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捻转血矛线虫酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定
1
作者
张惠
黄艳
+6 位作者
周静茹
吴飞
童丹妮
陈学秋
杨怡
马光旭
杜爱芳
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期247-253,共7页
为构建捻转血矛线虫cDNA文库,进一步研究捻转血矛线虫蛋白互作机制以及为筛选捻转血矛线虫互作蛋白提供依据,本研究以捻转血矛线虫L3期幼虫为材料,利用TriZol法提取捻转血矛线虫总RNA;使用试剂盒构建捻转血矛线虫的cDNA文库,并对cDNA进...
为构建捻转血矛线虫cDNA文库,进一步研究捻转血矛线虫蛋白互作机制以及为筛选捻转血矛线虫互作蛋白提供依据,本研究以捻转血矛线虫L3期幼虫为材料,利用TriZol法提取捻转血矛线虫总RNA;使用试剂盒构建捻转血矛线虫的cDNA文库,并对cDNA进行均一化处理,再将纯化后的cDNA与线性化的pGADT7-Rec重组构建的文库质粒转化至Y187酵母中,构建出酵母转录激活结构域(activationdomain,AD)文库。结果表明:本研究构建了重组率为100%,插入片段平均长度为1000 bp,工作液细胞密度大于3.5×10^(7)CFU/mL的捻转血矛线虫均一化酵母AD文库;所构建的表达文库各项指标均达标,符合酵母双杂交筛选要求。本文库为捻转血矛线虫的分子机制研究以及疫苗的开发奠定了基础。
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关键词
捻转血矛线虫
CDNA文库
酵母双杂交系统
蛋白质间相互作用
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职称材料
题名
捻转血矛线虫酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定
1
作者
张惠
黄艳
周静茹
吴飞
童丹妮
陈学秋
杨怡
马光旭
杜爱芳
机构
浙江大学动物科学学院动物预防医学研究所
出处
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期247-253,共7页
基金
国家自然科学基金(32002304)
国家重点研发计划(2017YFD0501203)
浙江省基础公益研究计划(LGN20C180005)。
文摘
为构建捻转血矛线虫cDNA文库,进一步研究捻转血矛线虫蛋白互作机制以及为筛选捻转血矛线虫互作蛋白提供依据,本研究以捻转血矛线虫L3期幼虫为材料,利用TriZol法提取捻转血矛线虫总RNA;使用试剂盒构建捻转血矛线虫的cDNA文库,并对cDNA进行均一化处理,再将纯化后的cDNA与线性化的pGADT7-Rec重组构建的文库质粒转化至Y187酵母中,构建出酵母转录激活结构域(activationdomain,AD)文库。结果表明:本研究构建了重组率为100%,插入片段平均长度为1000 bp,工作液细胞密度大于3.5×10^(7)CFU/mL的捻转血矛线虫均一化酵母AD文库;所构建的表达文库各项指标均达标,符合酵母双杂交筛选要求。本文库为捻转血矛线虫的分子机制研究以及疫苗的开发奠定了基础。
关键词
捻转血矛线虫
CDNA文库
酵母双杂交系统
蛋白质间相互作用
Keywords
Haemonchus contortus
cDNA library
yeast two-hybrid system
protein-protein interaction
分类号
S855.9 [农业科学—临床兽医学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
捻转血矛线虫酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定
张惠
黄艳
周静茹
吴飞
童丹妮
陈学秋
杨怡
马光旭
杜爱芳
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022
0
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