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题名适于双向电泳分析的苹果叶片蛋白质提取方法
被引量：14
- 1
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作者
曾广娟
李春敏
张新忠
滕云龙
董文轩
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机构
沈阳农业大学园艺学院
河北省农林科学院昌黎果树研究所
中国农业大学园艺植物研究所
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出处
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期484-488,共5页
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基金
河北省自然科学基金项目(C2007000967)
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文摘
为了探索适用于双向电泳（2-DE）分析的苹果叶片蛋白质提取方法,比较了三氯乙酸（TCA）/丙酮沉淀法、二硫苏糖醇（DTT）/丙酮法、Tris-HCl提取法和改良的Tris-HCl提取法等4种蛋白质提取方法。以7cm、pH3-10的线性固相pH梯度（immobilized pH gradient,IPG）胶条作为第一向电泳,以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）（12.5%的分离胶）作为第二向电泳,对提取物进行2-DE分离,采用银染显色。结果表明,上述4种方法在2-DE图谱上分别得到140,215,181和616个蛋白质点。其中以改良的Tris-HCl提取法得到的蛋白质点数最多,且背景清晰、图谱上没有明显的横纵条纹。为了进一步验证改良的Tris-HCl提取法的有效性,用18cm、pH3-10的线性IPG胶条和12.5%的分离胶对提取的苹果叶片蛋白质进行2-DE分离,考马斯亮蓝R-250染色,共检测到455个蛋白质点,其相对分子质量主要分布在14000-66000范围内,图谱背景清晰,再次证明应用该方法制备的样品适用于双向电泳分析,可用于苹果叶片的蛋白质组学分析。
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关键词
双向电泳
蛋白质提取方法
苹果叶片
蛋白质组学分析
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Keywords
two-dimensional electrophoresis （ 2-DE ）
protein extraction method
apple leaves
proteomic analysis
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分类号
O658
[理学—分析化学]
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题名不同方法提取车前草蛋白质效果比较
- 2
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作者
李蒙
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机构
西安文理学院生物与环境工程学院
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出处
《陕西农业科学》
2019年第2期42-44,共3页
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文摘
以车前草叶片为材料,采用正交试验方法,对车前草蛋白质的提取条件进行优化研究。结果表明,碱提蛋白法的蛋白质得率高于盐提蛋白法和Tris-HCl提蛋白法。碱提取蛋白质的优化工艺指标为:碱液浓度为1. 5%,浸提温度为60℃,抽提时间为60 min,固液比为1:10。
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关键词
车前草
蛋白质提取方法
正交试验
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分类号
R284.2
[医药卫生—中药学]
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题名土壤宏蛋白质组学之土壤蛋白质提取技术的发展
被引量：3
- 3
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作者
熊艺
林欣萌
兰平
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机构
土壤与农业可持续发展国家重点实验室(中国科学院南京土壤研究所)
南京农业大学资源与环境科学学院
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出处
《土壤》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期835-843,共9页
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基金
国家重点基础研究发展计划(973计划)项目(No.2015CB150501)
国家重点研发计划项目(2016YFD0200308)资助
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文摘
随着土壤宏基因组学的日益成熟和发展,作为后基因组时代重要技术平台的土壤宏蛋白质组学越来越受到关注。土壤宏蛋白质组学的研究是解析土壤宏基因功能的重要手段之一,对于碳氮磷的生物地球化学循环以及土壤有机质积累的研究具有重大价值,可将蛋白信息与相关的生态系统过程联系起来。但是,土壤蛋白含量少,样品复杂程度高,极大限制了土壤蛋白的分离提取和进一步分析。因此,通过改进和优化土壤蛋白的提取技术,得到高浓度的蛋白是土壤宏蛋白质组学研究的前提条件。本文总结了近几年来土壤蛋白提取方法,并对其适用的土壤性质以及适用的不同种类和功能的蛋白进行了分析。此外,本文也对现有的土壤蛋白提取技术以及土壤蛋白鉴定技术的方法改进进行了探讨。
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关键词
土壤蛋白质
宏蛋白质组学
蛋白质提取方法
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Keywords
Soil protein
Proteomics
Protein extraction methods
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分类号
S154.3
[农业科学—土壤学]
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题名蛋白质技术在甘薯病毒病研究的应用
