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烟草蛋白酶体α2型亚单位的克隆和序列分析
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作者 付强 邹颉 +2 位作者 余婧 赵杰宏 任学良 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第9期39-41,共3页
为研究烟草识别病毒并将其降解为蛋白酶体基因,以拟南芥的蛋白酶体α2型亚单位基因全长c DNA序列(Gen Bank登录号:AF043520.1)为信息探针,用电子克隆的方法从烟草栽培品种中克隆到1个蛋白酶体基因Nt PAB1,并对其进行序列分析。结果表明,... 为研究烟草识别病毒并将其降解为蛋白酶体基因,以拟南芥的蛋白酶体α2型亚单位基因全长c DNA序列(Gen Bank登录号:AF043520.1)为信息探针,用电子克隆的方法从烟草栽培品种中克隆到1个蛋白酶体基因Nt PAB1,并对其进行序列分析。结果表明,Nt PAB1包含完整的开放读码框,编码219个氨基酸,含有1个保守域proteasome_alpha_type_2;通过同源比对和进化分析发现,Nt PAB1氨基酸序列与葡萄PAB1的序列一致性达到98%。以上结果表明,Nt PAB1是栽培烟草中未报道的编码蛋白酶体基因。 展开更多
关键词 栽培烟草 蛋白酶体α2型亚单位 蛋白降解 克隆 序列分析
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猪圆环病毒2型Rep/Rep'和Cap蛋白亚单位疫苗免疫保护性试验 被引量:6
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作者 刘丹 王一平 +5 位作者 吴洪丽 危艳武 刘建波 李胜斌 魏萍 刘长明 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期916-919,共4页
猪圆环病毒2型(PCV2)ORF1基因编码的Rep/Rep'蛋白与病毒复制酶相关,ORF2编码的Cap蛋白为病毒核衣壳,是病毒保护性抗原。为比较这3种蛋白作为亚单位疫苗的免疫保护性,本研究以重组杆状病毒表达的PCV2-rRep、-rRep'和-rCap蛋白制... 猪圆环病毒2型(PCV2)ORF1基因编码的Rep/Rep'蛋白与病毒复制酶相关,ORF2编码的Cap蛋白为病毒核衣壳,是病毒保护性抗原。为比较这3种蛋白作为亚单位疫苗的免疫保护性,本研究以重组杆状病毒表达的PCV2-rRep、-rRep'和-rCap蛋白制备亚单位疫苗及PCV2灭活苗,分组免疫BALB/c鼠进行攻毒,以评价疫苗的免疫保护力。对PCV2-rRep和-rRep'亚单位疫苗免疫鼠血清ELISA抗体检测表明,于免疫后第14 d抗体全部转阳,第35 d抗体效价分别达到1∶42 667和1∶51 200。PCV2-rCap亚单位疫苗和PCV2灭活苗免疫组于第21 d抗体转阳,第35 d抗体效价分别达1∶2 133和1∶333。攻毒试验表明,PCV2-rCap亚单位疫苗和PCV2灭活苗免疫鼠获得完全保护;而PCV2-rRep和-rRep'蛋白亚单位疫苗免疫组无保护作用。血清中和试验表明,PCV2-rCap蛋白亚单位疫苗和PCV2灭活苗免疫鼠血清中和抗体效价达1∶1 600和1∶800;而PCV2-rRep和-rRep'蛋白亚单位疫苗免疫鼠血清无中和病毒能力。该研究表明,PCV2-Cap蛋白亚单位疫苗具有良好的免疫保护力,可以与PCV2自然感染猪产生的抗Rep蛋白抗体相鉴别,具有良好的开发前景。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2 REP Rep’和Cap蛋白 单位疫苗 免疫保护性
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G蛋白β_3亚单位基因C825T多态性与2型糖尿病的关系 被引量:1
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作者 余本富 陈明卫 +3 位作者 王佑民 周剑 胡红琳 时照明 《安徽医科大学学报》 CAS 2004年第4期267-269,共3页
