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降解莠去津和乙草胺的原生质体融合菌株RH-92的构建及其培养条件优化
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作者 刘悦 翟乾行 +2 位作者 刘雪微 吴宪 张浩 《农药学学报》 北大核心 2025年第3期424-434,共11页
本研究通过对亲本菌株原生质体制备条件优化,获得了一株可同时降解除草剂莠去津和乙草胺的融合菌株,该融合菌株可缓解莠去津和乙草胺对大豆种子的生理毒性。采用单因素筛选及响应面试验优化原生质体制备工艺;通过原生质体融合方法构建... 本研究通过对亲本菌株原生质体制备条件优化,获得了一株可同时降解除草剂莠去津和乙草胺的融合菌株,该融合菌株可缓解莠去津和乙草胺对大豆种子的生理毒性。采用单因素筛选及响应面试验优化原生质体制备工艺;通过原生质体融合方法构建可同时降解莠去津和乙草胺的融合菌株;通过高效液相色谱(HPLC)筛选并测定融合菌的降解能力;通过紫外分光法测定融合菌的最适生长条件;通过16S rDNA对融合菌株进行鉴定;通过大豆种子萌发试验测定融合菌株对莠去津和乙草胺同时胁迫的影响。结果表明:菌株FH-1在溶菌酶质量浓度1.50 mg/mL、酶解时间39.15 min、酶解温度41.49℃条件下原生质体制备效果最佳;菌株LY-4在溶菌酶质量浓度1.487 mg/mL、酶解时间40.70 min、酶解温度36.36℃条件下原生质体制备效果最佳。利用原生质体融合技术构建出多株可同时降解莠去津和乙草胺的融合菌株,其中菌株RH-92具有良好降解性能,对10 mg/L乙草胺和10 mg/L莠去津的降解率分别达到61.75%和56.18%。16S rDNA系统发育树鉴定结果表明,菌株RH-92为准克雷伯氏菌(Klebsiella quasivariicola),在基础盐培养基中的最佳生长条件为pH 9.0、温度32℃。在生物修复试验中,在莠去津和乙草胺同时胁迫条件下,大豆种子的发芽状态受到显著抑制,当添加RH-92菌悬液后大豆种子萌芽率和发芽长度分别提升了25%和25%。表明融合菌株RH-92在修复莠去津和乙草胺共存污染中具有较好应用潜力。 展开更多
关键词 莠去津 乙草胺 原生质体制备 响应面分析法 融合菌株rh-92 生物修复
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