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红景天苷改善顺铂引起的小鼠耳蜗毛细胞和螺旋神经节神经元损伤的机制 被引量:1
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作者 李兆龙 徐义策 +1 位作者 李泽文 周洁 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期60-64,共5页
目的探究红景天苷(SAL)改善顺铂(CIS)引起的耳蜗毛细胞(CHC)和螺旋神经节神经元(SGN)损伤的作用及其与环磷腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/cAMP效应元件结合蛋白(CREB)通路的关系。方法分离新生C57BL/6小鼠的耳蜗基底膜,分为对照组(C组)、CI... 目的探究红景天苷(SAL)改善顺铂(CIS)引起的耳蜗毛细胞(CHC)和螺旋神经节神经元(SGN)损伤的作用及其与环磷腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/cAMP效应元件结合蛋白(CREB)通路的关系。方法分离新生C57BL/6小鼠的耳蜗基底膜,分为对照组(C组)、CIS组、SAL组、SAL+SQ22536(cAMP抑制剂)组和SAL+H-89(PKA抑制剂)组,每组20条。C组仅加入无血清BME培养液;CIS组在培养液中加入15μmol/L CIS;SAL组在CIS组基础上加入5μmol/L SAL;SAL+SQ22536组在CIS组基础上加入5μmol/L SAL和5μmol/L SQ22536;SAL+H-89组在CIS组基础上加入5μmol/L SAL和30μmol/L H-89。各组在培养箱中孵育48 h后,免疫荧光染色观察各组CHC和SGN损伤;试剂盒检测各组耳蜗基底膜中ROS和cAMP含量;Western blot检测各组PKA、p-CREB、CREB、Bcl-2、BDNF、NF-M蛋白水平。结果CIS组CHC排列混乱、体积肿大,SGN细胞核破碎、神经突缺失,SAL可减轻CHC和SGNs损伤。与C组相比,CIS组CHC、SGN数量较少(P<0.05),ROS、cAMP含量、PKA、BDNF、NF-M、Bcl-2蛋白及p-CREB/CREB水平较高(P<0.05);与CIS组相比,SAL组CHC、SGN数量较多(P<0.05),ROS含量较低(P<0.05),cAMP含量、PKA、BDNF、NF-M、Bcl-2蛋白及p-CREB/CREB水平较高(P<0.05)。SQ22536和H-89均可逆转SAL对CHC和SGN的保护作用。结论SAL可能通过激活cAMP/PKA/CREB通路,促进抗凋亡蛋白和神经保护因子表达,缓解CIS引起的CHC和SGN损伤。 展开更多
关键词 红景天苷 顺铂 毛细胞 螺旋神经节神经元 环磷腺苷/蛋白激酶A/cAMP效应元件结合蛋白通路
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胶质细胞来源的神经营养因子对螺旋神经节神经元耳毒性损伤的保护作用 被引量:2
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作者 朱雅颖 戴春富 +1 位作者 余洪猛 王正敏 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2006年第1期48-51,共4页
目的评价胶质细胞来源的神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对耳毒性药物损伤豚鼠螺旋神经节神经元(spiral ganglion neuron,SGN)的保护作用。方法单剂量联合应用卡那霉素(kanamycin,KM)和利尿酸(ethacryn... 目的评价胶质细胞来源的神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对耳毒性药物损伤豚鼠螺旋神经节神经元(spiral ganglion neuron,SGN)的保护作用。