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GPI锚定蛋白前体C-端附着信号的疏水性决定其内质网相关蛋白质降解途径
1
作者
张楠
柳艺石
+1 位作者
藤田盛久
高晓冬
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第10期1351-1358,共8页
目前,已知超过150种糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白(glycosylphosphatidylinositol anchored protein,GPI-anchored protein)在哺乳动物细胞中表达,并参与免疫识别、细胞通讯与信号转导等多种生理过程。当蛋白质无法被GPI修饰时,前体蛋白质通...
目前,已知超过150种糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白(glycosylphosphatidylinositol anchored protein,GPI-anchored protein)在哺乳动物细胞中表达,并参与免疫识别、细胞通讯与信号转导等多种生理过程。当蛋白质无法被GPI修饰时,前体蛋白质通过内质网相关蛋白质降解(endoplasmic reticulum associated degradation,ERAD)途径降解。然而,GPI锚定蛋白ERAD的降解机制尚不清楚。为了探究GPI锚定蛋白前体的ERAD途径的具体机制,本研究敲除人胚胎肾细胞293细胞株(HEK293)的GPI转酰胺酶复合物亚基PIGS基因,进而敲除E3泛素连接酶HRD1和GP78基因,之后随机在PIGS-KO,PIGS-HRD1-KO和PIGS-GP78-KO过表达16种GPI锚定蛋白质(以亲本PIGS-KO细胞株作为对照组),Western印迹结果证明,GPI锚定蛋白前体在细胞株PIGS-HRD1-KO中的蛋白质积累量(I_(PHK))和PIGS-GP78-KO中的蛋白质积累量(I_(PGK))体现出明显的差异性,例如LYPD2的I_(PHK)是I_(PGK)的28倍,NEGR1的I_(PHK)是I_(PGK)的0.12倍,这说明GPI锚定蛋白前体的降解主要依赖于2种ERAD途径:ERAD-L和ERAD-M。且HRD1与GP78的2种E3泛素连接酶被选择性地用于GPI锚定蛋白前体的降解。朊病毒(prion)和CD59嵌合构建体表明,GPI前体蛋白C-端GPI附着信号决定了降解途径(朊病毒I_(PHK)/I_(PGK)由突变前的0.33改变为突变后的23.42。相反的是,突变前CD59的I_(PHK)/I_(PGK)是11.45,突变后变为2.81)。接着,通过对C-端附着信号疏水性的计算,我们发现,这种选择性差异由前体蛋白质C-端GPI附着信号疏水性的不同造成。本研究初步解释了未被GPI锚修饰的GPI锚定蛋白前体在ERAD中的降解机制。
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关键词
糖基磷脂酰肌醇锚定
蛋白
内质网相关
蛋白质
降解
蛋白质疏水性
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职称材料
啤酒中疏水性蛋白质提取鉴定及其对于泡沫性能的影响的研究
被引量：
1
2
作者
陶林
王德良
+2 位作者
曹健
郭立芸
邬丽君
《中国酿造》
CAS
北大核心
2011年第5期116-120,共5页
利用蛋白疏水层析色谱法(HIC)从啤酒泡沫中分离疏水性蛋白,研究发现,HIC依次分离的蛋白组分表面疏水性增强的同时,泡沫稳定性随之增强,说明HIC分离得到强疏水性多肽对于啤酒泡沫稳定性具有较明显的积极作用,而弱疏水性多肽的影响效果不...
利用蛋白疏水层析色谱法(HIC)从啤酒泡沫中分离疏水性蛋白,研究发现,HIC依次分离的蛋白组分表面疏水性增强的同时,泡沫稳定性随之增强,说明HIC分离得到强疏水性多肽对于啤酒泡沫稳定性具有较明显的积极作用,而弱疏水性多肽的影响效果不明显。此外通过质谱(Mass Spectrometry)鉴定结果显示所得到的疏水性蛋白质为蛋白质Z4,通过对啤酒酿造过程中的关键控制点的跟踪,确定了啤酒酿造过程中,发酵阶段疏水性蛋白质的损失最为严重,对啤酒泡沫质量的影响最大。
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关键词
疏
水性
蛋白质
疏
水层析色谱法(HIC)
Z4
蛋白
酿造过程
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职称材料
鱼类加工制品蛋白质氧化程度分析
被引量：
12
3
作者
陆玉芹
颜明月
+2 位作者
陈德慰
陈良元
马旦梅
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2015年第19期55-59,共5页
本实验以市场上常见的几种鱼类加工制品为研究对象,测定其羰基含量、巯基含量、二硫键含量及蛋白质疏水性等指标,并进行相关性分析。结果表明：经过不同方式加工后,鱼制品蛋白中羰基、巯基、二硫键含量及疏水性都有显著差异（P〈0.05）...
