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北沙参补骨脂素合成酶基因 GlPS1 原核表达载体的构建和蛋白诱导表达被引量：2: 1; 作者张馨方宋洁洁 +3 位作者徐瑶田雪梅谭玲玲高婷《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2023年第2期118-123,共6页; 北沙参(Glehniae Radix)为伞形科植物珊瑚菜(Glehnia littoralis)的干燥根,具有良好的药用价值和较高的经济价值。补骨脂素(psoralen)是北沙参香豆素类化合物主要的活性成分之一,对白血病细胞有较强的杀伤作用,对支气管平滑肌有舒张作... 展开更多; 关键词北沙参 GlPS1基因原核表达载体构建蛋白诱导表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

烟草 HSP18.1 基因生信分析及非生物胁迫下表达分析: 2; 作者刘晨魏进彬 +6 位作者宋凯臧志鹏高玉珍杨红静任维贤张建栋王祯《安徽农业科学》 2025年第1期113-122,共10页; 以秦烟1号无菌幼苗为供试材料克隆出HSP18.1基因的CDS区,构建重组质粒,对该基因蛋白进行诱导表达及表达条件优化,通过生物信息学分析,研究其在不同组织中非生物胁迫表达。结果表明:该基因属于HSP20家族,全长615 bp,CDS全长579 bp,编码19... 展开更多; 关键词烟草 HSP18.1基因生物信息学蛋白诱导表达热胁迫; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪细小病毒VP2重组蛋白的诱导表达及表达产物的纯化: 3; 作者孙超高莹 +3 位作者丁晨佟洋范慧张宏玲《今日畜牧兽医》 2018年第10期10-11,共2页; 将构建好的重组质粒转化宿主菌BL21,利用IPTG(1mmol/L)诱导实现了VP2蛋白主要抗原域的高效表达,表达产物经SDS-PAGE电泳鉴定其表达形式;经滤膜、饱和硫酸铵、Ni-NTA树脂层析进行纯化。结果表明:重组质粒得到高效诱导表达,并且重组蛋白... 展开更多; 关键词猪细小病毒 VP2重组蛋白的诱导表达纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

ISG15蛋白泛素结合酶UBCH6的原核表达及多克隆抗体制备被引量：4: 4; 作者李玉霄唐榕泽 +5 位作者高跃美冯佳佳李晓泉梁晶晶李晓宁罗廷荣《动物医学进展》北大核心 2020年第12期28-33,共6页; 通过抽提接毒猪瘟病毒(CSFV)的PK-15细胞RNA,以RT-PCR方法克隆UBCH6基因,并与pMD18-T载体连接,再通过双酶切法将UBCH6基因与原核表达载体pGEX-4T-1、真核表达载体pcDNA3.0连接。重组原核表达载体pGEX-UBCH6用感受态细胞BL21转化,并在低... 展开更多; 关键词 ISG15蛋白 UBCH6基因多克隆抗体猪瘟病毒蛋白诱导表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

烧伤小鼠IFIT1表达的初步观察被引量：3: 5; 作者李洪涛粟永萍 +3 位作者 Jian-ming XU 王军平艾国平程天民《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第22期2250-2252,共3页; 目的观察烧伤小鼠干扰素诱导表达蛋白IFIT1的表达变化，初步探究其表达变化的原因。方法实验小鼠致TBSA 15％Ⅱ度烧伤，1d及7d后处死，取肝、肺及脾组织。脂多糖掺入小鼠腹腔巨噬细胞株RAW264．7的培养基中，至终浓度0．1～1．0μg/m... 展开更多; 关键词干扰素诱导表达蛋白烧伤脂多糖细胞应激; 在线阅读下载PDF 职称材料

肥城桃果实2-Cys Prx基因克隆、生物信息学分析及原核表达: 6; 作者张永淋高彬 +1 位作者周杰朱树华《华北农学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期50-55,共6页; 为了深入研究2-Cys Prx基因调控桃果实氧化还原信号分子作用机制,结合了PCR技术和RT-PCR技术通过体外克隆的方法得到桃果实2-Cys Prx基因,通过对序列分析表明,2-Cys Prx基因全长1 424 bp,其中,编码区813 bp,共编码270个氨基酸。对其分... 