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题名基于高分辨质谱的超滤辅助样品制备方法的优化
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作者
张莹
孙旋
孟令杰
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机构
西安交通大学大型仪器设备共享实验中心
西安交通大学化学学院
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出处
《质谱学报》
北大核心
2025年第4期493-502,共10页
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文摘
超滤辅助样品制备(filter-aided sample preparation,FASP)法广泛用于蛋白质样品前处理,但该方法使用的超滤膜会非特异性吸附蛋白质而造成样品损失。本研究提出了一种优化后的FASP制样方法,通过对超滤膜表面接枝两性氨基酸的化学修饰方法,提高超滤膜表面亲水性,以降低蛋白质损失。利用优化的FASP方法制备人宫颈癌细胞(HeLa)蛋白样品,并进行LC-MS/MS检测,比较了FASP方法、改进后FASP方法、溶液内酶解法鉴定到的肽段和蛋白质数量。结果表明,改进后的FASP方法鉴定到的蛋白质和肽段数目均有所提高,分别增加了7%~9%、30%~40%。同时,确定了改进后FASP方法的最佳蛋白柱载量为20μg。
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关键词
超滤辅助样品制备(FASP)
蛋白质样品前处理
亲水改性
高分辨质谱
蛋白质组学
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Keywords
filter-aided sample preparation(FASP)
protein preparation
hydrophilic modification
high resolution mass spectrometry
proteomics
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分类号
O657.63
[理学—分析化学]
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