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蛋白质/多肽片段互补分析法检测alpha-突触核蛋白在细胞中的聚集
1
作者
郑媛
渠静
+3 位作者
任晓曦
郑焱
杨慧
张建亮
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期1374-1378,共5页
Alpha-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)聚集是引起帕金森病(Parkinson’s disease,PD)发生发展主要原因。本文用蛋白质/多肽片段互补分析法(protein-fragment complementation assays,PCAs)检测α-syn在细胞内的聚集。分别构建融合α-...
Alpha-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)聚集是引起帕金森病(Parkinson’s disease,PD)发生发展主要原因。本文用蛋白质/多肽片段互补分析法(protein-fragment complementation assays,PCAs)检测α-syn在细胞内的聚集。分别构建融合α-syn与人工改造的荧光素酶human Gaussiaprinceps luciferase(h GLuc)蛋白N端或C端蛋白的质粒,共转入人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞,通过检测酶活性来确定野生型(wild type,WT)及A53T突变体α-syn在细胞中的聚集情况。结果表明WT和A53T突变α-syn都能使荧光素酶活性增强,而且与野生型α-syn相比,突变体A53T的荧光素酶活性更强,说明二者都能聚集,而且A53T聚集程度高于WT。PCAs法具有高灵敏度,不仅能检测α-syn在细胞内的聚集,而且能反映其聚集的程度,为研究帕金森病提供了研究思路和相应药物筛选的有效工具。
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关键词
Α-突触核
蛋白
聚集
蛋白质/多肽片段互补分析法
荧光素酶
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职称材料
分析超速离心-沉降速率法研究蛋白质-蛋白质相互作用
2
作者
常卿
褚文丹
+3 位作者
芦亚菲
杨姊
曲娜
李文奇
《生物学杂志》
北大核心
2025年第5期111-116,共6页
分析超速离心-沉降速率法(AUC-SV)是一种用于确定溶液中分子大小和形状的经典生物物理技术,可以根据分子之间在相互作用过程中形成的复合物的数量、大小、化学计量学和亲和力来描述它们之间的相互作用。通过AUC-SV建立免疫相关的重要标...
分析超速离心-沉降速率法(AUC-SV)是一种用于确定溶液中分子大小和形状的经典生物物理技术,可以根据分子之间在相互作用过程中形成的复合物的数量、大小、化学计量学和亲和力来描述它们之间的相互作用。通过AUC-SV建立免疫相关的重要标记分子免疫球蛋白Fc区受体IIb(CD32b)和人IgG1抗体的Fc之间的受体和配体相互作用分析的方法,并与表面等离子共振(SPR)技术和微量热泳动(MST)技术等体外相互作用分析方法进行平行比较,进一步验证了SV-AUC研究蛋白质-蛋白质相互作用的方法可靠性。
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关键词
分析
超速离心-沉降速率
法
蛋白质
-
蛋白质
相互作用
免疫球
蛋白
Fc区受体IIb
抗体Fc
片段
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职称材料
外来入侵植物加拿大一枝黄花居群间遗传差异分析
被引量：
31
3
作者
黄华
郭水良
《植物研究》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第2期197-204,共8页
采用三种不同的方法提取外来入侵植物加拿大一枝黄花总DNA,并应用RAPD技术分析了浙沪地区4个加拿大一枝黄花居群间的遗传分化。结果表明: (1) 2×CTAB法提取的DNA具有较好的完整性,能较好地去除蛋白质、酚类和多糖杂质,是比较适合...
采用三种不同的方法提取外来入侵植物加拿大一枝黄花总DNA,并应用RAPD技术分析了浙沪地区4个加拿大一枝黄花居群间的遗传分化。结果表明: (1) 2×CTAB法提取的DNA具有较好的完整性,能较好地去除蛋白质、酚类和多糖杂质,是比较适合加拿大一枝黄花总DNA提取的方法; (2)加拿大一枝黄花的遗传多态性非常高, 13个引物在4个居群中共检测到102条扩增片段,多态带84条,多态率达到82. 35%;特有带41条,占40. 20%。居群之间的多态性分别是上海嘉定(73. 13% ) >嘉兴乍浦(68. 97% ) >杭州(68. 42% ) >金华(57. 14% ); (3)13个引物检测的平均纯合度(J)为0. 38,平均杂合度(H)为0. 62; (4)Nei基因相似系数、聚类分析和主成分分析表明,加拿大一枝黄花不同居群间的遗传差异程度较大,居群间的遗传分化与地理位置存在对应关系; (5)加拿大一枝黄花的入侵居群的适应性进化与杂草特性紧密相关。
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关键词
加拿大一枝黄花
外来入侵植物
居群
差异
分析
总DNA提取
遗传分化
CTAB
法
遗传多态性
平均杂合度
适应性进化
技术
分析
RAPD
扩增
片段
相似系数
聚类
分析
遗传差异
对应关系
地理位置
蛋白质
纯合度
i基因
分析
表
主成分
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职称材料
题名
蛋白质/多肽片段互补分析法检测alpha-突触核蛋白在细胞中的聚集
1
作者
郑媛
渠静
任晓曦
郑焱
杨慧
张建亮
机构
首都医科大学基础医学院神经生物学系北京脑重大疾病研究院帕金森病研究所教育部神经变性病重点实验室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期1374-1378,共5页