展开更多; 关键词桃果实 2-Cys Prx 基因克隆蛋白诱导表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡β-防御素7的克隆与表达被引量：1: 7; 作者张开娟云骜 +2 位作者杨猛卢艳王文华《现代畜牧科技》 2018年第6期1-4,共4页; 防御素在抗生素取代方面有良好的发展前景,但目前在防御素大规模表达方面仍有难点。本实验着重探究如何实现防御素的大规模表达。实验通过设计目的基因引物、PCR扩增目的基因、将鸡β-防御素7(AvBD7)基因克隆到大肠杆菌BL21表达载体质粒... 展开更多; 关键词 Β-防御素原核表达蛋白质诱导表达蛋白质检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名北沙参补骨脂素合成酶基因 GlPS1 原核表达载体的构建和蛋白诱导表达被引量：2: 1; 作者张馨方宋洁洁徐瑶田雪梅谭玲玲高婷; 机构青岛农业大学生命科学学院/山东省高校植物生物技术重点实验室山东省鄄城县第二中学; 出处《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2023年第2期118-123,共6页; 基金国家自然科学基金(81903748)。; 文摘北沙参(Glehniae Radix)为伞形科植物珊瑚菜(Glehnia littoralis)的干燥根,具有良好的药用价值和较高的经济价值。补骨脂素(psoralen)是北沙参香豆素类化合物主要的活性成分之一,对白血病细胞有较强的杀伤作用,对支气管平滑肌有舒张作用。补骨脂素合成酶(GlPS)是北沙参补骨脂素生物合成途径的最后一步关键酶。本试验通过PCR扩增获得对北沙参补骨脂素合成酶基因GlPS1,通过酶切、连接、转化、平板培养和提取质粒构建原核表达载体;将构建好的表达载体转入大肠杆菌BL21(DE3)中,实现GlPS1基因的IPTG诱导原核表达。该研究表明被诱导表达的GlPS1蛋白存在于菌体沉淀中,不溶于上清液。研究结果为验证GlPS1基因的功能及使用基因工程方法调控GlPS1蛋白表达奠了基础。; 关键词北沙参 GlPS1基因原核表达载体构建蛋白诱导表达; Keywords Glehniae Radix GlPS1 gene construction of prokaryotic expression vector protein induced expression; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名烟草 HSP18.1 基因生信分析及非生物胁迫下表达分析: 2; 作者刘晨魏进彬宋凯臧志鹏高玉珍杨红静任维贤张建栋王祯; 机构甘肃烟草工业有限责任公司技术研发中心; 出处《安徽农业科学》 2025年第1期113-122,共10页; 基金中烟实业科技项目(ZYSY-2022-4)。; 文摘以秦烟1号无菌幼苗为供试材料克隆出HSP18.1基因的CDS区,构建重组质粒,对该基因蛋白进行诱导表达及表达条件优化,通过生物信息学分析,研究其在不同组织中非生物胁迫表达。结果表明:该基因属于HSP20家族,全长615 bp,CDS全长579 bp,编码192个氨基酸,且含多个磷酸化和糖基化位点,二级结构以无规则卷曲为主;烟草HSP18.1蛋白与拟南芥HSP18.1蛋白同源,且与多个蛋白相互作用。系统发育表明,烟草HSP18.1与文冠果的亲缘关系较近,与小米椒的亲缘关系较远;在热胁迫下NtHSP18.1基因在根、茎叶中被强烈诱导表达,表明NtHSP18.1基因是调节植物耐热性的关键。; 关键词烟草 HSP18.1基因生物信息学蛋白诱导表达热胁迫; Keywords Tobacco HSP18.1 gene Bioinformatics Protein induced expression Heat stress; 分类号 S572 [农业科学—烟草工业]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪细小病毒VP2重组蛋白的诱导表达及表达产物的纯化: 3; 作者孙超高莹丁晨佟洋范慧张宏玲; 机构吉林农业科技学院动物科技学院; 出处《今日畜牧兽医》 2018年第10期10-11,共2页; 基金吉林农业科技学院大学生科技创新创业训练计划项目(083号); 文摘将构建好的重组质粒转化宿主菌BL21,利用IPTG(1mmol/L)诱导实现了VP2蛋白主要抗原域的高效表达,表达产物经SDS-PAGE电泳鉴定其表达形式;经滤膜、饱和硫酸铵、Ni-NTA树脂层析进行纯化。结果表明:重组质粒得到高效诱导表达,并且重组蛋白以包涵体的形式存在;获得高纯度的重组蛋白。