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禽流感病毒H7N2血凝素HA1基因在大肠杆菌中的表达被引量：3: 1; 作者多海刚赵铁柱 +5 位作者孙明王传彬王宏伟陈西钊冉多良田克恭《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第1期7-10,共4页; 目的　表达H7N2亚型禽流感病毒 (AIV)HA1基因 ,用于感染H7亚型禽流感病毒抗体的检测和HA1蛋白功能研究。方法　采用RT PCR方法对H7N2亚型AIVHA1基因进行扩增 ,将PCR产物克隆于pGEM T Easy载体 ,将该基因插入pGEX 4T 2中构建HA1基因原核... 展开更多; 关键词 H7N2亚型禽流感病毒血凝素ha1基因大肠杆菌基因表达抗体检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

2株云南H9N2亚型禽流感病毒HA和NA基因序列分析被引量：7: 2; 作者李佳佳李素华 +4 位作者宋建领黄景军缪渊陈曦季佳《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第3期873-883,共11页; 在2019年1月-2019年6月对云南出现呼吸道疫病的57个鸡场进行H9亚型禽流感检测的基础上,选取石林和楚雄2个H9亚型禽流感阳性样品进行病毒分离。从分离的H9N2亚型禽流感病毒感染鸡胚尿囊液中提取总RNA,采用特异性引物经反转录PCR分别扩增H... 展开更多; 关键词 H9N2禽流感病毒血凝素(ha)基因神经氨酸酶(NA)基因分子特征; 在线阅读下载PDF 职称材料

33株H9N2亚型禽流感病毒分离株分子流行特点的研究被引量：22: 3; 作者吴海燕李明义 +3 位作者范根成王述柏单虎刘拂晓《中国动物检疫》 CAS 2010年第6期31-33,共3页; 在1998至2007年期间,采集了我国不同地区、不同宿主来源的H9N2亚型禽流感病毒株,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增HA基因,获得33株H9N2亚型禽流感病毒的核苷酸序列。结合GenBank中公开发表的其他国内H9亚型禽流感HA基因序列共65株,... 展开更多; 关键词禽流感病毒 H9N2亚型血凝素基因ha 序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