本实验以市场上常见的几种鱼类加工制品为研究对象,测定其羰基含量、巯基含量、二硫键含量及蛋白质疏水性等指标,并进行相关性分析。结果表明：经过不同方式加工后,鱼制品蛋白中羰基、巯基、二硫键含量及疏水性都有显著差异（P〈0.05）。冰鲜类产品的羰基含量较低（0~1 nmol/mg）,盐渍类产品的羰基含量最高（6~10 nmol/mg）;冰鲜类产品的巯基含量较高（70~100 nmol/mg）,而二硫键含量最低（0.1~0.2 nmol/mg）;其余样品的巯基含量均为30~70 nmol/mg,二硫键含量为1~5 nmol/mg;羰基含量与蛋白质疏水性存在极显著相关性（r=0.84,P〈0.01）,巯基含量与二硫键含量存在显著相关性（r=-0.59,P〈0.05）。由实验结果可看出,香烤、盐制类产品蛋白质氧化程度较高,淡干类产品次之,冻鲜类产品蛋白质氧化程度较低。
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关键词
蛋白质
氧化
鱼制品
羰基
巯基
蛋白质疏水性
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职称材料
题名
GPI锚定蛋白前体C-端附着信号的疏水性决定其内质网相关蛋白质降解途径
1
作者
张楠
柳艺石
藤田盛久
高晓冬
机构
江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第10期1351-1358,共8页
基金
国家自然科学基金(No.32071278,31770853,31971216)
山东省重大科技创新工程(No.2019JZZY011006)资助。
文摘
目前,已知超过150种糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白(glycosylphosphatidylinositol anchored protein,GPI-anchored protein)在哺乳动物细胞中表达,并参与免疫识别、细胞通讯与信号转导等多种生理过程。当蛋白质无法被GPI修饰时,前体蛋白质通过内质网相关蛋白质降解(endoplasmic reticulum associated degradation,ERAD)途径降解。然而,GPI锚定蛋白ERAD的降解机制尚不清楚。为了探究GPI锚定蛋白前体的ERAD途径的具体机制,本研究敲除人胚胎肾细胞293细胞株(HEK293)的GPI转酰胺酶复合物亚基PIGS基因,进而敲除E3泛素连接酶HRD1和GP78基因,之后随机在PIGS-KO,PIGS-HRD1-KO和PIGS-GP78-KO过表达16种GPI锚定蛋白质(以亲本PIGS-KO细胞株作为对照组),Western印迹结果证明,GPI锚定蛋白前体在细胞株PIGS-HRD1-KO中的蛋白质积累量(I_(PHK))和PIGS-GP78-KO中的蛋白质积累量(I_(PGK))体现出明显的差异性,例如LYPD2的I_(PHK)是I_(PGK)的28倍,NEGR1的I_(PHK)是I_(PGK)的0.12倍,这说明GPI锚定蛋白前体的降解主要依赖于2种ERAD途径:ERAD-L和ERAD-M。且HRD1与GP78的2种E3泛素连接酶被选择性地用于GPI锚定蛋白前体的降解。朊病毒(prion)和CD59嵌合构建体表明,GPI前体蛋白C-端GPI附着信号决定了降解途径(朊病毒I_(PHK)/I_(PGK)由突变前的0.33改变为突变后的23.42。相反的是,突变前CD59的I_(PHK)/I_(PGK)是11.45,突变后变为2.81)。接着,通过对C-端附着信号疏水性的计算,我们发现,这种选择性差异由前体蛋白质C-端GPI附着信号疏水性的不同造成。本研究初步解释了未被GPI锚修饰的GPI锚定蛋白前体在ERAD中的降解机制。
关键词
糖基磷脂酰肌醇锚定
蛋白
内质网相关
蛋白质
降解
蛋白质疏水性
Keywords
glycosylphosphatidylinositol anchored protein(GPI-anchored protein)
endoplasmic reticulum-associated degradation(ERAD)
protein hydrophobicity
分类号