; 关键词猪细小病毒 VP2重组蛋白的诱导表达纯化; 分类号 S852.659.2 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名ISG15蛋白泛素结合酶UBCH6的原核表达及多克隆抗体制备被引量：4: 4; 作者李玉霄唐榕泽高跃美冯佳佳李晓泉梁晶晶李晓宁罗廷荣; 机构广西大学动物科学技术学院动物传染病研究室亚热带农业生物资源保护利用国家重点实验室; 出处《动物医学进展》北大核心 2020年第12期28-33,共6页; 基金国家自然科学基金项目(31660722) 广西自然科学基金项目(2017GXNSFAA198137) 国家重点研发计划项目(2018YFD0500104)。; 文摘通过抽提接毒猪瘟病毒(CSFV)的PK-15细胞RNA,以RT-PCR方法克隆UBCH6基因,并与pMD18-T载体连接,再通过双酶切法将UBCH6基因与原核表达载体pGEX-4T-1、真核表达载体pcDNA3.0连接。重组原核表达载体pGEX-UBCH6用感受态细胞BL21转化,并在低温条件下,用低浓度的IPTG诱导表达UBCH6重组蛋白,经SDS-PAGE电泳和考马斯亮蓝染色结果显示,在30℃、用0.05 mmol/L IPTG诱导时UBCH6表达效果最好,而且UBCH6重组蛋白主要以可溶性的形式在菌液中表达。UBCH6重组蛋白经过Ni-NTA纯化后与弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂等体积混合乳化并免疫4周龄昆明小鼠,从而制备出UBCH6多克隆抗体,重组真核表达载体pcDNA3.0-UBCH6以化学转染人工脂质体法导入293T细胞中,Western blot检测制备的UBCH6多克隆抗体能与真核表达细胞蛋白发生反应,反应效价可达1∶10000,反应性良好。Western blot检测UBCH6多克隆抗体的特异性,ISG15多克隆抗体、UBCH6多克隆抗体都能与接毒CSFV、转染PolyI:C的PK-15细胞蛋白发生良好反应,且蛋白表达量与时间呈正相关。; 关键词 ISG15蛋白 UBCH6基因多克隆抗体猪瘟病毒蛋白诱导表达; Keywords ISG15 protein UBCH6 gene polyclonal antibody Classical swine fever virus protein induced expression; 分类号 S852.43 [农业科学—基础兽医学] S852.651 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名烧伤小鼠IFIT1表达的初步观察被引量：3: 5; 作者李洪涛粟永萍 Jian-ming XU 王军平艾国平程天民; 机构第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室 Dept. of Molecular and Cellular Biology; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第22期2250-2252,共3页; 基金国家重点基础研究发展规划资助项目("973"项目)(G1999054201) 海外青年学者合作研究基金资助项目(30328025)~~; 文摘目的观察烧伤小鼠干扰素诱导表达蛋白IFIT1的表达变化，初步探究其表达变化的原因。方法实验小鼠致TBSA 15％Ⅱ度烧伤，1d及7d后处死，取肝、肺及脾组织。脂多糖掺入小鼠腹腔巨噬细胞株RAW264．7的培养基中，至终浓度0．1～1．0μg/ml，作用6h。提取组织及细胞RNA，进行半定量逆转录-聚合酶链式反应，提取组织及细胞裂解上清，进行免疫印迹检测。结果小鼠肝、肺、脾组织IFIT1的转录在烧伤后1d升高，伤后7d恢复至伤前水平；肝、肺、脾IFIT1的蛋白水平在伤后1d一致升高，伤后7d仍能检出升高。体外实验，细菌脂多糖显著激活RAW264．7细胞的IFIT1转录及蛋白表达。结论烧伤小鼠伤后早期IFIT1表达迅速升高，此变化与同期的内毒素血症引起的细胞应激有关。; 关键词干扰素诱导表达蛋白烧伤脂多糖细胞应激; Keywords interferon induced protein burn injury lipopolysaccharide cell stress; 分类号 R341 [医药卫生—基础医学] R394-33 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名肥城桃果实2-Cys Prx基因克隆、生物信息学分析及原核表达: 6; 作者张永淋高彬周杰朱树华; 机构山东农业大学化学与材料科学学院; 出处《华北农学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期50-55,共6页; 基金国家自然科学基金项目(31370686); 文摘为了深入研究2-Cys Prx基因调控桃果实氧化还原信号分子作用机制,结合了PCR技术和RT-PCR技术通过体外克隆的方法得到桃果实2-Cys Prx基因,通过对序列分析表明,2-Cys Prx基因全长1 424 bp,其中,编码区813 bp,共编码270个氨基酸。