
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固相抗体直接竞争ELISA法测定氯黄隆在土壤中的残留动态 被引量：4
2
作者 刘曙照 袁树忠 +1 位作者 徐暄 钱传范 《农药学学报》 CAS CSCD 2000年第2期57-62,共6页
采用包被抗体直接竞争 EL ISA法测定了氯黄隆在盆土中的残留动态和农田土壤中氯黄隆的残留量。结果表明 :EL ISA法测定土壤中氯黄隆的检测限 <0 .1ng/ g,标准添加回收率为 85.4 %～ 118% ,变异系数为 8.95%～ 16 .14% ,符合残留分析... 采用包被抗体直接竞争 EL ISA法测定了氯黄隆在盆土中的残留动态和农田土壤中氯黄隆的残留量。结果表明 :EL ISA法测定土壤中氯黄隆的检测限 <0 .1ng/ g,标准添加回收率为 85.4 %～ 118% ,变异系数为 8.95%～ 16 .14% ,符合残留分析的要求。在本实验条件下 ,氯黄隆在土壤中的半衰期为 2 2～ 2 6 d,6 0 d降解 80 %以上。麦茬大田连续两年使用氯黄隆2 2 .5g/ hm2 、4 5g/ hm2 ,第一年麦收时中性沙质土壤和弱碱性沙壤土中氯黄隆的残留量分别为0 .2 4、0 .56 ng/ g和 0 .30、0 .96 ng/ g,第二年分别为 0 .2 8、0 .6 7ng/ g和 0 .38、1.0 9ng/ g,与平行进行的高效液相色谱法、生物测定法测定结果基本一致。 展开更多
关键词 测定 氯黄隆 除草剂 土壤 残留 固相抗体直接竞争ELISA法
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基于固相凝集法的IgG抗-A/B检测方法的建立和评价 被引量：1
3
作者 张强 施晶晶 张敏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第17期2126-2128,2133,共4页
目的:建立人血清IgG抗-A/B的固相凝集检测方法,并进行评价。方法:提取人唾液中的分泌型A、B血型物质作为包被蛋白,以抗人IgG抗体作为二抗,以IgG抗-D致敏的O型红细胞作为指示红细胞,建立血清IgG抗-A/B的固相凝集检测方法,评价其特异性和... 目的:建立人血清IgG抗-A/B的固相凝集检测方法,并进行评价。方法:提取人唾液中的分泌型A、B血型物质作为包被蛋白,以抗人IgG抗体作为二抗,以IgG抗-D致敏的O型红细胞作为指示红细胞,建立血清IgG抗-A/B的固相凝集检测方法,评价其特异性和重复性。随机选取40例O型血孕妇(20例检测IgG抗-A、20例检测IgG抗-B),同时采用固相凝集法和试管法检测抗体效价,配对t检验、Pearson相关分析比较2种方法检测结果。结果:包被抗原(A或B血型物质)不与无相应抗体血清反应,特异性良好。检测IgG抗-A的批内差异为2.19%~6.90%,批间差异为4.47%~8.15%;IgG抗-B的批内差异为3.03%~6.10%,批间差异为3.17%~8.80%;固相凝集法灵敏度高于试管法,其检测IgG抗-A/B的效价分别为试管法的5.86倍和9.19倍,差异有统计学意义(P<0.05)。IgG抗-A检测相关系数为0.700(P<0.05),IgG抗-B检测相关系数为0.638(P<0.05),2种方法检测结果显著相关。结论:成功建立基于固相凝集法的血清IgG抗-A/B检测方法,该法灵敏度和特异性高、重复性好,检测效率高,无毒性危害,具备良好实用价值。 展开更多
关键词 IgG抗-A/B 固相凝集法 ABO新生儿溶血病
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固相阻断ELISA法检测口蹄疫病毒O型抗体的不确定度评定 被引量：1
4
作者 王佳璟 何学东 杨芳 《浙江畜牧兽医》 2022年第5期7-10,共4页