方法单剂量联合应用卡那霉素(kanamycin,KM)和利尿酸(ethacrynic acid,EA)致聋豚鼠,用药后21 d经微渗透压泵左耳鼓阶内连续灌注GDNF 26d,光镜下观察Corti器和SGN形态学变化,定量分析正常听力、用药后21 d、GDNF、GDNF组对侧耳和用药后47 d各组SGN细胞密度和细胞直径。结果系统性联合应用KM和EA可以导致耳蜗毛细胞严重和彻底的丢失,继发SGN进行性变性。GDNF组SGN形态与正常听力组比较无明显差别;细胞密度小于正常听力组,与用药后21 d组比较无显著性差异,大于GDNF组对侧耳和用药后47 d组;细胞直径比正常听力组小,但较其他组大。结论耳蜗内长期灌注GDNF对豚鼠耳毒性药物损伤后残余的SGN有保护作用,避免细胞进一步丢失,对损伤细胞可能有修复功能。 展开更多
关键词 胶质细胞来源的神经营养因子 螺旋神经节神经元 微渗透压泵 耳毒性药物
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应用穿孔全细胞膜片钳记录技术研究培养大鼠耳蜗螺旋神经节神经元的基本电生理特性 被引量:1
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作者 查定军 王智明 +3 位作者 薛涛 林颖 邱建华 李云庆 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期157-160,共4页
为了深入了解耳蜗螺旋神经节(SG)神经元的基本电生理特点,本研究首先成功培养了急性分离的大鼠SG神经元,然后采用穿孔全细胞膜片钳记录技术观察了培养SG神经元的基本电生理特性。结果表明,可从培养的SG神经元记录到动作电位,且不同的SG... 为了深入了解耳蜗螺旋神经节(SG)神经元的基本电生理特点,本研究首先成功培养了急性分离的大鼠SG神经元,然后采用穿孔全细胞膜片钳记录技术观察了培养SG神经元的基本电生理特性。结果表明,可从培养的SG神经元记录到动作电位,且不同的SG神经元具有异质性的放电特征。上述结果提示穿孔全细胞膜片钳记录技术可用于体外培养耳蜗SG神经元的电生理特征研究,为开展听觉信息传导和调控的功能研究开辟了新途径。 展开更多
关键词 螺旋神经节神经元 细胞培养 穿孔全细胞膜片钳记录 大鼠
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庆大霉素对小鼠螺旋神经节神经元电生理特性的影响 被引量:2
4
作者 邓嘉虹 梁传余 廖大清 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2004年第5期333-336,共4页
目的 探讨庆大霉素对小鼠耳蜗螺旋神经节神经元细胞电生理特性的影响及其意义。方法 应用全细胞电压钳技术研究庆大霉素对急性酶分离小鼠螺旋神经节神经元细胞膜上的钾、钠离子通道电流的峰值的影响 ,与细胞外液中庆大霉素浓度的关系 ... 目的 探讨庆大霉素对小鼠耳蜗螺旋神经节神经元细胞电生理特性的影响及其意义。方法 应用全细胞电压钳技术研究庆大霉素对急性酶分离小鼠螺旋神经节神经元细胞膜上的钾、钠离子通道电流的峰值的影响 ,与细胞外液中庆大霉素浓度的关系 ,以及庆大霉素洗脱后电流的恢复情况。结果 庆大霉素能抑制电压依赖性钾通道 ,但不能抑制电压依赖性钠通道 ,其钾通道抑制作用与细胞外液中庆大霉素的浓度呈剂量依赖性 ,庆大霉素洗脱后电流恢复不完全。 展开更多
关键词 膜片钳技术 螺旋神经节神经元 庆大霉素
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补肾活血化痰开窍方对耳鸣大鼠耳蜗螺旋神经节神经元5-HT1B、2C受体表达的影响 被引量:3
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作者 孙勤国 罗蒙 +6 位作者 江波 郭乃燕 张贤梅 徐鸿婕 牟艳杰 吕琨 杨倩 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期414-418,共5页
