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谷胱甘肽转硫酶-血小板因子4融合蛋白表达载体的构建、鉴定与表达
1
作者
陈衍
杨岚
+4 位作者
纪宗玲
朱帮福
田琼
张晓楠
陈苏民
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第2期131-133,共3页
目的 构建谷胱甘肽转硫酶-血小板因子4 (GST-PF4)融合蛋白表达载体,并研究其编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达。方法通过RT-PCR方法,从HL-60细胞中克隆PF4 cDNA,然后克隆至载体pUC19中,序列...
目的 构建谷胱甘肽转硫酶-血小板因子4 (GST-PF4)融合蛋白表达载体,并研究其编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达。方法通过RT-PCR方法,从HL-60细胞中克隆PF4 cDNA,然后克隆至载体pUC19中,序列测定后把PF4基因重组入谷胱甘肽转硫酶融合基因表达载体pGEX-4T-3中,并用IPTG诱导其在大肠杆菌中表达。结果获得了PF4 cDNA。序列分析表明,该序列与GenBank数据库中的序列一致。重组质粒酶切鉴定表明,PF4基因已正确插入到pGEX-4T-3中。重组融合蛋白表达载体GST-PF4经IPTG诱导表达,在SDS-PAGE后得到1条蛋白表达带,相对分子质量(Mr)约为36 000。结论成功地构建融合蛋白表达载体GST-PF4,并在大肠杆菌中获得有效表达,为进一步研究打下良好的基础。
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关键词
血小板因子4
融合基因载体
基因
表达
谷胱甘肽转硫酶
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职称材料
2个水稻PLT基因启动子的克隆及其表达分析
被引量:
1
2
作者
张晨
王利凯
+3 位作者
包亮
龙湍
陈春丽
须健
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期147-151,共5页
为研究水稻中PLT基因的表达及功能,利用同源序列分析,在水稻基因数据库中检索到2个与拟南芥PLT基因高度同源的基因序列,命名为OsPLT7和OsPLT11。根据进一步预测的PLT启动子序列设计引物,以水稻品种中花11的基因组DNA为模板,用PCR方法扩...
为研究水稻中PLT基因的表达及功能,利用同源序列分析,在水稻基因数据库中检索到2个与拟南芥PLT基因高度同源的基因序列,命名为OsPLT7和OsPLT11。根据进一步预测的PLT启动子序列设计引物,以水稻品种中花11的基因组DNA为模板,用PCR方法扩增得到PLT7、PLT11的启动子片段,克隆至含有报告基因的表达载体上并转化水稻。通过GUS染色观察T1代转基因阳性植株,发现OsPLT7和OsPLT11在水稻根部干细胞小生境和中柱部位表达,表达模式类似于其同源基因在拟南芥中的表达谱。
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关键词
水稻
拟南芥
干细胞
PLT
启动子报告
基因
融合
载体
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职称材料
题名
谷胱甘肽转硫酶-血小板因子4融合蛋白表达载体的构建、鉴定与表达
1
作者
陈衍
杨岚
纪宗玲
朱帮福
田琼
张晓楠
陈苏民
机构
第四军医大学西京医院血液科
第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室
第四军医大学教学实验中心
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第2期131-133,共3页
文摘
目的 构建谷胱甘肽转硫酶-血小板因子4 (GST-PF4)融合蛋白表达载体,并研究其编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达。方法通过RT-PCR方法,从HL-60细胞中克隆PF4 cDNA,然后克隆至载体pUC19中,序列测定后把PF4基因重组入谷胱甘肽转硫酶融合基因表达载体pGEX-4T-3中,并用IPTG诱导其在大肠杆菌中表达。结果获得了PF4 cDNA。序列分析表明,该序列与GenBank数据库中的序列一致。重组质粒酶切鉴定表明,PF4基因已正确插入到pGEX-4T-3中。重组融合蛋白表达载体GST-PF4经IPTG诱导表达,在SDS-PAGE后得到1条蛋白表达带,相对分子质量(Mr)约为36 000。结论成功地构建融合蛋白表达载体GST-PF4,并在大肠杆菌中获得有效表达,为进一步研究打下良好的基础。
关键词
血小板因子4
融合基因载体
基因
表达
谷胱甘肽转硫酶
Keywords
platelet factor 4
fusion gene vector
expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
2个水稻PLT基因启动子的克隆及其表达分析
被引量:
1
2
作者
张晨
王利凯
包亮
龙湍
陈春丽
须健
机构
华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室
华中农业大学生命科学技术学院
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期147-151,共5页
基金
国家基础科学与人才培养基金项目(J0730649)
文摘
为研究水稻中PLT基因的表达及功能,利用同源序列分析,在水稻基因数据库中检索到2个与拟南芥PLT基因高度同源的基因序列,命名为OsPLT7和OsPLT11。根据进一步预测的PLT启动子序列设计引物,以水稻品种中花11的基因组DNA为模板,用PCR方法扩增得到PLT7、PLT11的启动子片段,克隆至含有报告基因的表达载体上并转化水稻。通过GUS染色观察T1代转基因阳性植株,发现OsPLT7和OsPLT11在水稻根部干细胞小生境和中柱部位表达,表达模式类似于其同源基因在拟南芥中的表达谱。
关键词
水稻
拟南芥
干细胞
PLT
启动子报告
基因
融合
载体
Keywords
rice
Arabidopsis
stem cell
PLT
promoter reporter gene fusion vector
分类号
S511.503 [农业科学—作物学]
Q343.12 [生物学—遗传学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
谷胱甘肽转硫酶-血小板因子4融合蛋白表达载体的构建、鉴定与表达
陈衍
杨岚
纪宗玲
朱帮福
田琼
张晓楠
陈苏民
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
2个水稻PLT基因启动子的克隆及其表达分析
张晨
王利凯
包亮
龙湍
陈春丽
须健
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
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职称材料
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