Q291 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
啤酒中疏水性蛋白质提取鉴定及其对于泡沫性能的影响的研究
被引量：
1
2
作者
陶林
王德良
曹健
郭立芸
邬丽君
机构
河南工业大学生物工程学院
中国食品发酵工业研究院
中原工学院
北京燕京啤酒集团公司
出处
《中国酿造》
CAS
北大核心
2011年第5期116-120,共5页
文摘
利用蛋白疏水层析色谱法(HIC)从啤酒泡沫中分离疏水性蛋白,研究发现,HIC依次分离的蛋白组分表面疏水性增强的同时,泡沫稳定性随之增强,说明HIC分离得到强疏水性多肽对于啤酒泡沫稳定性具有较明显的积极作用,而弱疏水性多肽的影响效果不明显。此外通过质谱(Mass Spectrometry)鉴定结果显示所得到的疏水性蛋白质为蛋白质Z4,通过对啤酒酿造过程中的关键控制点的跟踪,确定了啤酒酿造过程中,发酵阶段疏水性蛋白质的损失最为严重,对啤酒泡沫质量的影响最大。
关键词
疏
水性
蛋白质
疏
水层析色谱法(HIC)
Z4
蛋白
酿造过程
Keywords
hydrophobic protein
hydrophohic interaction chromatography
Z4 protein
brewing process
分类号
TS262.5 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
鱼类加工制品蛋白质氧化程度分析
被引量：
12
3
作者
陆玉芹
颜明月
陈德慰
陈良元
马旦梅
机构
广西大学轻工与食品工程学院
百洋水产集团股份有限公司
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2015年第19期55-59,共5页
基金
2012年度国家星火计划项目(2012GA790003)
南宁市科技攻关项目(20142306)
广西高校"广西特色农产品精深加工及安全控制"重点实验室项目
文摘
本实验以市场上常见的几种鱼类加工制品为研究对象,测定其羰基含量、巯基含量、二硫键含量及蛋白质疏水性等指标,并进行相关性分析。结果表明：经过不同方式加工后,鱼制品蛋白中羰基、巯基、二硫键含量及疏水性都有显著差异（P〈0.05）。冰鲜类产品的羰基含量较低（0~1 nmol/mg）,盐渍类产品的羰基含量最高（6~10 nmol/mg）;冰鲜类产品的巯基含量较高（70~100 nmol/mg）,而二硫键含量最低（0.1~0.2 nmol/mg）;其余样品的巯基含量均为30~70 nmol/mg,二硫键含量为1~5 nmol/mg;羰基含量与蛋白质疏水性存在极显著相关性（r=0.84,P〈0.01）,巯基含量与二硫键含量存在显著相关性（r=-0.59,P〈0.05）。由实验结果可看出,香烤、盐制类产品蛋白质氧化程度较高,淡干类产品次之,冻鲜类产品蛋白质氧化程度较低。
关键词
蛋白质
氧化
鱼制品
羰基
巯基
蛋白质疏水性
Keywords
protein oxidation
fish products
carbonyl group
thiol group
protein hydrophobicity
分类号
TS254.4 [轻工技术与工程—水产品加工及贮藏工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
GPI锚定蛋白前体C-端附着信号的疏水性决定其内质网相关蛋白质降解途径
张楠
柳艺石
藤田盛久
高晓冬
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
啤酒中疏水性蛋白质提取鉴定及其对于泡沫性能的影响的研究
陶林
王德良
曹健
郭立芸
邬丽君
《中国酿造》
CAS
北大核心
2011
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
鱼类加工制品蛋白质氧化程度分析
陆玉芹
颜明月
陈德慰
陈良元
马旦梅
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2015
12
在线阅读
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职称材料
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