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基于M13噬菌体展示单链抗体文库的新型蛋白质均衡器的研制及其在肾病患者尿蛋白分析中的应用
被引量:
1
1
作者
赵鹏
陶定银
+2 位作者
梁振
张丽华
张玉奎
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期249-253,共5页
通过将展示单链抗体(scFv)文库的M13噬菌体固定于冷凝胶整体柱表面制备了一种新型蛋白质均衡器。由于展示的scFv片段具有种类多、数目大以及与蛋白质结合的特异性强等优点,因此其非常适合用于复杂蛋白质样品的预处理。将肾病患者尿蛋白...
通过将展示单链抗体(scFv)文库的M13噬菌体固定于冷凝胶整体柱表面制备了一种新型蛋白质均衡器。由于展示的scFv片段具有种类多、数目大以及与蛋白质结合的特异性强等优点,因此其非常适合用于复杂蛋白质样品的预处理。将肾病患者尿蛋白在平衡器上反复上样5次后,依次使用2mol/LNaCl、50mmol/LGly-HCl(pH2.5)和凝血酶溶液洗脱与均衡器结合的蛋白质,收集各馏分,并采用串联微柱反相液相色谱-电喷雾质谱进行蛋白质的分离鉴定。与未经均衡器处理的样品相比,鉴定的蛋白质数目由142个提高到396个。此外,凝胶电泳的分析结果显示,在上样流出液中蛋白质的浓度差异明显变小,大量的高丰度蛋白质存在于NaCl洗脱液中。上述结果表明,基于M13噬菌体展示scFv文库的新型蛋白质均衡器能够有效减小样品中蛋白质的浓度差异,有利于发现更多的低丰度蛋白质。
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关键词
蛋白质均衡器
M13噬菌体展示单链抗体文库
串联微柱反相液相色谱-电喷雾质谱
蛋白质
肾病患者
尿
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题名
基于M13噬菌体展示单链抗体文库的新型蛋白质均衡器的研制及其在肾病患者尿蛋白分析中的应用
被引量:
1
1
作者
赵鹏
陶定银
梁振
张丽华
张玉奎
机构
中国科学院大连化学物理研究所
出处
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期249-253,共5页
基金
国家重大科学研究计划(2007CB914100)
中国科学院知识创新工程重要方向性项目(KJCX2YW.H09)
文摘
通过将展示单链抗体(scFv)文库的M13噬菌体固定于冷凝胶整体柱表面制备了一种新型蛋白质均衡器。由于展示的scFv片段具有种类多、数目大以及与蛋白质结合的特异性强等优点,因此其非常适合用于复杂蛋白质样品的预处理。将肾病患者尿蛋白在平衡器上反复上样5次后,依次使用2mol/LNaCl、50mmol/LGly-HCl(pH2.5)和凝血酶溶液洗脱与均衡器结合的蛋白质,收集各馏分,并采用串联微柱反相液相色谱-电喷雾质谱进行蛋白质的分离鉴定。与未经均衡器处理的样品相比,鉴定的蛋白质数目由142个提高到396个。此外,凝胶电泳的分析结果显示,在上样流出液中蛋白质的浓度差异明显变小,大量的高丰度蛋白质存在于NaCl洗脱液中。上述结果表明,基于M13噬菌体展示scFv文库的新型蛋白质均衡器能够有效减小样品中蛋白质的浓度差异,有利于发现更多的低丰度蛋白质。
关键词
蛋白质均衡器
M13噬菌体展示单链抗体文库
串联微柱反相液相色谱-电喷雾质谱
蛋白质
肾病患者
尿
Keywords
protein equalizer
single chain variable fragment (scFv) display M13 phage library
liquid chromatography-electrospray tandem mass spectrometry (LC-ESI-MS/MS) with a serially coupled long microcolumn
protein
nephropathy patient
urine
分类号
O658 [理学—分析化学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于M13噬菌体展示单链抗体文库的新型蛋白质均衡器的研制及其在肾病患者尿蛋白分析中的应用
赵鹏
陶定银
梁振
张丽华
张玉奎
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
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