被引量：2
- 4
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作者
任凤仪
房伯平
高峰
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机构
广东省农科院作物研究所
华南师范大学
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出处
《广东农业科学》
CAS
CSCD
2008年第S1期59-62,共4页
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基金
国家科技基础条件平台项目(2005DKA2100205)
农业部保种项目(NB08-2130135-14)
欧盟INCO_DEV项目(ICA4-CT-2000-30005)
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文摘
甘薯病毒病是甘薯主要病害之一,对甘薯生产造成严重危害,是甘薯生产的一大问题。甘薯病毒种类多并且侵染存在复杂性给甘薯病毒研究以及防治带来困难。应用抗病毒蛋白是植物病毒病防治策略之一。通过对甘薯病毒、植物抗病毒蛋白相关研究以及蛋白质提取方法等方面的进展进行了综述,介绍蛋白质技术在甘薯病毒病中的应用。
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关键词
甘薯病毒
抗病毒蛋白
蛋白质提取方法
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分类号
S435.31
[农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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题名叶用莴苣叶片总蛋白质双向电泳影响因素的研究
被引量：2
- 5
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作者
陈曙红
韩莹琰
范双喜
李洋
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机构
北京农学院植物科学技术学院
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出处
《北京农学院学报》
2012年第2期14-16,共3页
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基金
北京市自然科学基金项目
北京市自然科学基金项目(6112005)
+2 种基金
北京市教育委员会科技计划重点项目(KZ200710020009)
北京市科技新星计划项目(2010B020)
北京市属高等学校人才强教计划资助项目(PH2009071365)
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文摘
以叶用莴苣叶片为试材,研究17cm固相pH梯度胶条(pH 4～7)体系下双向电泳不同的提取方法、上样体积、定量方法等影响因素,力求确定其理想的双向电泳条件。结果表明,酚-甲醇/醋酸铵沉淀法对蛋白质提取更彻底,效果更好。对于蛋白质定量的试验,相比于常规的Bradford方法,利用无干扰蛋白质定量试剂盒具有更好的准确性。考虑叶片总蛋白质中大量Rubisco的存在,应相对增加上样量,采用考马斯亮蓝染色时取800μg到1 100μg蛋白质进行双向电泳比较合理。
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关键词
叶用莴苣
叶片
蛋白质提取方法
双向电泳技术
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Keywords
Lettuce（Lactuca Sativa L. ）
Leaf
Protein extraction method
2-DE
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分类号
S636.2
[农业科学—蔬菜学]
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题名棉花纤维蛋白双向电泳体系的建立
被引量：2
- 6
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作者
王娟
倪志勇
石庆华
吕萌
李波
白岩
范玲
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机构
新疆农科院核生所
新疆农业大学农学院
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出处
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期31-35,共5页
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基金
国家自然科学基金项目(30660088)
国家"863"项目(2006AA10Z184)
+1 种基金
新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目(200611101)
农业部转基因重大专项课题(2009ZX08005-011B)
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文摘
【目的】探索一套适合于棉花纤维蛋白的双向电泳技术,为研究棉花纤维发育的蛋白质组学奠定基础。【方法】以陆地棉徐州142为材料,比较了三种不同蛋白质提取方法以及不同裂解液组成对双向电泳的影响,并在蛋白上样量和染色方法等方面进行了探索与优化。【结果】利用饱和酚-甲醇醋酸铵法提取的棉花纤维蛋白,其蛋白含量较高,且SDS-PAGE电泳条带清晰;样品溶解于含有硫脲和CHAPS的裂解液中,其蛋白溶解度增加;不同的蛋白上样量比较结果表明,第一向等电聚焦固相pH梯度胶条(7 cm)的最适上样量为300μg;同时,经改良后的考马斯亮蓝染-脱色后,2-D图谱的背景清晰,分辨蛋白斑点数增加。【结论】研究建立了一套适用于棉花纤维蛋白总蛋白质组分析的双向电泳方法。
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关键词
棉花
纤维蛋白
蛋白质提取方法
双向电泳技术
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Keywords
cotton
fibre protein
protein extraction
double direction Gel Electrophoresis
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分类号
S562.035.2
[农业科学—作物学]
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