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乙型肝炎病毒preS1与肿瘤坏死因子融合肽基因的克隆和表达
1
作者
陈波
卢芳
+2 位作者
药立波
苏成芝
陈常庆
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
1999年第3期184-187,共4页
为提高hTNFα和HBVpreS1(1～65)肽融合蛋白在大肠杆菌中的表达率,以及研究hTNFα和preS1(1～65)肽之间的联接肽段对hTNFα的影响,并引进蛋白酶切位点以利于融合蛋白中酶切制备preS1(1～65)肽,本文构建了5种含有两类不同基因接头和preS1...
为提高hTNFα和HBVpreS1(1～65)肽融合蛋白在大肠杆菌中的表达率,以及研究hTNFα和preS1(1～65)肽之间的联接肽段对hTNFα的影响,并引进蛋白酶切位点以利于融合蛋白中酶切制备preS1(1～65)肽,本文构建了5种含有两类不同基因接头和preS15′端经改造的hTNFα和HBVpreS1(1～65)肽的融合基因。然后分别将其插入表达载体pSB92中,并获得表达。SDSPAGE显示,不同结构的融合基因的表达水平不同,表达水平最高的pTPS5表达量达菌体总蛋白的60%。该表达产物经Westernblot验证,能分别特异地与抗hTNFα抗体与抗preS1抗体结合。稀释复性后,该融合蛋白还具有hTNFα的生理功能(对L929细胞的细胞毒活性),为一具有双功能活性的新的融合蛋白。经DNA序列测定表明,preS1(165)肽基因正确地融合在hTNFα基因之后。
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关键词
乙型肝炎病毒
PRES1
肿瘤坏死因子
融合肽基因
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题名
乙型肝炎病毒preS1与肿瘤坏死因子融合肽基因的克隆和表达
1
作者
陈波
卢芳
药立波
苏成芝
陈常庆
机构
中科院上海生物工程研究中心
第四军医大学生化教研室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
1999年第3期184-187,共4页
文摘
为提高hTNFα和HBVpreS1(1～65)肽融合蛋白在大肠杆菌中的表达率,以及研究hTNFα和preS1(1～65)肽之间的联接肽段对hTNFα的影响,并引进蛋白酶切位点以利于融合蛋白中酶切制备preS1(1～65)肽,本文构建了5种含有两类不同基因接头和preS15′端经改造的hTNFα和HBVpreS1(1～65)肽的融合基因。然后分别将其插入表达载体pSB92中,并获得表达。SDSPAGE显示,不同结构的融合基因的表达水平不同,表达水平最高的pTPS5表达量达菌体总蛋白的60%。该表达产物经Westernblot验证,能分别特异地与抗hTNFα抗体与抗preS1抗体结合。稀释复性后,该融合蛋白还具有hTNFα的生理功能(对L929细胞的细胞毒活性),为一具有双功能活性的新的融合蛋白。经DNA序列测定表明,preS1(165)肽基因正确地融合在hTNFα基因之后。
关键词
乙型肝炎病毒
PRES1
肿瘤坏死因子
融合肽基因
Keywords
HBV preS1( 1～ 65 )peptide hTNFαfusedprotein expression
分类号
Q784 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
乙型肝炎病毒preS1与肿瘤坏死因子融合肽基因的克隆和表达
陈波
卢芳
药立波
苏成芝
陈常庆
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
1999
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