目的探讨补肾活血化痰开窍方对耳鸣大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(spiral ganglion neurons,SGN)中5羟色胺(serotonin,5-HT)1B、2C受体的表达及意义。方法 60只健康SPF级雄性大鼠随机分为正常组10只(生理盐水组),耳鸣模型组50只(采用水杨酸... 目的探讨补肾活血化痰开窍方对耳鸣大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(spiral ganglion neurons,SGN)中5羟色胺(serotonin,5-HT)1B、2C受体的表达及意义。方法 60只健康SPF级雄性大鼠随机分为正常组10只(生理盐水组),耳鸣模型组50只(采用水杨酸钠腹腔注射联合"饮水抑制"大鼠行为学实验方法建立大鼠耳鸣模型),耳鸣模型组造模成功后再分为水杨酸钠组10只、中药组30只(补肾活血化痰开窍方低、中、高剂量组各10只)、西药组(卡马西平组)10只,除水杨酸钠组给予生理盐水灌胃外,各组给予相应药物干预8周,造模成功后运用免疫组化法检测各组耳蜗SGN中5-HT1B、2C受体的表达。结果耳鸣造模成功并给予相应药物干预8周后,各组大鼠耳蜗SGN中均有5-HT1B、2C受体的表达,与生理盐水组相比,水杨酸钠组中5-HT1B表达减少,5-HT2C表达明显增多;与水杨酸钠组相比,中药各剂量组耳蜗SGN中5-HT1B表达增多,2C表达均明显降低。结论耳鸣大鼠耳蜗SGN中的5-HT1B受体表达减少、5-HT2C表达增加,应用补肾活血化痰开窍方后5-HT1B表达增多而5H2C表达降低,产生了拮抗作用,该方可能应用于耳鸣的治疗。 展开更多
关键词 补肾活血化痰开窍方 耳蜗螺旋神经节神经元 5羟色胺1B、2C受体 耳鸣
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桥尾蛋白磷酸化参与大鼠螺旋神经节神经元GABA_(A)受体内化
6
作者 林晓宇 韦芳玉 +6 位作者 覃江圆 叶莞丽 易健启 陈慧英 刘金兰 覃继新 苏纪平 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期192-196,共5页
目的探讨桥尾蛋白(gephyrin)丝氨酸S270位点磷酸化在水杨酸钠(sodium salicylate,SS)介导的GABA_(A)受体(GABA type A receptors,GABA_(A)Rs)内化的作用。方法将12只SD大鼠分成4组,分别为SS处理组、LiCl处理组、SS+LiCl处理组和对照组,... 目的探讨桥尾蛋白(gephyrin)丝氨酸S270位点磷酸化在水杨酸钠(sodium salicylate,SS)介导的GABA_(A)受体(GABA type A receptors,GABA_(A)Rs)内化的作用。方法将12只SD大鼠分成4组,分别为SS处理组、LiCl处理组、SS+LiCl处理组和对照组,每组3只,急性分离各组耳蜗螺旋神经节神经元(spiral ganglion neurons,SGNs),SGNs原代培养48 h后分别用5 mM SS、1 mM LiCl、5 mM SS联合1 mM LiCl处理1 h,对照组不予处理;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测GABA_(A)Rsα2亚基、桥尾蛋白基因表达的改变;采用Western blot技术检测各组GABA_(A)Rsα2膜蛋白和总蛋白表达的改变、桥尾蛋白及其S270位点磷酸化的改变。结果RT-qPCR结果显示,各组GABA_(A)Rsα2亚基mRNA、桥尾蛋白mRNA与对照组比较均无明显变化(P>0.05),Western blot结果显示,SS处理组GABA_(A)Rsα2亚基膜蛋白(0.08±0.02)较对照组(0.18±0.04)表达显著下调(P<0.01),LiCl处理组(0.14±0.03)有效逆转SS诱导的GABA_(A)Rsα2亚基膜蛋白下调(SS组为0.08±0.02)(P<0.05),LiCL组膜蛋白、各组总蛋白与对照组比较无明显变化(P>0.05);SS处理组桥尾蛋白S270磷酸化(0.84±0.02)较对照组(0.35±0.14)显著增强(P<0.001)。LiCl处理组(0.66±0.10)有效逆转SS诱导的桥尾蛋白S270磷酸化增强(SS组为0.84±0.02,P<0.05),LiCl处理组桥尾蛋白磷酸化、各处理组桥尾蛋白与对照组比较无明显变化。结论桥尾蛋白S270位点磷酸化可增强参与SS诱导的SGNs GABA_(A)Rs内化。 展开更多