目的:以口蹄疫病毒O型抗体(固相阻断ELISA法)检测的不确定度评定为例,以两种方法评定检测的不确定度。方法:分别使用“影响因素分析法”和“对照样品法”对检测口蹄疫病毒O型抗体的不确定度进行评定。结果:“影响因素分析法”的合成不... 目的:以口蹄疫病毒O型抗体(固相阻断ELISA法)检测的不确定度评定为例,以两种方法评定检测的不确定度。方法:分别使用“影响因素分析法”和“对照样品法”对检测口蹄疫病毒O型抗体的不确定度进行评定。结果:“影响因素分析法”的合成不确定度为0.1297,扩展不确定度为0.2593;“对照样品法”的合成不确定度为0.1040,扩展不确定度为0.2080。结论:对新方法进行不确定度评定时,“影响因素分析法”更适用,可帮助检测员更了解试验过程及注意事项,而“对照样品法”直接评估该试验过程的合成不确定度,减少大量计算过程,快速得出结论。 展开更多
关键词 不确定度评定 口蹄疫病毒O型抗体 固相阻断ELISA 影响因素分析法 对照样品法
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MASPAT配型相合血小板输注无效的异基因造血干细胞移植患者的血小板输注策略 被引量：2
5
作者 杨璐 马春娅 +7 位作者 付丽辉 台胜飞 马铭梓 钟晓龙 樊斌 梁笑星 汪德清 于洋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期850-854,共5页
目的:探讨异基因造血干细胞移植患者血小板抗体固相凝集法(MASPAT)配型相合血小板输注无效的原因及血小板输注策略。方法:选取1例因输血诱导产生供者特异性HLA抗体(DSA),且该DSA导致患者移植失败和MASPAT配型相合血小板输注无效的案例,... 目的:探讨异基因造血干细胞移植患者血小板抗体固相凝集法(MASPAT)配型相合血小板输注无效的原因及血小板输注策略。方法:选取1例因输血诱导产生供者特异性HLA抗体(DSA),且该DSA导致患者移植失败和MASPAT配型相合血小板输注无效的案例,详细分析该患者血小板输注无效原因及血小板输注策略。结果:患者女,32岁,以“发热、白细胞减少”为主要表现起病,于外院明确诊断为急性髓系白血病(高危),化疗缓解后拟行造血干细胞移植入院。在化疗过程中,患者因输注血小板产生DSA,且该DSA存在与首次移植供者不合的HLA基因位点,导致首次移植原发植入失败。该患者在移植前后多次进行血小板输注,结果显示,MASPAT配型相合血小板输注有效率仅为35.3%,进一步分析血小板输注无效的原因为MASPAT方法漏检了抗体。行二次造血干细胞移植时,选择了DSA-供者,且规避初次移植过程中配型相合但输注无效的血小板,结果该患者移植成功,顺利出院。结论:DSA可引发移植失败或使移植物失功。对于已经产生DSA的患者,在输注血小板前仅采用MASPAT配型相合的血小板输注策略会漏检抗体,导致血小板输注无效。 展开更多
关键词 供者特异性HLA抗体 血小板抗体固相凝集法 原发植入失败 血小板输注无效 抗体漏检
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固相金斑免疫试验检测包虫病血清抗体技术的初步建立 被引量：2
6
作者 邵锡如 肖乐义 +4 位作者 易虎 侯瑜 阎小君 巩天祥 魏永灏 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1998年第2期51-51,14,共2页
关键词 包虫病 血清诊断 抗体 固相金斑免疫法
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两步串联层析法纯化鼠抗人CD28单克隆抗体2F5 被引量：5
7
作者 马泓冰 孙中文 +4 位作者 徐颖 李文香 陶然 陈洁 张学光 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期152-154,共3页