目的 观察合肥地区 2型糖尿病患者G蛋白 β3 亚单位C82 5T (GNβ3 C82 5T)多态性 ,探讨其与 2型糖尿病(T2DM)的关系。方法 采用聚合酶链式反应和限制性片段长度多态技术 (PCR RFLP)来检测单纯T2DM患者 191例 ,T2DM合并高血压患者 (HT)... 目的 观察合肥地区 2型糖尿病患者G蛋白 β3 亚单位C82 5T (GNβ3 C82 5T)多态性 ,探讨其与 2型糖尿病(T2DM)的关系。方法 采用聚合酶链式反应和限制性片段长度多态技术 (PCR RFLP)来检测单纯T2DM患者 191例 ,T2DM合并高血压患者 (HT) 10 2例和对照人群 70例的GNβ3 C82 5T基因型 ,并进行病例对照统计分析。结果 对照组基因型频率CC、CT、TT为 34 3%、5 0 %、15 7% ,等位基因频率C、T分别为 5 9%、4 1% ;T2DM组基因型频率CC、CT、TT为 32 5 %、4 9 7%、17 8% ,等位基因频率C、T分别为 5 7%、4 3% ;T2DM +HT组CC、CT、TT为 2 6 5 %、5 0 %、2 3 5 % ,等位基因频率C、T分别为 5 1%、4 9% ;三组间基因型频率比较 χ2 =2 6 88,P =0 6 11;三组间等位基因频率比较 χ2 =2 5 86 ,P =0 2 74 ,C82 5T多态性与对照组比较差异无显著性。结论 在本人群中GNβ3 C82 5T多态性与T2DM无关系。 展开更多
关键词 G蛋白β3单位基因 C825T 多态性 2糖尿病
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无针免疫猪圆环病毒2型亚单位疫苗效果评价 被引量:1
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作者 张光际 蔡伟 +3 位作者 胡佳伟 崔超越 吴莲玉 魏旭峰 《中国动物检疫》 CAS 2023年第3期131-135,共5页
为评价用无针注射器接种猪圆环病毒2型亚单位疫苗的安全性及免疫效果,为无针免疫的使用、推广提供数据支撑,将40头3~5周龄三元猪随机均分为4组,即有针注射1头份剂量组以及无针注射低(1/4头份)、中(1/2头份)、高(1头份)剂量组,分别于第1... 为评价用无针注射器接种猪圆环病毒2型亚单位疫苗的安全性及免疫效果,为无针免疫的使用、推广提供数据支撑,将40头3~5周龄三元猪随机均分为4组,即有针注射1头份剂量组以及无针注射低(1/4头份)、中(1/2头份)、高(1头份)剂量组,分别于第1、21天开展两次免疫,观察试验前后动物的临床症状、体重变化,并对第7、14、21、28、42天各组动物体内抗体水平变化及免疫效率等进行研究。结果显示:采用无针注射器进行免疫时动物疼痛反应较小,注射速度快,免疫后各组动物精神状态、饮食、饮水、自发活动等无异常;与有针注射组动物相比,减量注射(1/4头份)可以显著促进仔猪增重(P<0.05),同时可以达到和有针注射同样的免疫效果(P>0.05);同等剂量亚单位疫苗注射免疫后,无针免疫组动物体内抗体水平更高(P<0.01),且各组动物体内抗体阳性率均可有效维持至试验结束。结果表明,用无针注射器接种猪圆环病毒2型亚单位疫苗安全性高、耐受性好、有效性稳定,无针注射器减量免疫可以达到有效保护作用的同时促进了仔猪生长,可尝试推广应用。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2 无针注射 单位疫苗 免疫效果评价
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3种不同类型佐剂的猪圆环病毒2型亚单位灭活疫苗免疫效果的比较研究 被引量:2
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作者 柴华 张智明 +5 位作者 闫妍 方超 孙晓峰 梁宛楠 窦海艳 何世岷 《中国兽药杂志》 2020年第3期1-6,共6页
为制备猪圆环病毒2型商品化亚单位疫苗选择良好的佐剂,对由水性佐剂GEL 01、白油佐剂以及氢氧化铝胶佐剂分别制备的3种猪圆环病毒2型亚单位疫苗的免疫效果进行比较研究。本实验选取3~4周龄猪圆环病毒2型抗体阴性猪30头,根据试验疫苗接... 为制备猪圆环病毒2型商品化亚单位疫苗选择良好的佐剂,对由水性佐剂GEL 01、白油佐剂以及氢氧化铝胶佐剂分别制备的3种猪圆环病毒2型亚单位疫苗的免疫效果进行比较研究。本实验选取3~4周龄猪圆环病毒2型抗体阴性猪30头,根据试验疫苗接种情况分为6组,分别为:3种不同佐剂制备的亚单位疫苗(A组、B组和C组)、商品化疫苗(D组)以及空白对照组和攻毒对照组,然后进行临床观察、抗体水平监测和免疫效力评价,观察各组仔猪的不良反应情况、抗体水平以及攻毒保护情况。结果显示:3种不同类型佐剂制备的猪圆环病毒2型亚单位疫苗接种猪后均无任何不良反应、能刺激机体产生良好的ELISA抗体水平和免疫效果,但水性佐剂GEL 01制备的疫苗与另外2种佐剂制备的疫苗相比,综合抗体水平、免疫效果等因素,水性佐剂GEL 01制备的疫苗在临床使用上更具优势,为商品化亚单位疫苗佐剂的选择提供了重要的数据支持。 展开更多
关键词 佐剂 猪圆环病毒2 单位 灭活疫苗 免疫效果
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2种佐剂在猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗中的效果比较 被引量:1
