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新疆中哈边境地区分离到远东型和西伯利亚型蜱传脑炎病毒 被引量:9
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作者 张桂林 孙响 +3 位作者 刘然 郑重 刘晓明 伊小平 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期312-315,共4页
目的研究新疆中哈边境阿拉套山夏尔西里自然保护区蜱传脑炎疫源地病原的基因型及生物学特征。方法采用布旗法采集蜱,活蜱保存或液氮冻存;采用BALB/c小鼠与BHK-21细胞进行蜱传脑炎病毒分离培养;采用RT-PCR扩增蜱传脑炎病毒远东型FE和西... 目的研究新疆中哈边境阿拉套山夏尔西里自然保护区蜱传脑炎疫源地病原的基因型及生物学特征。方法采用布旗法采集蜱,活蜱保存或液氮冻存;采用BALB/c小鼠与BHK-21细胞进行蜱传脑炎病毒分离培养;采用RT-PCR扩增蜱传脑炎病毒远东型FE和西伯利亚型S特异基因片段并测定其序列。结果从新疆中哈边境阿拉套山夏尔西里自然保护区全沟硬蜱和森林革蜱中分离出16株蜱传脑炎病毒株,通过对扩增基因序列比对分析,明确其中13株为远东型,3株为西伯利亚型。结论从新疆中哈边境阿拉套山夏尔西里自然保护区分离到远东型和西伯利亚型蜱传脑炎病毒,该地区为两种亚型病毒共存的蜱传脑炎自然疫源地。 展开更多
关键词 蜱传脑炎病毒 远东型 西伯利亚型 疫源地 中哈边境
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蜱传脑炎病毒E基因的重组质粒构建及其在原核细胞的表达 被引量:5
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作者 邵宾 陈斌 +2 位作者 谢菲 王林 黄会岭 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期87-91,共5页
通过表达蜱传脑炎病毒E蛋白,为制备蜱传脑炎快速检测试纸条的奠定基础。根据GenBank数据库中已发表的蜱传脑炎病毒的基因序列,检索并合成蜱传脑炎病毒目的基因E,设计引物,PCR扩增,克隆至原核表达载体pET-30a(+)构建重组质粒,在BL21细菌... 通过表达蜱传脑炎病毒E蛋白,为制备蜱传脑炎快速检测试纸条的奠定基础。根据GenBank数据库中已发表的蜱传脑炎病毒的基因序列,检索并合成蜱传脑炎病毒目的基因E,设计引物,PCR扩增,克隆至原核表达载体pET-30a(+)构建重组质粒,在BL21细菌内表达蜱传脑炎病毒E蛋白。结果表明:经过PCR试验和双酶切试验鉴定,克隆测序正确,通过重组质粒,成功地表达出蜱传脑炎病毒E蛋白。 展开更多
关键词 蜱传脑炎病毒 重组质粒 E蛋白 原核表达
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蜱传脑炎病毒感染小鼠脑组织单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、CD68和核因子κB(NF-κB)表达增加 被引量:5
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作者 王倩云 彭晖 +1 位作者 郑振华 芦宝静 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期9-13,共5页
目的探讨蜱传脑炎病毒(TBEV)感染小鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、CD68和核因子κB(NF-κB)表达情况。方法1周龄BALB/c小鼠8只,随机分为对照组和感染组,分别进行PBS或TBEV颅内注射。感染8 d后处死取一半脑组织固定,HE染色检测脑组织病理... 目的探讨蜱传脑炎病毒(TBEV)感染小鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、CD68和核因子κB(NF-κB)表达情况。方法1周龄BALB/c小鼠8只,随机分为对照组和感染组,分别进行PBS或TBEV颅内注射。感染8 d后处死取一半脑组织固定,HE染色检测脑组织病理改变;免疫组织化学染色法检测小鼠大脑MCP-1、NF-κB和CD68的表达,镜下观察并统计阳性细胞数量;免疫荧光化学染色法结合激光扫描共聚焦显微镜观察MCP-1和CD68的共表达情况。结果与对照组相比,TBEV感染后小鼠脑组织MCP-1、NF-κB和CD68阳性细胞数均显著增加,MCP-1在CD68阳性及非阳性细胞中均有表达。结论TBEV感染小鼠CD68、NF-κB、MCP-1表达增强。 展开更多
