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HCA518的蛋白表达、纯化和单克隆抗体的制备被引量：1: 1; 作者杨小昂钱晓萍 +2 位作者孙秀媛邵启祥陈慰峰《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期29-32,共4页; 目的:对HCA518蛋白进行表达和纯化,并制备HCA518蛋白的单克隆抗体。方法:采用基因重组技术在原核系统表达HCA518蛋白,金属镍螯合的Ni-NAT亲和层析柱进行蛋白纯化;杂交瘤技术建立分泌HCA518单克隆抗体的杂交瘤细胞株;ELISA方法进行单克... 展开更多; 关键词蛋白表达和纯化肿瘤相关抗原 HCA518 单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡补体受体2基因克隆、蛋白表达纯化及其多克隆抗体的制备和鉴定被引量：3: 2; 作者孔子萌江波 +3 位作者蔡云虹何后军李永清靳换《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第1期201-208,共8页; 为初步鉴定鸡补体受体2(ChCR2)基因,本试验设计特异性引物,利用RT-PCR方法扩增ChCR 2基因。利用同源臂连接的方法构建去掉跨膜区的ChCR2-△TM基因的原核表达载体pGEX-6P-1-ChCR2-△TM、pET-32a-ChCR2-△TM和真核表达载体pCMV-HA-ChCR2-... 展开更多; 关键词 ChCR2基因蛋白表达和纯化多克隆抗体 ELISA 间接免疫荧光 Western BLOTTING; 在线阅读下载PDF 职称材料

猫传染性腹膜炎病毒N蛋白的原核表达及多抗制备被引量：6: 3; 作者牛铮徐沙沙 +7 位作者张静怡张依玲阚子斐张淑娟邹宏邹卓岚冉玲宋振辉《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1-9,共9页; 猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)是冠状病毒中的重要成员,也是引起猫传染性腹膜炎的主要病原.参考GenBank数据库中FIPV核衣壳蛋白基因序列,设计特异性引物,以病料组织中提取的RNA为模板,反转录成cDNA,通过PCR特异性扩增N基因序列,将其克隆至pM... 展开更多; 关键词猫传染性腹膜炎病毒蛋白表达和纯化多克隆抗体制备特异性鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

兔抗人硒蛋白P抗体的制备与鉴定被引量：6: 4; 作者房青张明程 +5 位作者查园园毕胜利李志伟杨建国小祝修林晨《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期91-94,共4页; 目的 :以原核表达的人硒蛋白P片段 (HSelP)制备其兔多克隆抗体并进行鉴定。方法 :在E .coli中诱导表达HSelP片段 ,经DEAEfastflow和Ni NTA Agarose柱层析纯化后 ,以其为免疫原制备兔抗HSelP抗体 ,并以Westernblot鉴定抗体的特异性。结... 展开更多; 关键词人硒蛋白P 蛋白表达和纯化多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