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作者 胡江锋 张志刚 +2 位作者 董剑辉 陈瑞 黄文强 《今日畜牧兽医》 2021年第1期11-12,共2页
为给猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗选择一种理想的佐剂,以增强机体对抗原的适应性免疫应答,协同提高动物免疫力。实验用水包油Merckinade SDA 25佐剂和双向Montanide ISA 206佐剂,分别按各自说明制备猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗... 为给猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗选择一种理想的佐剂,以增强机体对抗原的适应性免疫应答,协同提高动物免疫力。实验用水包油Merckinade SDA 25佐剂和双向Montanide ISA 206佐剂,分别按各自说明制备猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗,再对两种佐剂的疫苗进行稳定性、黏度、安全及效力检验,比较评价出猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗的理想佐剂。结果表明,两种佐剂疫苗的稳定性、黏度、安全均合格,无明显差异;但Montanide ISA 206佐剂疫苗较Merckinade SDA 25佐剂疫苗诱导抗体效价更高。据此,笔者认为,Montanide ISA 206佐剂是猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗比较理想的佐剂。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2基因工程单位疫苗 佐剂 比较
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猪α干扰素对猪圆环病毒2型亚单位疫苗免疫效果的影响
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《今日畜牧兽医》 2009年第10期67-67,共1页
为了评估酵母表达的PCV2 Cap蛋白在猪体的免疫特性以及猪α干扰素对其的免疫佐剂效果.将酵母表达的PCV2 Cap蛋白配比适量的铝胶或重组猪α干扰素制成亚单位疫苗。30日龄仔猪分别接种铝胶佐剂亚单位疫苗和猪α干扰素佐剂亚单位疫苗,同... 为了评估酵母表达的PCV2 Cap蛋白在猪体的免疫特性以及猪α干扰素对其的免疫佐剂效果.将酵母表达的PCV2 Cap蛋白配比适量的铝胶或重组猪α干扰素制成亚单位疫苗。30日龄仔猪分别接种铝胶佐剂亚单位疫苗和猪α干扰素佐剂亚单位疫苗,同时设攻毒对照与空白对照,首免后21天加强免疫,二免后14天用PCV2JS株攻毒。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2 单位疫苗 免疫效果 干扰素 CAP蛋白 免疫佐剂 PCV2 酵母表达
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甲醛灭活猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液的最佳条件研究
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作者 胡江锋 张志刚 +1 位作者 陈瑞 张小娟 《四川畜牧兽医》 2021年第4期26-28,共3页
为探究甲醛对猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液最佳的灭活条件,本试验采用10%的甲醛溶液与猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液混匀,使甲醛终浓度分别达到0.05%、0.07%、0.10%、0.15%、0.20%,在4~8℃下经过不同时间的灭活,通... 为探究甲醛对猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液最佳的灭活条件,本试验采用10%的甲醛溶液与猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液混匀,使甲醛终浓度分别达到0.05%、0.07%、0.10%、0.15%、0.20%,在4~8℃下经过不同时间的灭活,通过对灭活液不同时间点的无菌检验及灭活检验,综合判定灭活效果。结果显示:猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗抗原液在甲醛终浓度为0.07%时灭活72h,或甲醛终浓度为0.10%和0.15%时灭活60h,或甲醛终浓度为0.20%时灭活48h,均取得可靠的灭活效果。考虑到甲醛的毒副作用,笔者认为4~8℃下用0.07%甲醛终浓度灭活72h是比较理想的灭活条件。 展开更多