关键词 桥尾蛋白 磷酸化 GABA_(A)受体 内化 螺旋神经节神经元
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α2-肾上腺素能受体在水杨酸钠诱导大鼠耳蜗螺旋神经节神经元兴奋毒性中的表达变化
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作者 易健启 林晓宇 +6 位作者 刘金兰 陈慧英 祝小婷 叶莞丽 黄佳琳 李睿琳 苏纪平 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期148-153,共6页
目的 观察α2-肾上腺素能受体(α2-adrenergic receptor, α2-AR)在大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(spiral ganglion neuron, SGN)中的分布,以及水杨酸钠(sodium salicylate, SS)作用SGN不同时间点后α2-AR各亚型的表达改变,以探讨其在SGN兴... 目的 观察α2-肾上腺素能受体(α2-adrenergic receptor, α2-AR)在大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(spiral ganglion neuron, SGN)中的分布,以及水杨酸钠(sodium salicylate, SS)作用SGN不同时间点后α2-AR各亚型的表达改变,以探讨其在SGN兴奋毒性中的作用。方法 将新生SD大鼠随机分成:对照组、SS处理6 h组、SS处理12 h组和SS处理24 h组,每组2只。急性分离各组SGN后进行原代培养48 h,对照组用新的培养基培养,不做处理,余三组分别用5 mM水杨酸钠处理6 h、12 h、24 h,用免疫荧光染色技术检测SGN中α2-AR各亚型的表达情况;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot方法检测SS作用不同时间后α2-AR各亚型的mRNA和总蛋白表达改变情况。结果 (1)免疫荧光染色表明SGN上存在α2A-AR、α2B-AR、α2C-AR三种亚型的表达;(2)RT-qPCR结果显示在SGN中α2-AR各亚型mRNA相对表达量α2A-AR>α2B-AR(P<0.01),α2A-AR>α2C-AR(P<0.01),α2B-AR和α2C-AR之间差异无统计学意义;与对照组相比,5 mM SS作用SGN 6 h、12 h、24 h后α2A-AR表达量均明显增高(P<0.05);SS作用12 h后α2C-AR表达量开始增高(P<0.05),而α2B-AR呈升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);(3)Western blot结果显示SGN中α2-AR各亚型蛋白表达量α2A-AR>α2B-AR(P<0.01),α2A-AR>α2C-AR(P<0.05),α2B-AR和α2C-AR之间差异无统计学意义,与mRNA表达一致。与对照组相比,5 mM SS作用SGN 12 h后α2A-AR总蛋白开始下降(P<0.05),作用24 h后α2C-AR总蛋白下降(P<0.05),α2B-AR总蛋白不变。结论 α2-AR三种亚型在SGN中均有表达,其中α2A-AR、α2C-AR可能介导了SS诱导的SGN兴奋毒性且α2A-AR比α2C-AR反应更快速。 展开更多
关键词 Α2肾上腺素能受体 亚型 水杨酸钠 螺旋神经节神经元 兴奋毒性
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AMPA受体在新生大鼠耳蜗螺旋神经节神经元兴奋毒性中的表达
8
作者 叶文华 陈慧英 +5 位作者 韦芳玉 林晓宇 刘金兰 易健启 叶莞丽 苏纪平 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期413-418,共6页