H5亚型禽流感病毒RT-LAMP可视化检测技术的建立被引量：7: 4; 作者彭宜谢芝勋 +6 位作者刘加波庞耀珊邓显文谢志勤谢丽基范晴罗思思《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期323-327,共5页; 【目的】建立一种适用于H5亚型禽流感病毒(AIV)的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)可视化快速检测技术,为控制疫情扩散、减少经济损失争取了时间。【方法】根据GenBank中H5亚型AIV血凝素(HA)基因序列,设计一套针对HA基因6个区域的4条特异... 展开更多; 关键词 H5亚型禽流感病毒 RT—LAMP 可视化检测血凝素(ha)基因荧光试剂; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名禽流感病毒H7N2血凝素HA1基因在大肠杆菌中的表达被引量：3: 1; 作者多海刚赵铁柱孙明王传彬王宏伟陈西钊冉多良田克恭; 机构新疆农业大学农业部兽医诊断中心; 出处《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第1期7-10,共4页; 基金国家科技公关课题 2 0 0 4BA5 19A0 6。; 文摘目的　表达H7N2亚型禽流感病毒 (AIV)HA1基因 ,用于感染H7亚型禽流感病毒抗体的检测和HA1蛋白功能研究。方法　采用RT PCR方法对H7N2亚型AIVHA1基因进行扩增 ,将PCR产物克隆于pGEM T Easy载体 ,将该基因插入pGEX 4T 2中构建HA1基因原核表达载体 ,转化BL2 1大肠杆菌后 ,在IPTG诱导下表达HA1蛋白 ,Westernblot鉴定表达HA1蛋白。电洗脱方法纯化表达HA1蛋白 ,建立间接ELISA方法 ,对感染AIVH7、H9、H5亚型AIV阳性血清进行检测。结果　成功克隆H7N2亚型AIV的HA1基因 ,其核苷酸序列长度 96 6bp ,编码 32 2个氨基酸残基。构建HA1基因原核表达载体在大肠杆菌内表达出约 6 1× 10 3的HA1融合蛋白。Westernblot和ELISA方法鉴定表明 :表达HA1蛋白与感染H7亚型AIV鸡血清有反应 ,与H5、H9亚型AIV阳性血清没有反应。结论　本研究在大肠杆菌中成功表达了H7N2亚型AIVHA1基因蛋白 ,具有与感染H7亚型AIV阳性血清反应原性 ,不与H5和H9亚型AIV感染阳性血清发生反应。; 关键词 H7N2亚型禽流感病毒血凝素ha1基因大肠杆菌基因表达抗体检测; Keywords H7N2 subtype Avian Influenza Virus ha1 gene Expression; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学] S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名2株云南H9N2亚型禽流感病毒HA和NA基因序列分析被引量：7: 2; 作者李佳佳李素华宋建领黄景军缪渊陈曦季佳; 机构西南林业大学云南省畜牧兽医科学院; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第3期873-883,共11页; 基金云南重要高原湿地迁徙性涉禽及区域家禽相关疫病监测研究云南省应用基础研究计划重点项目(2016FA013)。; 文摘在2019年1月-2019年6月对云南出现呼吸道疫病的57个鸡场进行H9亚型禽流感检测的基础上,选取石林和楚雄2个H9亚型禽流感阳性样品进行病毒分离。从分离的H9N2亚型禽流感病毒感染鸡胚尿囊液中提取总RNA,采用特异性引物经反转录PCR分别扩增HA和NA基因,PCR产物纯化后进行测序。序列比对及系统发育分析结果表明,云南2株H9N2毒株HA基因核苷酸序列同源性为94.2%,NA基因核苷酸序列同源性为93.6%,系统进化分析表明云南H9N2亚型禽流感病毒HA和NA基因均属于欧亚谱系中的类ADKHKY28097分支(Y280-like),ACKYN12019和ACKYN72019 HA基因之间的同源性为94.3%,与参考毒株ACKJX2448的同源性最高,为95.6%~98.5%,与中国流行的H9N2代表株和疫苗株同源性较低。HA蛋白333-340位裂解位点为PSRSSR↓GLF,具有低致病性禽流感病毒分子特征,受体结合位点均发生E198T和Q234L的突变,具有人样受体结合特征,在29、141、298、305、313、492位氨基酸有6个糖基化位点。ACKYN12019和ACKYN72019 NA基因同源性为93.6%,与Y280-like代表毒株的同源性分别为97.1%~97.5%和93.7%~94.6%,NA蛋白缺失63、64、65位氨基酸,在44、69、86、146、200、234位氨基酸处存在6个潜在的糖基化位点,NA蛋白红细胞结合(HB)位点分析发现,368-369、399-403、432位氨基酸处存在变异。研究结果显示,H9N2亚型禽流感病毒一直处于不断的变异之中,故应加强其监测与防控。; 关键词 H9N2禽流感病毒血凝素(ha)基因神经氨酸酶(NA)基因分子特征; Keywords H9N2 avian influenza virus hemagglutinin(ha)gene neuraminidase(NA)gene molecular characteristics; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名33株H9N2亚型禽流感病毒分离株分子流行特点的研究被引量：22: 3; 作者吴海燕李明义范根成王述柏单虎刘拂晓; 机构青岛农业大学青岛易邦生物工程有限公司; 出处《中国动物检疫》 CAS 2010年第6期31-33,共3页; 文摘在1998至2007年期间,采集了我国不同地区、不同宿主来源的H9N2亚型禽流感病毒株,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增HA基因,获得33株H9N2亚型禽流感病毒的核苷酸序列。结合GenBank中公开发表的其他国内H9亚型禽流感HA基因序列共65株,应用计算机软件绘制进化树,进行H9亚型禽流感病毒谱系全景分析,探索H9亚型禽流感的流行趋势。分析结果表明:这65株的基因进化树主要分为三个系列,每个系列毒株均呈现全国性流行分布;三个系列毒株可在同一时间段内、同一地区发生流行;不同时间的流行毒株虽有变异,但大部分归属于三个系列中。无论从时间的推移上还是地域的转变中,病毒均没有表现出明显的时间演变与地理分布特征,进一步显示了H9亚型禽流感的复杂性和多样性。; 关键词禽流感病毒 H9N2亚型血凝素基因ha 序列分析; Keywords Avian Influenza Virus H9N2 subtype ha sequcnce analysis; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名H5亚型禽流感病毒RT-LAMP可视化检测技术的建立被引量：7: 4; 作者彭宜谢芝勋刘加波庞耀珊邓显文谢志勤谢丽基范晴罗思思; 机构广西兽医研究所/广西畜禽疫苗新技术重点实验室; 出处《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期323-327,共5页; 基金广西科技攻关项目(桂科攻1222003-2-4) 广西特聘专家专项项目(2011B020) +1 种基金广西基本科研业务费专项项目(桂兽研专项09-2); 文摘【目的】建立一种适用于H5亚型禽流感病毒(AIV)的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)可视化快速检测技术,为控制疫情扩散、减少经济损失争取了时间。【方法】根据GenBank中H5亚型AIV血凝素(HA)基因序列,设计一套针对HA基因6个区域的4条特异性引物,在反应之前向反应液中加入荧光试剂(Calcein/MnCl2混合液),然后对反应条件和体系进行优化。【结果】优化的RT-LAMP技术操作简便迅速,常规水浴锅中50min可完成,能特异性地检测出H5亚型AIV,但对其他HA亚型AIV、禽呼吸道病原体无交叉扩增反应,灵敏度是常规RT-PCR的10倍;反应结束后无需打开反应管盖,即可根据反应液的颜色变化对结果进行判定。【结论】建立的H5亚型AIVRT-LAMP可视化检测技术具有简便、快速、特异等特点,可在设备有限的基层兽医站及养殖场对H5亚型AIV进行快速初步诊断。; 关键词 H5亚型禽流感病毒 RT—LAMP 可视化检测血凝素(ha)基因荧光试剂; Keywords H5 subtype avian influenza virus RT-LAMP visual detection hemagglutinin（ha） gene fluorescent reagent; 分类号 S858.31 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	禽流感病毒H7N2血凝素HA1基因在大肠杆菌中的表达	多海刚赵铁柱孙明王传彬王宏伟陈西钊冉多良田克恭	《中国实验动物学报》 CAS CSCD	2005	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	2株云南H9N2亚型禽流感病毒HA和NA基因序列分析	李佳佳李素华宋建领黄景军缪渊陈曦季佳	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2020	7	在线阅读下载PDF 职称材料
3	33株H9N2亚型禽流感病毒分离株分子流行特点的研究	吴海燕李明义范根成王述柏单虎刘拂晓	《中国动物检疫》 CAS	2010	22	在线阅读下载PDF 职称材料
4	H5亚型禽流感病毒RT-LAMP可视化检测技术的建立	彭宜谢芝勋刘加波庞耀珊邓显文谢志勤谢丽基范晴罗思思	《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	7	在线阅读下载PDF 职称材料