基金
国家自然科学基金(No.31271136
31571202)
+1 种基金
北京市属高等学校青年拔尖人才培养计划(No.CIT&TCD201504087)
北京市教委科技计划(No.KZ201210025020)资助~~
文摘
Alpha-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)聚集是引起帕金森病(Parkinson’s disease,PD)发生发展主要原因。本文用蛋白质/多肽片段互补分析法(protein-fragment complementation assays,PCAs)检测α-syn在细胞内的聚集。分别构建融合α-syn与人工改造的荧光素酶human Gaussiaprinceps luciferase(h GLuc)蛋白N端或C端蛋白的质粒,共转入人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞,通过检测酶活性来确定野生型(wild type,WT)及A53T突变体α-syn在细胞中的聚集情况。结果表明WT和A53T突变α-syn都能使荧光素酶活性增强,而且与野生型α-syn相比,突变体A53T的荧光素酶活性更强,说明二者都能聚集,而且A53T聚集程度高于WT。PCAs法具有高灵敏度,不仅能检测α-syn在细胞内的聚集,而且能反映其聚集的程度,为研究帕金森病提供了研究思路和相应药物筛选的有效工具。
关键词
Α-突触核
蛋白
聚集
蛋白质/多肽片段互补分析法
荧光素酶
Keywords
α-synuclein
aggregation
protein-fragment complementation assays
luciferase
分类号
R34 [医药卫生—基础医学]
Q789 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
分析超速离心-沉降速率法研究蛋白质-蛋白质相互作用
2
作者
常卿
褚文丹
芦亚菲
杨姊
曲娜
李文奇
机构
清华大学蛋白质研究技术中心
清华大学生命科学学院
清华大学北京生物结构前沿研究中心
石家庄科技职业学院
出处
《生物学杂志》
北大核心
2025年第5期111-116,共6页
基金
北京生物结构前沿研究中心资助项目(997019045)。
文摘
分析超速离心-沉降速率法(AUC-SV)是一种用于确定溶液中分子大小和形状的经典生物物理技术,可以根据分子之间在相互作用过程中形成的复合物的数量、大小、化学计量学和亲和力来描述它们之间的相互作用。通过AUC-SV建立免疫相关的重要标记分子免疫球蛋白Fc区受体IIb(CD32b)和人IgG1抗体的Fc之间的受体和配体相互作用分析的方法,并与表面等离子共振(SPR)技术和微量热泳动(MST)技术等体外相互作用分析方法进行平行比较,进一步验证了SV-AUC研究蛋白质-蛋白质相互作用的方法可靠性。
关键词
分析
超速离心-沉降速率
法
蛋白质
-
蛋白质
相互作用
免疫球
蛋白
Fc区受体IIb
抗体Fc
片段
Keywords
AUC-SV
PPI
CD32b
Fc
分类号
Q512.2 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
外来入侵植物加拿大一枝黄花居群间遗传差异分析
被引量：
31
3
作者
黄华
郭水良
机构
浙江师范大学化学与生命科学学院
出处
《植物研究》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第2期197-204,共8页
基金
国家自然科学基金项目(30170619)
教育部"高等学校骨干教师资助计划"(1821)
上海市教委科研项目(04DB17)
文摘
采用三种不同的方法提取外来入侵植物加拿大一枝黄花总DNA,并应用RAPD技术分析了浙沪地区4个加拿大一枝黄花居群间的遗传分化。结果表明: (1) 2×CTAB法提取的DNA具有较好的完整性,能较好地去除蛋白质、酚类和多糖杂质,是比较适合加拿大一枝黄花总DNA提取的方法; (2)加拿大一枝黄花的遗传多态性非常高, 13个引物在4个居群中共检测到102条扩增片段,多态带84条,多态率达到82. 35%;特有带41条,占40. 20%。居群之间的多态性分别是上海嘉定(73. 13% ) >嘉兴乍浦(68. 97% ) >杭州(68. 42% ) >金华(57. 14% ); (3)13个引物检测的平均纯合度(J)为0. 38,平均杂合度(H)为0. 62; (4)Nei基因相似系数、聚类分析和主成分分析表明,加拿大一枝黄花不同居群间的遗传差异程度较大,居群间的遗传分化与地理位置存在对应关系; (5)加拿大一枝黄花的入侵居群的适应性进化与杂草特性紧密相关。
关键词
加拿大一枝黄花
外来入侵植物
居群
差异
分析
总DNA提取
遗传分化
CTAB
法
遗传多态性
平均杂合度
适应性进化
技术
分析
RAPD
扩增
片段
相似系数
聚类
分析
遗传差异
对应关系
地理位置
蛋白质
纯合度
i基因
分析
表
主成分
Keywords
invasive plant
Solidago canadensis
total DNA extraction
RAPD
genetic diversity
分类号
Q949.718.2 [生物学—植物学]
S451.0 [农业科学—植物保护]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
蛋白质/多肽片段互补分析法检测alpha-突触核蛋白在细胞中的聚集
郑媛
渠静
任晓曦
郑焱
杨慧
张建亮
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
分析超速离心-沉降速率法研究蛋白质-蛋白质相互作用
常卿
褚文丹
芦亚菲
杨姊
曲娜
李文奇
《生物学杂志》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
外来入侵植物加拿大一枝黄花居群间遗传差异分析
黄华
郭水良
《植物研究》
CAS
CSCD
北大核心
2005
31
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职称材料
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