目的观察水杨酸钠(sodium salicylate, SS)作用新生SD大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(spiral ganglion neuron, SGN)后,SGN中α-氨-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic acid receptors, AMPAR... 目的观察水杨酸钠(sodium salicylate, SS)作用新生SD大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(spiral ganglion neuron, SGN)后,SGN中α-氨-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic acid receptors, AMPAR)在分子水平的表达改变。方法实验动物为10只新生3天的SD大鼠,分为免疫荧光染色组、正常对照组、水杨酸钠组、AMPAR激动剂组及AMPAR拮抗剂组,每组2只大鼠;采用免疫荧光染色技术检测各组大鼠SGN中AMPA受体GluA2的表达;采用FQ-PCR技术检测SGN和大脑皮层神经元中AMPAR各亚单位mRNA的表达;采用Western Blot技术检测SGN中GluA2的蛋白表达。结果免疫荧光染色显示,新生SD大鼠SGN胞体和轴突上均有AMPA受体GluA2的表达。FQ-PCR发现,①SGN及大脑皮层神经元中均有AMPAR亚单位GluA1、GluA2、GluA3和GluA4的表达(简称A1、A2、A3、A4),其中SGN中AMPAR各亚单位之间表达量呈A3>A2,A3>A4,A2和A4>A1。在大脑皮层神经元中,AMPAR各亚单位之间表达量呈A2>A3>A1>A4。②0.5 mM SS作用SGN后与正常对照组比较,只有A2在30 min时表达量明显降低(P<0.05)。③5 mM SS作用SGN后与正常对照组比较,A1~A4在30 min时表达量均降低(P<0.05);A2和A3表达量在1、3 h时降低(P<0.05);A2、A3和A4表达量在6 h时均降低(P<0.05)。Western Blot结果显示,5 mM SS作用SGN 30 min后与正常对照组比较,A2的膜蛋白表达量显著降低(P<0.05),总蛋白表达量变化无统计学差异(P>0.05)。结论①新生SD大鼠SGN及大脑皮层神经元中均有AMPAR表达,AMPAR各亚基在SGN及大脑皮层神经元中表达量高低变化呈不同规律。②水杨酸钠致SGN兴奋毒性中,与正常对照组比较,AMPAR的A2、A3和A4 mRNA表达量均显著降低,A2膜蛋白表达量亦明显下降;推测在水杨酸钠致SGN兴奋毒性中,水杨酸钠能促进A2膜蛋白表达量下调,促进AMPAR发生内化。 展开更多
关键词 新生大鼠 水杨酸钠 耳蜗螺旋神经节神经元 兴奋毒性 α-氨-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体
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速尿对小鼠螺旋神经节神经元细胞钾、钠通道电流的影响
9
作者 邓嘉虹 杨黎 +1 位作者 姜鹤群 蔡春春 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期260-263,共4页
目的探讨速尿对小鼠耳蜗螺旋神经节(spiral ganglion neuron,SGN)细胞延迟整流钾通道和钠通道电流的影响。方法分离并酶解生后1~6d的15只小鼠耳蜗SGN细胞,利用全细胞膜片钳技术记录外向延迟整流钾通道和内向钠通道,并观察速尿对钾、钠... 目的探讨速尿对小鼠耳蜗螺旋神经节(spiral ganglion neuron,SGN)细胞延迟整流钾通道和钠通道电流的影响。方法分离并酶解生后1~6d的15只小鼠耳蜗SGN细胞,利用全细胞膜片钳技术记录外向延迟整流钾通道和内向钠通道,并观察速尿对钾、钠离子通道的影响。结果在SGN细胞外加入速尿以后,延迟整流钾电流可被阻滞到+200~+300pA左右,钠电流可被阻滞到速尿作用前峰电流幅值的30%左右。在速尿作用稳定后的1、5、10min时开始洗脱速尿,延迟整流钾电流和钠电流分别可以恢复到速尿作用前峰电流幅值的98%、64%、25%和96%、76%和54%。结论速尿可在不同程度上阻滞SGN细胞的延迟整流钾通道和钠通道,并随着速尿作用时间的延长,其对离子通道的损害越大。 展开更多