关键词 蜱传脑炎病毒(TBEV) 单核细胞趋化蛋白1(MCP-1) 核转录因子κB(NF-κB) CD68
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蜱传脑炎病毒作模型、黄病毒囊膜蛋白E抗原的分子结构
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作者 Mandl C.W. 丁天兵 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第4期65-67,共3页
蜱传脑炎(TBE)病毒是一种主要人类致病性黄病毒,在其结构蛋白中囊膜蛋白E具有重要的生物学活性,可诱导保护性免疫懂答,可使病毒结合到细胞受体上。因此,蛋白E的结构和功能就成了正确理解黄病毒生物学活性及病毒一细胞相互作用机制... 蜱传脑炎(TBE)病毒是一种主要人类致病性黄病毒,在其结构蛋白中囊膜蛋白E具有重要的生物学活性,可诱导保护性免疫懂答,可使病毒结合到细胞受体上。因此,蛋白E的结构和功能就成了正确理解黄病毒生物学活性及病毒一细胞相互作用机制的中心环节。 展开更多
关键词 囊膜蛋白 蜱传脑炎病毒 病毒 分子结构 E抗原 生物学活性 模型 保护性免疫 结构和功能 结构蛋白 细胞受体 作用机制 致病性
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蜱传脑炎概况及其防治研究进展 被引量:1
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作者 张芳 王小恒 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期346-351,共6页
蜱传脑炎病毒(Tick-borne encephalitis virus,TBEV)是引起中枢神经系统疾病——蜱传脑炎(Tick-borne encephalitis,TBE)的病原体,可在人与动物中引起致死性脑炎并伴有长期的后遗症,严重影响人类健康与公共卫生安全。近年来随着气候变... 蜱传脑炎病毒(Tick-borne encephalitis virus,TBEV)是引起中枢神经系统疾病——蜱传脑炎(Tick-borne encephalitis,TBE)的病原体,可在人与动物中引起致死性脑炎并伴有长期的后遗症,严重影响人类健康与公共卫生安全。近年来随着气候变化以及人类对自然资源的开发,蜱传脑炎发病率不断升高,但目前尚无有效的治疗药物,靶向抗病毒药物的研发是治疗病毒感染的主要方向之一。蜱传脑炎的预防主要集中在减少传播媒介蜱的叮咬上。本文对蜱传脑炎病毒的病原学特征、临床特征、检测诊断方法以及防治措施进行综述,以期为相关研究提供参考。 展开更多
关键词 蜱传脑炎病毒 病原学 防治
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蜱传森林脑炎病毒非结构蛋白1原核表达载体的构建 被引量:1
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作者 宋天一 李菁华 +2 位作者 张哲 史红艳 孙延波 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期620-624,共5页
目的:构建蜱传森林脑炎病毒(TBEV)非结构蛋白1(NS1)的原核表达载体,以期获得其高纯度的表达,为制备多克隆抗体及其功能的研究奠定实验基础。方法:根据目的基因序列设计PCR引物,利用基因重组技术构建原核表达载体pEASYTM-E1-NS1。将重组... 目的:构建蜱传森林脑炎病毒(TBEV)非结构蛋白1(NS1)的原核表达载体,以期获得其高纯度的表达,为制备多克隆抗体及其功能的研究奠定实验基础。方法:根据目的基因序列设计PCR引物,利用基因重组技术构建原核表达载体pEASYTM-E1-NS1。将重组后质粒pEASYTM-E1-NS1转化至BL21细胞,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后进行镍离子亲和纯化,利用Bradford法测定蛋白浓度。采用SDS-PAGE和Western blotting法分析融合蛋白的表达水平。结果:含TBEV NS1的原核表达载体pEASYTM-E1-NS1经诱导后,可获得以包涵体形式存在的融合蛋白,通过亲和纯化得到较高纯度的蛋白质。SDS-PAGE和Western blotting,在相对分子质量约40 000处有特异性蛋白条带。结论:成功构建重组pEASYTM-E1-NS1原核表达载体,获得高纯度的重组TBEV NS1的融合蛋白。 展开更多