目的建立从小鼠腹水中纯化鼠抗人CD28单克隆抗体(mAb)2F5的两步串联层析法。方法将含mAb2F5的腹水经离心、过滤及缓冲溶液变换预处理后,先经固相化金属螯合亲和层析法(immobilizedmetalaffinitychromatography,IMAC)纯化,去除大部分杂蛋... 目的建立从小鼠腹水中纯化鼠抗人CD28单克隆抗体(mAb)2F5的两步串联层析法。方法将含mAb2F5的腹水经离心、过滤及缓冲溶液变换预处理后,先经固相化金属螯合亲和层析法(immobilizedmetalaffinitychromatography,IMAC)纯化,去除大部分杂蛋白,再经凝胶过滤层析法(gelfiltration,GF)精细纯化,并探讨了上样的流速和洗脱液的种类对mAb2F5纯度的影响。纯化的mAb2F5的生物学活性用3H-TdR掺入法进行分析。结果以两步串联层析法纯化的鼠抗人CD28mAb2F5的纯度大于90%,总回收率达70%。纯化的mAb2F5在体外对PBTC具有明显的促增殖作用;而且其促增殖作用的活性优于ProteinG亲和层析法(affinitychro-matography,AC)纯化所获得mAb。结论建立的两步串联层析纯化方法操作简便,所得mAb的纯度高、生物学活性好。 展开更多
关键词 固相化金属螯合层析法 凝胶过滤层析法 纯化 单克隆抗体
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固相血凝法检测弓形虫抗体
8
作者 张阳根 黄邱朝 武建国 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1995年第4期64-64,34,共2页
固相血凝法检测弓形虫抗体张阳根，黄邱朝，武建国弓形虫是一种细胞内寄生虫，人受感染后可出现各种临床表现及病变。对人类危害性最大的是先天性弓形虫病，可引起多种先天畸形、智力发育缺陷、视力障碍。孕妇感染则可致早产、流产、死... 固相血凝法检测弓形虫抗体张阳根，黄邱朝，武建国弓形虫是一种细胞内寄生虫，人受感染后可出现各种临床表现及病变。对人类危害性最大的是先天性弓形虫病，可引起多种先天畸形、智力发育缺陷、视力障碍。孕妇感染则可致早产、流产、死胎等。有人建议早孕妇女应常规检测血... 展开更多
关键词 弓形体抗体 固相血凝法
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DIFA等四项免疫学方法检测血吸虫病合并弓形虫感染的研究 被引量：2
9
作者 牛安欧 徐岗 +1 位作者 杜玉坤 朱红刚 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1996年第6期29-30,共2页
弓形虫ＩＨＡ和ＥＬＩＳＡ对急性血吸虫病有严重的交叉反应，影响弓形虫病的临床诊断。本文用ＤＩ－ＦＡ、ＩＦＴ、ＩＳＡＧＡ－ＩｇＧ和ＩＨＡ检测６６例急性血吸虫病，结果其阳性率分别为１９．７０％、２２．７３％、１６．６７％和... 弓形虫ＩＨＡ和ＥＬＩＳＡ对急性血吸虫病有严重的交叉反应，影响弓形虫病的临床诊断。本文用ＤＩ－ＦＡ、ＩＦＴ、ＩＳＡＧＡ－ＩｇＧ和ＩＨＡ检测６６例急性血吸虫病，结果其阳性率分别为１９．７０％、２２．７３％、１６．６７％和６５．１６％；用ＤＩＦＡ和ＩＦＴ检测健康人群的弓形体阳性率为９％；还用上述方法检测两种病的混合血清和兔急性血吸虫病血清。通过比较、分析认为前三种方法可用于两病的鉴别。本文还用上述方法检测２１例慢性血吸虫病，阳性率在０～１９．０５％之间，无明显血清交叉反应。 展开更多
关键词 弓形体病 急性 血吸虫病 免疫固相凝集法
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酶联免疫吸附试验 被引量：1
10
《养殖技术顾问》 2009年第8期105-105,共1页
酶联免疫吸附试验（以下简称ELISA）：是酶免疫测定技术中应用最广的技术。基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体（聚苯乙烯微量反应板）表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除。
关键词 酶联免疫吸附试验 抗原抗体反应 测定技术 固相载体 聚苯乙烯 反应板 酶标记 洗涤法
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