关键词 螺旋神经节神经元 速尿 延迟整流钾通道 钠通道
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应用膜片钳技术对螺旋神经元放电类型的初步研究 被引量:2
10
作者 唐玥玓 Davis Robin 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2002年第4期250-252,共3页
目的 研究原代培养新生鼠螺旋神经元的放电类型。方法 应用膜片钳技术全细胞构型从原代培养的螺旋神经元获得电流钳记录。结果 从螺旋神经元记录到动作电位 ,螺旋神经元具有不一致的放电特征。结论 螺旋神经元具有快适应和慢适应两... 目的 研究原代培养新生鼠螺旋神经元的放电类型。方法 应用膜片钳技术全细胞构型从原代培养的螺旋神经元获得电流钳记录。结果 从螺旋神经元记录到动作电位 ,螺旋神经元具有不一致的放电特征。结论 螺旋神经元具有快适应和慢适应两种放电特征 ,多数神经元为快适应神经元。 展开更多
关键词 放电类型 螺旋神经节神经元 原代培养 膜片钳技术 听觉 快适应 慢适应
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氨基糖苷类抗生素对耳蜗螺旋神经节的损害作用 被引量:8
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作者 高可雷 丁大连 +2 位作者 李鹏 孙虹 Richard Salvi 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第1期37-42,共6页
氨基糖苷类药物(Am An)是一类经典的治疗革兰阴性菌感染的抗生素,但具有耳毒性和肾毒性。以往的研究认为Am An的耳毒性仅仅针对内耳毛细胞并可引起继发的延迟性螺旋神经节细胞(SGNs)死亡。但是随着关于Am An耳毒性和对耳蜗其他细胞的研... 氨基糖苷类药物(Am An)是一类经典的治疗革兰阴性菌感染的抗生素,但具有耳毒性和肾毒性。以往的研究认为Am An的耳毒性仅仅针对内耳毛细胞并可引起继发的延迟性螺旋神经节细胞(SGNs)死亡。但是随着关于Am An耳毒性和对耳蜗其他细胞的研究进展,人们逐渐意识到耳蜗内支持细胞的损害也是引起SGNs延迟死亡的重要原因之一。我们发现,不同的Am An对内耳的损害方式不同,以硫酸链霉素为代表的少数Am An可以不受血-迷路屏障阻碍直接进入内耳并首先损害内耳的周边神经元;而以往认为只能间接损害SGNs的其他那些难以跨越血-迷路屏障的Am An,比如卡那霉素,对出生后三天大鼠处于发育阶段的SGNs也具有直接的损害作用。因此我们提出一个根据不同内耳损害方式来区分Am An的分类建议,并希望本文介绍的新内容能够为更深入理解不同种类Am An的不同耳毒性机制以及听觉系统各个重要组织成分之间的相互作用关系提供新的参考信息。 展开更多
关键词 氨基糖苷类抗生素 耳毒性 螺旋神经节神经元 硫酸链霉素 卡那霉素
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NLRP3炎症小体激活对水杨酸钠诱导大鼠耳蜗螺旋神经节细胞损伤的作用 被引量:2
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作者 翟思佳 尹时华 +4 位作者 侯涛 任毅 廖行伟 黄巧 李念燊 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期327-333,共7页