关键词 甲醛 灭活 猪圆环病毒2基因工程单位疫苗 抗原液
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猪圆环病毒2型Cap蛋白部分基因序列与大肠杆菌LTB成熟肽基因的融合表达及免疫原性研究 被引量:4
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作者 侯强红 余兴龙 +5 位作者 李微 李润成 罗维 刘浩 尹恒 刘忠华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期847-851,共5页
为了获得猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)衣壳蛋白(Cap)基因3’端396 bp的片段与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)成熟肽编码区融合基因的高效表达,并检验重组蛋白的免疫保护效果。以含PCV-2全基因组的pMDT PCV-2质粒... 为了获得猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)衣壳蛋白(Cap)基因3’端396 bp的片段与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)成熟肽编码区融合基因的高效表达,并检验重组蛋白的免疫保护效果。以含PCV-2全基因组的pMDT PCV-2质粒为模板,用PCR的方法扩增PCV-2 Cap基因,并将其克隆到pET28a(+)中,构建得到pET-Cap质粒,利用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切切下Cap基因3’末端396 bp的片段,插入到pET-LTB原核表达质粒LTB基因的3’末端,从而构建pET-LTB△Cap原核表达质粒,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS后,用IPTG诱导重组菌,用SDS-PAGE电泳和Western blot检测诱导物。表达产物经初步纯化后用昆明系小白鼠做免疫保护实验。结果表明:pET-LTB△Cap重组融合表达质粒在大肠杆菌中实现了高效表达,融合蛋白分子量约为29Ku,表达量约占菌体蛋白的36.67%,融合蛋白能被PCV-2阳性血清识别。攻毒后,所有小鼠临床表现正常。用PCR检测有1/8的免疫小鼠感染了PCV-2,而对照组8只小鼠都感染了PCV-21。PCV-2 Cap基因3’端396 bp的片段与LTB基因融合能实现高效表达,表达产物免疫的小白鼠可抵抗PCV-2的攻击此研究为PCV-2基因工程疫苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2 大肠杆菌不耐热肠毒素B单位(LTB) 融合表达 免疫原性
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猪链球菌2型亚单位疫苗的免疫效果
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作者 史同瑞 《畜牧兽医科技信息》 2001年第8期14-14,共1页
猪链球菌感染是一种造成养猪业重大经济损失的疾病。接种全菌疫苗只能对同源细菌产生免疫。Wisselink等应用亲和层析法提取猪2型链球菌4005菌株的细胞外因子(EF)和细胞壁释放蛋白(MRP),制备亚单位油乳剂疫苗,并测定了其免疫效果。试验猪... 猪链球菌感染是一种造成养猪业重大经济损失的疾病。接种全菌疫苗只能对同源细菌产生免疫。Wisselink等应用亲和层析法提取猪2型链球菌4005菌株的细胞外因子(EF)和细胞壁释放蛋白(MRP),制备亚单位油乳剂疫苗,并测定了其免疫效果。试验猪在3和6周龄免疫两次,8周龄时静脉攻击同源或异源链球菌。结果表明。免疫MRP+EFF油乳剂疫苗的猪抗MRP和EF抗体效价较高,且免疫效果与全菌油苗相同。 展开更多
关键词 猪链球菌2 单位疫苗 油乳剂疫苗 免疫效果 免疫猪 链球菌感染 亲和层析法 细胞外因子 重大经济损失 保护率
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中博生物PCV2基因工程亚单位疫苗强势来袭,首日签单1152万mL
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作者 黄若涵 《猪业科学》 2015年第1期66-66,共1页