对其分子结构进行分析,2-Cys Prx蛋白分子量为29.7 ku,为疏水型蛋白,且是膜外蛋白。在线软件预测2-Cys Prx蛋白分子式为C1342H2110N348O403S4,分子量29.696 ku,由4 207个原子组成,理论等电点为6.23。使用Prot Scale分析该蛋白疏水性平均值为-0.126,说明2-Cys Prx为亲水性蛋白。TMHMM对跨膜结构进行预测,发现,2-Cys Prx氨基酸序列中不存在跨膜结构域,为膜外蛋白。此外,对该蛋白二级结构进行预测,发现2-Cys Prx有4个α螺旋结构、9个β折叠结构及无规则卷曲构成。系统进化树分析表明,肥城桃果实2-Cys Prx与其他植物氨基酸序列有较高同源性,其中与樱桃的亲缘关系最近,相似度达到了98.15%,表明植物体内2-Cys Prx具有较高的保守性。体外构建重组蛋白p ET-30a-2-Cys Prx成功在大肠杆菌BL21中表达,为下一步研究其功能与结构,从而探讨2-Cys Prx基因调控桃果实氧化还原信号作用机理奠定了基础。; 关键词桃果实 2-Cys Prx 基因克隆蛋白诱导表达; Keywords Peach fruit；2-Cys Prx；Gene cloning；Protein induced expression; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] S662.03 [农业科学—果树学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡β-防御素7的克隆与表达被引量：1: 7; 作者张开娟云骜杨猛卢艳王文华; 机构山东农业大学动物科技学院; 出处《现代畜牧科技》 2018年第6期1-4,共4页; 文摘防御素在抗生素取代方面有良好的发展前景,但目前在防御素大规模表达方面仍有难点。本实验着重探究如何实现防御素的大规模表达。实验通过设计目的基因引物、PCR扩增目的基因、将鸡β-防御素7(AvBD7)基因克隆到大肠杆菌BL21表达载体质粒pET32a中、扩增大肠杆菌、对鸡AvBD7基因进行鉴定、分离纯化目的蛋白并进行检测的过程方法,完成重组鸡AvBD7基因的克隆与表达,得到鸡AvBD7基因可以在大肠杆菌BL21中表达的结论,为鸡AvBD7基因的进一步临床应用打下基础。; 关键词 Β-防御素原核表达蛋白质诱导表达蛋白质检测; 分类号 S831.2 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	北沙参补骨脂素合成酶基因 GlPS1 原核表达载体的构建和蛋白诱导表达	张馨方宋洁洁徐瑶田雪梅谭玲玲高婷	《青岛农业大学学报（自然科学版）》	2023	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	烟草 HSP18.1 基因生信分析及非生物胁迫下表达分析	刘晨魏进彬宋凯臧志鹏高玉珍杨红静任维贤张建栋王祯	《安徽农业科学》	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	猪细小病毒VP2重组蛋白的诱导表达及表达产物的纯化	孙超高莹丁晨佟洋范慧张宏玲	《今日畜牧兽医》	2018	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	ISG15蛋白泛素结合酶UBCH6的原核表达及多克隆抗体制备	李玉霄唐榕泽高跃美冯佳佳李晓泉梁晶晶李晓宁罗廷荣	《动物医学进展》北大核心	2020	4	在线阅读下载PDF 职称材料
5	烧伤小鼠IFIT1表达的初步观察	李洪涛粟永萍 Jian-ming XU 王军平艾国平程天民	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	肥城桃果实2-Cys Prx基因克隆、生物信息学分析及原核表达	张永淋高彬周杰朱树华	《华北农学报》 CSCD 北大核心	2018	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	鸡β-防御素7的克隆与表达	张开娟云骜杨猛卢艳王文华	《现代畜牧科技》	2018	1	在线阅读下载PDF 职称材料