关键词 森林脑炎病毒 非结构蛋白1 原核表达 融合蛋白
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新疆阿勒泰山地蜱传脑炎疫源地调查 被引量:5
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作者 孙响 张桂林 +4 位作者 刘然 刘晓明 杨靓靓 郑重 赵焱 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1189-1192,共4页
目的调查新疆阿勒泰山地蜱传脑炎疫源地特征,分离鉴定蜱传脑炎病毒。方法通过家畜体表捡法采集寄生蜱;利用间接免疫荧光法检测当地健康人群血清中蜱传脑炎病毒IgG抗体;通过将蜱研磨液接种实验小鼠进行病原动物分离;通过接种BHK-21细胞... 目的调查新疆阿勒泰山地蜱传脑炎疫源地特征,分离鉴定蜱传脑炎病毒。方法通过家畜体表捡法采集寄生蜱;利用间接免疫荧光法检测当地健康人群血清中蜱传脑炎病毒IgG抗体;通过将蜱研磨液接种实验小鼠进行病原动物分离;通过接种BHK-21细胞对蜱传脑炎病毒进行分离培养;利用RT-PCR方法对病毒E蛋白基因片段进行扩增和测序,通过序列分析明确病毒系统进化特征。结果新疆阿勒泰山地白哈巴地区分布有2种蜱,森林革蜱为优势种(55.6%),其次为边缘革蜱(44.4%);当地人群蜱传脑炎IgG抗体阳性率5.31%(6/113);通过动物试验和细胞分离培养,从森林革蜱中分离出一株森林脑炎病毒;对病毒E蛋白基因序列的系统进化分析表明,蜱传脑炎病毒阿勒泰分离株属于远东亚型。结论首次从病原学上证实新疆阿勒泰山地存在蜱传脑炎疫源地,媒介为森林革蜱,病毒流行株为远东亚型。 展开更多
关键词 脑炎 蜱传脑炎病毒 疫源地 阿勒泰
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森林脑炎病毒(TBEV)实时定量TaqMan PCR检测方法的建立 被引量:7
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作者 胡玉洋 杨银辉 +4 位作者 刘洪 康晓平 朱晓光 司炳银 祝庆余 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期745-748,共4页
目的建立快速检测TBEV的实时定量TaqMan PCR方法。方法根据GenBank发表的TBEV全基因组序列资料,在其C基因和NS5基因区段设计TBEV的特异探针和引物,在E基因区段设计普通PCR引物。以MDJ01株作为待检毒株,黄病毒属的另外7株病毒用来评... 目的建立快速检测TBEV的实时定量TaqMan PCR方法。方法根据GenBank发表的TBEV全基因组序列资料,在其C基因和NS5基因区段设计TBEV的特异探针和引物,在E基因区段设计普通PCR引物。以MDJ01株作为待检毒株,黄病毒属的另外7株病毒用来评价检测体系的特异性。测定病毒的TCID50值并制备病毒拷贝数标准品,分别用于制作病毒滴度和拷贝数标准曲线。与常规PCR方法进行了灵敏度比较,并建立了病毒感染小鼠的检测模型。结果该检测方法的灵敏度可达到100拷贝/反应或0.1TCID50,是常规PCR方法的十倍。作为对照的黄热病毒疫苗株17D、登革1~4型病毒、日本脑炎病毒、西尼罗病毒Chin-01株结果均为阴性,证明该体系具有良好的特异性。经过多批次、不同浓度样品的重复检测,批内和批间变异系数均小于5%,表明该体系具有较好的稳定性和重复性。结论建立了一种灵敏、特异、简便易行的TBEV的TaqMan实时定量PCR检测方法,为TBEV的预防控制和诊断提供了一种技术手段。 展开更多
关键词 脑炎病毒亚组 实时定量PCR TAQMAN
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