2014年12月18日,在由湖北省畜牧兽陕学会、湖北省兽用生物制品工程技术研究中心共吲主办、武汉中博生物股份何限公州承办的猪圆环病毒防控国际学术研讨会上,武汉中博生物股份有限公司发布了新产品——猪圆环病毒2型杆状病毒载体灭活... 2014年12月18日,在由湖北省畜牧兽陕学会、湖北省兽用生物制品工程技术研究中心共吲主办、武汉中博生物股份何限公州承办的猪圆环病毒防控国际学术研讨会上,武汉中博生物股份有限公司发布了新产品——猪圆环病毒2型杆状病毒载体灭活疫苗(CP08株)。来自韩国、美国和中国的专家以及中博生物的全国经销商近600人共同见证了这一辉煌时刻。 展开更多
关键词 兽用生物制品 单位疫苗 基因工程 PCV2 猪圆环病毒2 工程技术研究中心 国际学术研讨会 杆状病毒载体
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不同免疫增强剂对禽戊型肝炎病毒ORF2蛋白的免疫效果分析
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作者 闫洪健 高启明 +3 位作者 王一新 常爽 赵鹏 王成森 《中国家禽》 北大核心 2023年第10期50-58,共9页
为研究不同免疫增强剂对禽戊型肝炎病毒(aHEV)ORF2蛋白的免疫效果影响,研究通过大肠杆菌原核表达系统表达aHEV ORF2蛋白,纯化后与弗氏佐剂按1∶1等体积混合制备亚单位疫苗。将90只1日龄SPF雏鸡随机分成6组,每组15只。ORF2蛋白组单纯免疫... 为研究不同免疫增强剂对禽戊型肝炎病毒(aHEV)ORF2蛋白的免疫效果影响,研究通过大肠杆菌原核表达系统表达aHEV ORF2蛋白,纯化后与弗氏佐剂按1∶1等体积混合制备亚单位疫苗。将90只1日龄SPF雏鸡随机分成6组,每组15只。ORF2蛋白组单纯免疫YT-ORF2蛋白,ORF2蛋白+弗氏佐剂组免疫YT-ORF2蛋白+弗氏佐剂,AB101组免疫YT-ORF2蛋白+弗氏佐剂+AB101,AB106组免疫YT-ORF2蛋白+弗氏佐剂+AB106,AB506组免疫YT-ORF2蛋白+弗氏佐剂+AB506,空白对照组免疫生理盐水,分别在21、28、42日龄三次免疫SPF鸡。采用ELISA和间接免疫荧光检测不同免疫组SPF鸡的aHEV抗体水平,通过流式细胞仪检测CD4+和CD8+T淋巴细胞水平,荧光定量PCR检测IL-2、IL-4、IFN-γ3种细胞因子表达情况,并测定体重和器官发育指数。结果显示:原核表达获得分子量为72 ku的ORF2蛋白,AB106组产生的抗体水平极显著高于其他各组(P<0.01),AB106和AB506免疫增强剂可引起CD4^(+)和CD8^(+)T细胞比重显著增加并上调IL-2、IL-4、IFN-γ表达量(P<0.05),AB106组脾脏指数、法氏囊指数显著高于空白对照组、ORF2蛋白组和ORF2蛋白+弗氏佐剂组(P<0.05)。研究表明含胸腺肽和TLR7激动剂的免疫增强剂可显著提高CD4+和CD8+T细胞比重并上调与免疫相关的细胞因子表达量,其中且含胸腺肽的免疫增强剂诱导的aHEV抗体水平较高。 展开更多
关键词 禽戊肝炎病毒 免疫增强剂 ORF2 单位疫苗 原核表达
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猪链球菌-副猪嗜血杆菌二联亚单位疫苗在小鼠的免疫效力分析 被引量:10
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作者 赵建平 魏燕鸣 +6 位作者 宋岱松 张强 朱剑 周明光 李冉 康超 金梅林 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1639-1644,共6页
本研究旨在开发一种用于防制猪链球菌病和副猪嗜血杆菌病的新型二联基因工程疫苗,并对其免疫效应进行评价。选择猪链球菌2型蛋白溶血素SLY、HP0197和副猪嗜血杆菌外膜蛋白D15和HPS06257 4种蛋白,重组表达并纯化,添加一定比例的佐剂制成... 本研究旨在开发一种用于防制猪链球菌病和副猪嗜血杆菌病的新型二联基因工程疫苗,并对其免疫效应进行评价。选择猪链球菌2型蛋白溶血素SLY、HP0197和副猪嗜血杆菌外膜蛋白D15和HPS06257 4种蛋白,重组表达并纯化,添加一定比例的佐剂制成含有不同组分的亚单位疫苗。研究表明该二联亚单位疫苗及各单苗能够引起小鼠良好的体液免疫,并能保护机体分别抵抗致死剂量猪链球菌2型(SS2)和副猪嗜血杆菌(HPS)强毒株的攻击。此外,调理吞噬试验表明疫苗高免血清能够有效杀死细菌,并赋予机体被动抵抗SS2和HPS感染的能力。研究证实制备的猪链球菌-副猪嗜血杆菌二联亚单位疫苗在小鼠具备良好的免疫保护效力。 展开更多
关键词 猪链球菌2 副猪嗜血杆菌 二联单位疫苗 调理吞噬试验 免疫保护
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Th1/Th2细胞因子在眼肌型重症肌无力转基因小鼠模型中的作用机制 被引量:5