目的通过研究NLRP3炎症小体在大鼠耳蜗中的激活,探讨水杨酸钠诱导螺旋神经节神经元(SGN)损伤的关键分子机制。方法64只SD大鼠随机分为4组对照组(腹腔注射等量生理盐水)、人工外淋巴液(artifieial perilymph fluid,APL)组(左耳圆窗注入AP... 目的通过研究NLRP3炎症小体在大鼠耳蜗中的激活,探讨水杨酸钠诱导螺旋神经节神经元(SGN)损伤的关键分子机制。方法64只SD大鼠随机分为4组对照组(腹腔注射等量生理盐水)、人工外淋巴液(artifieial perilymph fluid,APL)组(左耳圆窗注入APL后,腹腔注射生理盐水)、水杨酸钠(sodium salicylate,SS)组(左耳经圆窗注入APL后,腹腔注射10%水杨酸钠)、水杨酸钠+NLRP3拮抗剂(SS+MCC950)组(左耳圆窗注入溶于APL的NLRP3抑制剂MCC950后,腹腔注射水杨酸钠),每组16只;各组连续用药7 d。通过听性脑干反应(ABR)、畸变产物耳声发射(DPOAE)检测动物造模前后的听觉损害程度;HE染色观察耳蜗SGN的病理生理改变;采用实时荧光定量PCR对各组大鼠耳蜗组织中炎症复合体相关及炎性相关因子的表达水平进行检测;最后采用免疫组化方法评估水杨酸钠诱导耳蜗炎症复合体及相关炎性因子的蛋白表达水平及其在耳蜗中的定位。结果造模后SS组大鼠ABR反应阈明显升高,DPDAE幅值下降,造模成功;造模后SS组的SGN中形态异常细胞计数(39.33±8.618个)明显高于对照组(16.83±6.555个)、APL组(13.83±3.312个)和SS+MCC950组(23±6.573个)(P<0.001),可见SS+MCC950组SGN损伤较SS组明显减轻(P<0.01)。PCR检测结果示SS组SGN区域中的NLRP3、IL-1β和caspase-1的转录水平(ΔCT值分别为5.41±0.622、4.035±0.26、5.831±0.059)较对照组(分别为7.438±0.483、6.811±0.05、8.547±0.157)、APL组(分别为7.254±0.848、6.76±0.401、8.363±0.375)显著增加,而SS+MCC950组(分别为6.378±0.479、5.602±0.157、7.271±0.296)经过NLRP3阻滞剂预处理明显减弱了这一作用,其中ΔCT值越大,转录水平越低。免疫组化检测示对照组NLRP3、IL-1β和Caspase-1的蛋白表达分别为0.117±0.003、0.132±0.028、0.127±0.021,APL组分别为0.114±0.009、0.137±0.024、0.137±0.011,SS组分别为0.192±0.043、0.215±0.026、0.205±0.009,SS+MCC950组分别为0.136±0.015、0.176±0.007、0.166±0.004,SS组表达水平高于其他三组(均为P<0.05)。结论水杨酸钠可能通过NLRP3介导上调caspase-1和IL-1β,加剧耳蜗内炎症反应,导致耳蜗内重要结构SGN的损伤。 展开更多
关键词 水杨酸钠 螺旋神经节神经元 NLRP3炎症小体 半胱胺酸天冬氨酸蛋白酶-1 白介素-1Β
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单细胞测序发现内毛细胞活动诱导Ⅰ型螺旋神经节分为三型
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作者 林珊珊(摘译) 汪琪璇(摘译) +3 位作者 黄治物(审校) Shrestha BR Chia C Wu L 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期685-688,共4页
采用单细胞RNA测序的方法,Shrestha及其同事发现(图1):①内耳I型螺旋神经节神经元可分为三种亚型;②各个亚型之间以及频率响应轴不同区域的分子表达存在显著差异;③各个亚型的分化从出生后开始,依赖正常内毛细胞活动的诱导。神经系统具... 采用单细胞RNA测序的方法,Shrestha及其同事发现(图1):①内耳I型螺旋神经节神经元可分为三种亚型;②各个亚型之间以及频率响应轴不同区域的分子表达存在显著差异;③各个亚型的分化从出生后开始,依赖正常内毛细胞活动的诱导。神经系统具有异质性的特征,通常可根据神经元的位置、功能和形态等来区分不同类型的神经元,它们构成特定功能的神经信号网络。在听觉神经系统中,I型螺旋神经节神经元(spiral ganglion neurons,SGNs)是与内毛细胞(inner hair cells,IHCs)相连的双极细胞,具有声音编码能力,能够将复杂的声学信息传递到听觉脑干。 展开更多
关键词 螺旋神经节神经元 细胞活动 测序 单细胞 听觉神经系统 三型 细胞RNA cells
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