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谷胱甘肽转硫酶-血小板因子4融合蛋白表达载体的构建、鉴定与表达
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作者 陈衍 杨岚 +4 位作者 纪宗玲 朱帮福 田琼 张晓楠 陈苏民 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期131-133,共3页
目的  构建谷胱甘肽转硫酶-血小板因子4 (GST-PF4)融合蛋白表达载体,并研究其编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达。方法通过RT-PCR方法,从HL-60细胞中克隆PF4 cDNA,然后克隆至载体pUC19中,序列... 目的  构建谷胱甘肽转硫酶-血小板因子4 (GST-PF4)融合蛋白表达载体,并研究其编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达。方法通过RT-PCR方法,从HL-60细胞中克隆PF4 cDNA,然后克隆至载体pUC19中,序列测定后把PF4基因重组入谷胱甘肽转硫酶融合基因表达载体pGEX-4T-3中,并用IPTG诱导其在大肠杆菌中表达。结果获得了PF4 cDNA。序列分析表明,该序列与GenBank数据库中的序列一致。重组质粒酶切鉴定表明,PF4基因已正确插入到pGEX-4T-3中。重组融合蛋白表达载体GST-PF4经IPTG诱导表达,在SDS-PAGE后得到1条蛋白表达带,相对分子质量(Mr)约为36 000。结论成功地构建融合蛋白表达载体GST-PF4,并在大肠杆菌中获得有效表达,为进一步研究打下良好的基础。 展开更多
关键词 血小板因子4 融合基因载体 基因表达 谷胱甘肽转硫酶
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2个水稻PLT基因启动子的克隆及其表达分析 被引量:1
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作者 张晨 王利凯 +3 位作者 包亮 龙湍 陈春丽 须健 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期147-151,共5页
为研究水稻中PLT基因的表达及功能,利用同源序列分析,在水稻基因数据库中检索到2个与拟南芥PLT基因高度同源的基因序列,命名为OsPLT7和OsPLT11。根据进一步预测的PLT启动子序列设计引物,以水稻品种中花11的基因组DNA为模板,用PCR方法扩... 为研究水稻中PLT基因的表达及功能,利用同源序列分析,在水稻基因数据库中检索到2个与拟南芥PLT基因高度同源的基因序列,命名为OsPLT7和OsPLT11。根据进一步预测的PLT启动子序列设计引物,以水稻品种中花11的基因组DNA为模板,用PCR方法扩增得到PLT7、PLT11的启动子片段,克隆至含有报告基因的表达载体上并转化水稻。通过GUS染色观察T1代转基因阳性植株,发现OsPLT7和OsPLT11在水稻根部干细胞小生境和中柱部位表达,表达模式类似于其同源基因在拟南芥中的表达谱。 展开更多
关键词 水稻 拟南芥 干细胞 PLT 启动子报告基因融合载体
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