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作者 吴晓蓉 熊英琼 +5 位作者 胡裕翔 许晓璇 程艺 晏立 吴雅俊 饶杰 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期37-42,共6页
目的观察重组人乙酰胆碱受体(H-AChR)γ亚单位免疫HLA-DQ8转基因小鼠眼肌型实验性自身免疫性重症肌无力(o EAMG)模型体外培养上清液中Th1/Th2细胞因子水平变化,探讨其与o EAMG免疫学发病机制的联系。方法 HLA-DQ8转基因小鼠用乳化于完... 目的观察重组人乙酰胆碱受体(H-AChR)γ亚单位免疫HLA-DQ8转基因小鼠眼肌型实验性自身免疫性重症肌无力(o EAMG)模型体外培养上清液中Th1/Th2细胞因子水平变化,探讨其与o EAMG免疫学发病机制的联系。方法 HLA-DQ8转基因小鼠用乳化于完全弗氏佐剂(CFA)的重组H-AChRγ亚单位,或E. Coli提取物,或纯CFA分别免疫,分别于第0天、第30天和第60天共免疫3次。第3次免疫后28 d,处死小鼠后取淋巴结和脾淋巴细胞体外培养,收集培养上清液,采用ELISA法检测白细胞介素(IL)-2、γ-干扰素(IFN-γ)、IL-6和IL-10水平。结果 H-AChRγ组小鼠淋巴结及脾淋巴细胞体外培养上清液中IL-2 (F=42. 835,P <0. 001; F=38. 030,P <0. 001)和INF-γ水平(F=76. 332,P <0. 001;F=34. 865,P <0. 001)均明显高于E. coli组和CFA免疫组; IL-6 (F=1. 325,P=0. 284; F=1. 935,P=0. 166)和IL-10水平(F=0. 908,P=0. 417; F=1. 189,P=0. 322)与E. coli组和CFA组差异无统计学意义。结论 Th1细胞因子在重组H-AChRγ亚单位诱导HLA-DQ8转基因小鼠所建立oEAMG模型的发病机制中可能发挥重要作用,而Th2细胞及其细胞因子作用尚不十分明确。 展开更多
关键词 眼肌实验性自身免疫性重症肌无力 乙酰胆碱受体γ单位 TH1/TH2 细胞因子
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甲型流感病毒M2e与CtB基因融合表达及其免疫特性初步研究 被引量:1
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作者 杨晓芳 江滟 +4 位作者 李婉宜 邝玉 蒋忠华 王丰平 李明远 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期263-266,共4页
目的:构建真核表达重组质粒pcDNA 3.1a(+)-M2e/CtB,并初步研究其在NIH3T3细胞中的表达特性及免疫特性。方法:重叠PCR法扩增甲型流感病毒M2e基因和霍乱毒素CtB基因,将扩增得到的融合基因片段M2e-CtB定向克隆入真核表达载体pcDNA 3.1a(+)... 目的:构建真核表达重组质粒pcDNA 3.1a(+)-M2e/CtB,并初步研究其在NIH3T3细胞中的表达特性及免疫特性。方法:重叠PCR法扩增甲型流感病毒M2e基因和霍乱毒素CtB基因,将扩增得到的融合基因片段M2e-CtB定向克隆入真核表达载体pcDNA 3.1a(+)中,再转化E.coli JM109。将酶切鉴定、PCR扩增及序列鉴定正确的重组质粒命名为pcDNA3.1a(+)-M2e/CtB。用KEGEN TRANSⅢ阳离子聚合物将重组质粒pcDNA 3.1a(+)-M2e/CtB转染NIH3T3细胞,经免疫荧光、RT-PCR产物序列分析、Western blot检测其稳定表达产物。结果:重组质粒pcDNA 3.1a(+)-M2e/CtB含完整的M2e和CtB基因,与相对应基因的序列同源性分别为100%。重组质粒转染NIH3T3细胞后获得了有效表达,并且稳筛株细胞裂解物和上清均能用抗霍乱毒素抗体和抗流感病毒抗体检测到Mr约18000的蛋白条带。结论:成功构建了真核表达重组质粒pcDNA 3.1a(+)-M2e/CtB,初步证明其在体外表达的重组蛋白可分泌至胞外,且有M2e和CTB的双特异反应原性和免疫原性,为流感病毒核酸疫苗的进一步研究奠定了坚实基础。 展开更多
关键词 流感病毒 M2e 黏膜免疫佐剂 霍乱毒素B单位 融合蛋白
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重庆地区汉族2型糖尿病患者PRKAA2基因SNPs研究 被引量:2
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作者 汪茂荣 李蓉 张素华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期731-735,共5页
