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题名蛋白质提取分离分析及米氏常数测定的实践及效果
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作者
贾昊冉
韩朋
张彦桃
张立全
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机构
内蒙古大学生命科学学院
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出处
《安徽农学通报》
2025年第13期118-121,共4页
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基金
内蒙古自治区高等学校科学技术研究重点项目(NJZZ22331)
内蒙古大学实验技术研究项目(SYJS2025019)。
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文摘
蛋白质提取分离分析及米氏常数(K_(m))测定是生物化学实验教学大纲中的综合性实验课程内容。本次实验实践以市售绿豆芽茎段为材料,利用研磨法提取其总蛋白,采用BCA法、SDS-PAGE电泳法测定总蛋白浓度和分布;以对硝基苯磷酸二钠(PNPP-Na_(2))为底物,在酸性条件[37℃,0.2 mol/L HAc-NaAc缓冲液(pH 5.6)]下测定了总蛋白中酸性磷酸酶的米氏常数。结果表明,绿豆芽茎段总蛋白浓度为4.374 mg/mL,在酸性条件下,总蛋白中酸性磷酸酶的K_(m)为5.5525 mmol/L,酶促反应最大速度(Vm)为0.0743 mmol/(L·min)。该实践强化了学生对蛋白质提取分离、定量分析及米氏常数测定等基础理论知识的理解,使其掌握了蛋白质提取分离和SDS-PAGE电泳等实验技术,并激发了其对科学研究的兴趣和热情。
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关键词
生物化学
蛋白质提取及测定
米氏常数
绿豆芽
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Keywords
Biochemistry
extraction and determination of protein
Michaelis constant
mung bean sprouts
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分类号
G642.1
[文化科学—高等教育学]
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