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筛选获得的血型抗原结合黏附素(BabA)适配子可阻断幽门螺杆菌(H.pylori)在小鼠胃内的定植 被引量:1
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作者 袁媛 李卫鹏 +2 位作者 周晓静 孙伟莉 唐晓磊 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期793-800,共8页
目的 探索核酸适配子特异性结合幽门螺杆菌(H.pylori)血型抗原结合黏附素(BabA)对H.pylori宿主细胞黏附的阻断作用。方法 培养H.pylori菌株并提取基因组,并设计引物PCR扩增BabA基因,扩增获得的BabA基因克隆、构建至原核表达质粒,异丙基-... 目的 探索核酸适配子特异性结合幽门螺杆菌(H.pylori)血型抗原结合黏附素(BabA)对H.pylori宿主细胞黏附的阻断作用。方法 培养H.pylori菌株并提取基因组,并设计引物PCR扩增BabA基因,扩增获得的BabA基因克隆、构建至原核表达质粒,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化后作为靶标,利用指数富集的配体系统进化技术(SELEX)筛选能够特异性结合BabA的单链脱氧核苷酸(ssDNA)适配子;酶联寡聚核苷酸吸附试验(ELONA)法检测并评估候选适配子的特征;随后在体外细胞水平和小鼠感染模型中,分别采用流式细胞术和菌落计数验证ssDNA适配子阻断H.pylori黏附的效果,同时利用ELISA检测小鼠胃黏膜细胞匀浆中白细胞介素6(IL-6)、 IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、 IL-10和IL-4的水平。结果提取H.pylori ATCC 43504基因组并构建了pET32a-BabA质粒,诱导后并纯化重组蛋白相对分子质量(Mr)约为39 000;经肽指纹图谱(PMF)分析其与BabA蛋白一致;以此为靶标运用SELEX筛选获得5个候选适配子,经分析鉴定适配子A10、 A30和A42识别相同位点,A3和A16与上述三个适配子各自识别不同的位点。适配子体外能够显著阻断H.pylori的黏附,且动物模型实验证明适配子经灌胃处理后,对胃黏膜的H.pylori定植有阻断效果,且能够减轻诱导的炎症反应,适配子治疗组胃黏膜匀浆中IL-4、 IL-6、 IL-8和TNF-ɑ水平低于模型组。结论 适配子特异性结合BabA封闭H.pylori与胃黏膜上皮细胞的黏附能够阻断H.pylori在胃黏膜的定植。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 血型抗原结合黏附素(BabA) 指数富集的配体系统进化技术(SELEX) 适配子 定植
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幽门螺杆菌毒力因子血型抗原结合黏附素在胃癌中的研究现状 被引量:2
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作者 俞阳 王娜 +2 位作者 王博方 李玉民 陈昊 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第18期2284-2288,共5页
幽门螺杆菌(H.pylori)感染已成为当前公共卫生领域重要的问题之一,与多种胃肠道疾病的发生发展相关,尤其是胃癌,已有大量证据证实了两者之间的确切关系。目前,对于H.pylori致病机制的研究主要集中在H.pylori的毒力因子。血型抗原结合黏... 幽门螺杆菌(H.pylori)感染已成为当前公共卫生领域重要的问题之一,与多种胃肠道疾病的发生发展相关,尤其是胃癌,已有大量证据证实了两者之间的确切关系。目前,对于H.pylori致病机制的研究主要集中在H.pylori的毒力因子。血型抗原结合黏附素(blood group antigen⁃binding adhesion,BabA)作为一种新识别的毒力因子,在H.pylori诱导胃癌发生发展中的作用逐渐获得关注。本文将对BabA的结构功能、表达调控、促胃癌作用以及临床应用等方面进行全面综述,旨在为开发新型防治策略提供方向。 展开更多
关键词 胃肿瘤 幽门螺杆菌 血型抗原结合黏附素 LewisB 危险因
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