目的了解中国重庆地区汉族人群单磷酸腺苷(AMP)激活的蛋白激酶α2亚单位(AMPKα2)基因PRKAA2单核苷酸多态性(SNPs)位点与2型糖尿病(T2DM)的关系。方法选取重庆地区T2DM患者523例(病例组)、正常对照312例(对照组),采用聚合酶链反应-限制... 目的了解中国重庆地区汉族人群单磷酸腺苷(AMP)激活的蛋白激酶α2亚单位(AMPKα2)基因PRKAA2单核苷酸多态性(SNPs)位点与2型糖尿病(T2DM)的关系。方法选取重庆地区T2DM患者523例(病例组)、正常对照312例(对照组),采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法,对PRKAA2第1内含子区rs10889007(301A>T)和第2内含子区rs2746338(201A>G)2个SNPs进行基因分型;对2个SNPs进行连锁不平衡(LD)检验,并进行单倍型检测。结果 PRKAA2基因rs10889007(301A>T)3种基因型AA、AT、TT频率在病例组和对照组间差异无统计学意义(χ2=3.227,P>0.05),两组间少见等位基因T频率分布差异亦无统计学意义(χ2=0.887,P>0.05)。PRKAA2基因rs2746338(201A>G)3种基因型AA、AG、GG频率在病例组及对照组间差异无统计学意义(χ2=3.346,P>0.05),两组间少见等位基因G频率分布差异亦无统计学意义(χ2=0.981,P>0.05)。PRKAA2基因rs10889007(301A>T)和rs2746338(201A>G)之间构成的4种单倍型在病例组与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PRKAA2基因SNPs位点rs10889007(301A>T)和rs2746338(201A>G)与中国重庆地区汉族人群T2DM无关联。 展开更多
关键词 糖尿病 2 单磷酸腺苷激活的蛋白激酶α2单位 多态性 单核苷酸
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CDKAL1基因rs7756992位点A>G多态性与2型糖尿病易感性的meta分析 被引量:1
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作者 廖清船 任平 张又枝 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期112-118,共7页
目的系统评价CDKAL1基因rs7756992位点A>G多态性与2型糖尿病(T2DM)易感性的关系。方法制定原始文献的纳入、排除标准及检索策略,通过检索学术期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库及EMBASE、PubMed、ScienceDirect等数据库,收集有关CDK... 目的系统评价CDKAL1基因rs7756992位点A>G多态性与2型糖尿病(T2DM)易感性的关系。方法制定原始文献的纳入、排除标准及检索策略,通过检索学术期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库及EMBASE、PubMed、ScienceDirect等数据库,收集有关CDKAL1基因rs7756992位点A>G多态性与T2DM易感性的病例对照研究,以病例组与对照组CDKAL1基因rs7756992位点各种基因模型的比值比(OR)及其95%置信区间(CI)为效应指标进行meta分析,并根据研究人群种族不同进行亚组分析。结果本研究共纳入15篇文献,T2DM组和对照组病例数分别为24 315例和35 132例。Meta分析显示,CDKAL1基因rs7756992位点A>G多态性与T2DM易感性有关联[等位基因模式(G vs A):OR=1.171,95%CI1.122~1.223,P<0.001;共显性模式(GG vs AA):OR=1.380,95%CI1.258~1.515,P<0.001;共显性模式(AG vs AA):OR=1.131,95%CI 1.089~1.176,P<0.001;显性模式(AG+GG vs AA):OR=1.168,95%CI 1.101~1.240,P<0.001;隐性模式(GG vs AA+AG):OR=1.343,95%CI 1.282~1.405,P<0.001]。亚组分析显示,亚洲人群和白种人群中携带CDKAL1基因rs7756992位点G等位基因的人群发生T2DM的风险增加(P<0.05);而非洲人群中携带CDKAL1基因rs7756992位点G等位基因与A等位基因的人群发生T2DM风险的差异无统计学意义。结论在亚洲人群及白种人群中CDKAL1基因rs7756992位点A>G等位基因的突变可能是T2DM发病的危险因素之一。 展开更多
关键词 2糖尿病 细胞周期素依赖性激酶5调节单位相关蛋白1类似物1 单核苷酸多态性 META分析
