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miR-141表达抑制增强结肠癌细胞对5-Fu药物敏感性的研究
被引量：
4
1
作者
马一楠
金迎迎
+2 位作者
王亚利
陈青娟
卫阳
《山西医科大学学报》
CAS
2016年第6期510-517,共8页
目的建立人结肠癌5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药细胞株,并探讨miR-141靶向作用PPP2R1B介导结肠癌细胞对5-Fu耐药的机制。方法通过药物敏感性实验,选取5-Fu敏感细胞COLO-320细胞株采取大剂量冲击联合剂量递增法,诱导筛选5-Fu耐药结肠癌细胞株,稳...
目的建立人结肠癌5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药细胞株,并探讨miR-141靶向作用PPP2R1B介导结肠癌细胞对5-Fu耐药的机制。方法通过药物敏感性实验,选取5-Fu敏感细胞COLO-320细胞株采取大剂量冲击联合剂量递增法,诱导筛选5-Fu耐药结肠癌细胞株,稳定传代。四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测耐药细胞和亲本细胞的半数抑制浓度(IC_(50))。PCR的微阵列技术比较亲本细胞和5-Fu耐药细胞差异表达的miRNA分子,从中筛选出1个差异表达的miR-141分子。利用数据库Targetscan和miRBase database预测miR-141的靶基因为PPP2R1B,利用双荧光素酶报告基因检测进行鉴定。基因敲除miR-141后分析miR-141对PPP2R1B的调控作用。结果 COLO-320细胞株经大剂量冲击联合剂量递增的方法诱导后可在5.0μmol/L的5-Fu培养液中稳定增殖,具有耐药性,命名为COLO-320/5-Fu,该细胞株5-Fu的IC_(50)显著高于亲代细胞(P<0.05)。芯片结果显示共有13个miRNAs在耐药细胞株中差异性表达,其中miRNA-141表达增加最为显著(P<0.05)。敲除该miR-141后,耐药细胞的5-Fu敏感性显著增加,凋亡比例增加(P<0.05)。结果显示,PPP2R1B为miR-141的靶基因,miRNA-141表达抑制显著上调PPP2R1B的表达水平并进而影响Akt磷酸化过程。结论本实验成功构建COLO-320/5-Fu耐药细胞株,miR-141可能通过靶向调控PPP2R1B,进而参与调控结肠癌细胞对5-Fu的耐药。
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关键词
结肠癌
5-氟尿嘧啶
蛋白质磷酸酶2调节亚基1b
耐药性
微小RNA
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职称材料
题名
miR-141表达抑制增强结肠癌细胞对5-Fu药物敏感性的研究
被引量：
4
1
作者
马一楠
金迎迎
王亚利
陈青娟
卫阳
机构
西安交通大学第二附属医院肿瘤科
咸阳市中心医院肿瘤科
西安交通大学第二附属医院科研中心实验室
出处
《山西医科大学学报》
CAS
2016年第6期510-517,共8页
文摘
目的建立人结肠癌5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药细胞株,并探讨miR-141靶向作用PPP2R1B介导结肠癌细胞对5-Fu耐药的机制。方法通过药物敏感性实验,选取5-Fu敏感细胞COLO-320细胞株采取大剂量冲击联合剂量递增法,诱导筛选5-Fu耐药结肠癌细胞株,稳定传代。四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测耐药细胞和亲本细胞的半数抑制浓度(IC_(50))。PCR的微阵列技术比较亲本细胞和5-Fu耐药细胞差异表达的miRNA分子,从中筛选出1个差异表达的miR-141分子。利用数据库Targetscan和miRBase database预测miR-141的靶基因为PPP2R1B,利用双荧光素酶报告基因检测进行鉴定。基因敲除miR-141后分析miR-141对PPP2R1B的调控作用。结果 COLO-320细胞株经大剂量冲击联合剂量递增的方法诱导后可在5.0μmol/L的5-Fu培养液中稳定增殖,具有耐药性,命名为COLO-320/5-Fu,该细胞株5-Fu的IC_(50)显著高于亲代细胞(P<0.05)。芯片结果显示共有13个miRNAs在耐药细胞株中差异性表达,其中miRNA-141表达增加最为显著(P<0.05)。敲除该miR-141后,耐药细胞的5-Fu敏感性显著增加,凋亡比例增加(P<0.05)。结果显示,PPP2R1B为miR-141的靶基因,miRNA-141表达抑制显著上调PPP2R1B的表达水平并进而影响Akt磷酸化过程。结论本实验成功构建COLO-320/5-Fu耐药细胞株,miR-141可能通过靶向调控PPP2R1B,进而参与调控结肠癌细胞对5-Fu的耐药。
关键词
结肠癌
5-氟尿嘧啶
蛋白质磷酸酶2调节亚基1b
耐药性
微小RNA
Keywords
colon cancer
5-fluorouracil
PPP
2
R
1
b
drug resistance
microRNA
分类号
R735.35 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
miR-141表达抑制增强结肠癌细胞对5-Fu药物敏感性的研究
马一楠
金迎迎
王亚利
陈青娟
卫阳
《山西医科大学学报》
CAS
2016
4
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