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谷氨酰胺转氨酶在Yarrowia lipolytica中的活性表达
1
作者
任蕊蕊
刘松
+2 位作者
李江华
堵国成
陈坚
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第1期11-15,共5页
谷氨酰胺转氨酶(EC2. 3. 2. 13,Transglutaminase,TGase)是一种重要的食品酶。基于N-端酶原区对折叠的重要影响,TGase通常以无活性的酶原(pro-TGase)形式在异源宿主中表达。以茂源链霉菌(Streptomyces mobaraensis) pro-TGase为基因来源...
谷氨酰胺转氨酶(EC2. 3. 2. 13,Transglutaminase,TGase)是一种重要的食品酶。基于N-端酶原区对折叠的重要影响,TGase通常以无活性的酶原(pro-TGase)形式在异源宿主中表达。以茂源链霉菌(Streptomyces mobaraensis) pro-TGase为基因来源,重组解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica po1h)为研究对象,通过在pro-TGase插入宿主Kex2蛋白酶识别位点(策略1)和共表达pro-TGase与谷氨酰胺转氨酶激活金属蛋白酶(TAMEP,策略2),使proTGase在Y. lipolytica中表达后被切除酶原区,而直接转化为活性TGase。摇瓶发酵结果显示,策略1和策略2构建得到的重组菌的TGase活力分别为5. 26 U/m L和6. 77 U/m L。酶学性质研究表明,策略1和策略2得到的重组菌的TGase比酶活、Km及kcat/Km均明显优于S. mobaraensis TGase。基于Y. lipolytica食品安全性,研究结果为TGase的工业化生产提供了新型高产菌种。
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关键词
谷氨酰胺转氨酶
YARROWIA
lipolytica
活性表达
蛋白酶识别位点
活化
蛋白酶
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职称材料
题名
谷氨酰胺转氨酶在Yarrowia lipolytica中的活性表达
1
作者
任蕊蕊
刘松
李江华
堵国成
陈坚
机构
江南大学生物工程学院
江南大学工业生物技术教育部重点实验室
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第1期11-15,共5页
基金
国家自然基金面上项目(31771913)
江苏省重点研发计划社会发展项目(BE2016629)
文摘
谷氨酰胺转氨酶(EC2. 3. 2. 13,Transglutaminase,TGase)是一种重要的食品酶。基于N-端酶原区对折叠的重要影响,TGase通常以无活性的酶原(pro-TGase)形式在异源宿主中表达。以茂源链霉菌(Streptomyces mobaraensis) pro-TGase为基因来源,重组解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica po1h)为研究对象,通过在pro-TGase插入宿主Kex2蛋白酶识别位点(策略1)和共表达pro-TGase与谷氨酰胺转氨酶激活金属蛋白酶(TAMEP,策略2),使proTGase在Y. lipolytica中表达后被切除酶原区,而直接转化为活性TGase。摇瓶发酵结果显示,策略1和策略2构建得到的重组菌的TGase活力分别为5. 26 U/m L和6. 77 U/m L。酶学性质研究表明,策略1和策略2得到的重组菌的TGase比酶活、Km及kcat/Km均明显优于S. mobaraensis TGase。基于Y. lipolytica食品安全性,研究结果为TGase的工业化生产提供了新型高产菌种。
关键词
谷氨酰胺转氨酶
YARROWIA
lipolytica
活性表达
蛋白酶识别位点
活化
蛋白酶
Keywords
transglutaminase
Yarrowia lipolytica
activity expression
protease recognition site
activating protease
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
谷氨酰胺转氨酶在Yarrowia lipolytica中的活性表达
任蕊蕊
刘松
李江华
堵国成
陈坚
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019
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