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亚单位疫苗微粒传递系统的制备材料与方法研究进展 被引量:1
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作者 原婧 唐闻达 +1 位作者 徐喆 尹荣焕 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期861-864,共4页
亚单位疫苗是利用微生物某种表面结构蛋白制成的新型疫苗,具有免疫特异性强、成分单一且明确等优点,比传统疫苗安全性好、制备简单,一直受到研究者的关注。目前,我国共有鸡传染性法氏囊病、猪圆环病毒2型、
关键词 单位疫苗 制备材料 传递系统 鸡传染性法氏囊病 猪圆环病毒2 微粒 结构蛋白 微生物
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线粒体NDUFB6基因单核苷酸多态与2型糖尿病关系的研究
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作者 吴刚 苏建彬 +2 位作者 徐峰 王晓华 王雪琴 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期368-371,共4页
目的:通过对线粒体基因NDUFB6[NADH dehydrogenase(ubiquinone)1 beta subcomplex]进行单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)的检测,对高频率SNP进行基因分型,研究NDUFB6基因与2型糖尿病的相关性。方法:使用PCR+测序方法... 目的:通过对线粒体基因NDUFB6[NADH dehydrogenase(ubiquinone)1 beta subcomplex]进行单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)的检测,对高频率SNP进行基因分型,研究NDUFB6基因与2型糖尿病的相关性。方法:使用PCR+测序方法,以15个2型糖尿病患者和9个正常人为样本,对NDUFB6基因的启动子、外显子以及临近的内含子进行测序以确定该基因的SNP;对高频率的SNP,仍使用PCR+测序方法分别在192个2型糖尿病患者与正常人中进行基因分型。结果:总共发现NDUFB6基因的6个SNP,其中3个SNP出现频率较高。NDUFB6基因启动子的1个SNP(-1211C>T)在2型糖尿病人群与正常人群有显著差异(P<0.05)。结论:NDUFB6基因启动子的-1211C>T多态性可能与2型糖尿病的发病有关。 展开更多
关键词 NADH脱氢酶泛素1单位基因 单核苷酸多态性 2糖尿病
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非诺贝特对2型糖尿病大鼠骨骼肌丙酮酸脱氢酶激酶表达的影响
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作者 袁戈恒 王薇 +1 位作者 郭晓蕙 高妍 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2007年第2期313-315,共3页
目的:动态观察2型糖尿病进展过程中骨骼肌丙酮酸脱氢酶激酶(PDK4)和丙酮酸脱氢酶1α亚单位(E1α)水平的变化和非诺贝特的干预作用。方法:4周龄自发性2型糖尿病动物模型雄性OLETF大鼠20只随机分为治疗组和未治组,每组10只,另设正常LETO大... 目的:动态观察2型糖尿病进展过程中骨骼肌丙酮酸脱氢酶激酶(PDK4)和丙酮酸脱氢酶1α亚单位(E1α)水平的变化和非诺贝特的干预作用。方法:4周龄自发性2型糖尿病动物模型雄性OLETF大鼠20只随机分为治疗组和未治组,每组10只,另设正常LETO大鼠10只为对照。治疗组每d灌胃非诺贝特20mg/kg,未治组和对照组每d灌胃等量蒸馏水。分别于第8周、17周和30周龄称体质量,行标准葡萄糖耐量试验(OGTT),测定空腹血糖和胰岛素、2h血糖、甘油三酯和胆固醇。17周龄时每组随机抽取4只动物杀检,至30周龄全部杀检,取下肢骨骼肌,Western blot测定骨骼肌PDK4和E1α的表达。结果:8周龄时3组生化指标差异无统计学意义(P>0.05)。随鼠龄的增加,未治组2h血糖、PDK4和E1α的表达高于同期对照组;与未治组比较,治疗组上述指标改善不明显(P>0.05)。结论:胰岛素抵抗大鼠骨骼肌PDK4和E1α的表达随病程增加持续增强,这可能与胰岛素在骨骼肌的作用下降有关。 展开更多
关键词 2糖尿病 丙酮酸脱氢酶激酶 丙酮酸脱氢酶1α单位 非诺贝特
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