人CD112(Nectin2/PRR2)单克隆抗体的制备和鉴定被引量：1: 5; 作者邓虎平庄然 +4 位作者宋朝君田莹贾卫张赟金伯泉《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期356-358,362,共4页; 目的：表达和纯化CD112 胞膜外区重组蛋白, 制备针对CD112胞膜外区的单克隆抗体（mAb）, 并且研究CD112的分布.方法：采用基因重组技术在真核系统表达CD112-Fc融合蛋白, 亲和层析法进行蛋白纯化;纯化的CD112-Fc融合蛋白免疫BALB/c小鼠,... 展开更多; 关键词 CD112(Nectin2、PRR2) 蛋白表达和纯化 MAB; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HCA518的蛋白表达、纯化和单克隆抗体的制备被引量：1: 1; 作者杨小昂钱晓萍孙秀媛邵启祥陈慰峰; 机构北京大学医学部免疫学系; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期29-32,共4页; 基金国家973重点基础研究发展规划基金(2003CB514100)国家自然科学基金(30340011)资助; 文摘目的:对HCA518蛋白进行表达和纯化,并制备HCA518蛋白的单克隆抗体。方法:采用基因重组技术在原核系统表达HCA518蛋白,金属镍螯合的Ni-NAT亲和层析柱进行蛋白纯化;杂交瘤技术建立分泌HCA518单克隆抗体的杂交瘤细胞株;ELISA方法进行单克隆抗体细胞株的筛选;Westem blot方法鉴定单克隆抗体的特异性;免疫荧光法对HCA518蛋白进行定位。结果:成功表达和纯化了HCA518重组蛋白,其纯度达98％。共筛选出2株分泌HCA518单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备腹水并纯化了HCA518的单克隆抗体,腹水中单克隆抗体的效价分别为1×10-4、5×10-4,属于IgG2b亚型和IgM,该抗体能与重组蛋白和肿瘤细胞核蛋白(P100)发生特异性反应,免疫荧光显示HCA518蛋白主要定位于细胞核中。结论:建立了稳定分泌HCA518单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备的单克隆抗体特异性好,对进一步应用于检测肿瘤组织中HCA518蛋白和判断肿瘤细胞的恶性增生程度预测肿瘤预后具有重要的实用价值。; 关键词蛋白表达和纯化肿瘤相关抗原 HCA518 单克隆抗体; Keywords Protein expression and purification Tumor associated antigen HCAS18 Monoclonal antibody; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡补体受体2基因克隆、蛋白表达纯化及其多克隆抗体的制备和鉴定被引量：3: 2; 作者孔子萌江波蔡云虹何后军李永清靳换; 机构江西农业大学动物科学技术学院北京市农林科学院; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第1期201-208,共8页; 基金国家自然科学基金面上项目(31672588) 北京市博士后科研活动经费资助项目(2018-XX-053) +1 种基金北京市农林科学院科技创新能力建设专项(KJCX201914); 文摘为初步鉴定鸡补体受体2(ChCR2)基因,本试验设计特异性引物,利用RT-PCR方法扩增ChCR 2基因。利用同源臂连接的方法构建去掉跨膜区的ChCR2-△TM基因的原核表达载体pGEX-6P-1-ChCR2-△TM、pET-32a-ChCR2-△TM和真核表达载体pCMV-HA-ChCR2-△TM,将两个原核质粒转入大肠杆菌表达系统中表达GST-ChCR2-△TM和His-ChCR2-△TM蛋白。将纯化后的GST-ChCR2-△TM蛋白免疫BALB/c小鼠制备血清多克隆抗体,以His-ChCR2-△TM蛋白为包被原,ELISA检测血清多克隆抗体效价。利用间接免疫荧光试验和Western blotting对抗原抗体的特异结合性进行鉴定。结果显示,扩增到了一条大小为1113 bp的ChCR 2基因条带。成功构建了去掉跨膜区的原核表达载体pGEX-6P-1-ChCR2-△TM、pET-32a-ChCR2-△TM和真核表达载体pCMV-HA-ChCR2-△TM。诱导表达的GST-ChCR2-△TM蛋白在低温(16℃)诱导条件下可溶,而His-ChCR2-△TM蛋白以包涵体的形式存在。经ELISA测定,GST-ChCR2-△TM蛋白免疫的BALB/c小鼠血清效价为1∶512000。间接免疫荧光试验和Western blotting结果显示,制备的抗GST-ChCR2-△TM蛋白血清多克隆抗体可与ChCR2蛋白发生特异性结合。本研究结果为ChCR 2基因的进一步鉴定及鸡乃至禽类的相关免疫学研究提供了参考依据。; 关键词 ChCR2基因蛋白表达和纯化多克隆抗体 ELISA 间接免疫荧光 Western BLOTTING; Keywords ChCR2 gene expression and purification of protein polyclonal antibody ELISA indirect immunofluorescence assay Western blotting; 分类号 S831 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猫传染性腹膜炎病毒N蛋白的原核表达及多抗制备被引量：6: 3; 作者牛铮徐沙沙张静怡张依玲阚子斐张淑娟邹宏邹卓岚冉玲宋振辉; 机构西南大学动物医学院西南大学医学研究院免疫学研究中心; 出处《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1-9,共9页; 基金科技部引智计划基金资助项目(G20190022030) 重庆市研究生科研创新项目(CYS19137) 中央高校基本业务专项(XDJK2020RC001).; 文摘猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)是冠状病毒中的重要成员,也是引起猫传染性腹膜炎的主要病原.参考GenBank数据库中FIPV核衣壳蛋白基因序列,设计特异性引物,以病料组织中提取的RNA为模板,反转录成cDNA,通过PCR特异性扩增N基因序列,将其克隆至pMD19-T载体并转化至Trans5α感受态细胞,经筛选、菌液PCR与限制酶双酶切鉴定后,获得重组克隆质粒pMD19-T-N.以pMD19-T-N为模板,亚克隆N基因,将其与Pet-28a载体连接后转化至表达菌株Rosetta感受态细胞,完成Pet-28a-N重组表达质粒的构建.用IPTG诱导N蛋白表达,将纯化后的重组N蛋白皮下多点注射免疫比利时兔,制备多克隆抗体.最终通过Western-Blot与免疫组化技术检测多克隆抗体的特异性.FIPV N蛋白多克隆抗体的制备,为猫传染性腹膜炎的进一步研究及临床治疗提供了必备的实验材料.; 关键词猫传染性腹膜炎病毒蛋白表达和纯化多克隆抗体制备特异性鉴定; Keywords feline infectious peritonitis virus protein expression and purification polyclonal antibody preparation specificity identification; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名兔抗人硒蛋白P抗体的制备与鉴定被引量：6: 4; 作者房青张明程查园园毕胜利李志伟杨建国小祝修林晨; 机构中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肝炎室北京市营养源研究所日本东京理工大学理工学部; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期91-94,共4页; 基金北京市自然科学基金资助 (No .70 0 2 0 0 7); 文摘目的 :以原核表达的人硒蛋白P片段 (HSelP)制备其兔多克隆抗体并进行鉴定。方法 :在E .coli中诱导表达HSelP片段 ,经DEAEfastflow和Ni NTA Agarose柱层析纯化后 ,以其为免疫原制备兔抗HSelP抗体 ,并以Westernblot鉴定抗体的特异性。结果 :成功地表达并纯化了HSelP ,制备的兔抗HSelP抗体可有效地检测天然的SelP。结论 :以原核表达并纯化的HSelP为免疫原 ,成功地制备了兔抗该蛋白的抗体 ,Westernblot鉴定特异性良好。为进一步研究硒蛋白P的功能。; 关键词人硒蛋白P 蛋白表达和纯化多克隆抗体; Keywords human selenoprotein P prokaryotic expression antibody; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人CD112(Nectin2/PRR2)单克隆抗体的制备和鉴定被引量：1: 5; 作者邓虎平庄然宋朝君田莹贾卫张赟金伯泉; 机构第四军医大学免疫学教研室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期356-358,362,共4页; 基金国家自然科学基金面上项目(30672370 30500219); 文摘目的：表达和纯化CD112 胞膜外区重组蛋白, 制备针对CD112胞膜外区的单克隆抗体（mAb）, 并且研究CD112的分布.方法：采用基因重组技术在真核系统表达CD112-Fc融合蛋白, 亲和层析法进行蛋白纯化;纯化的CD112-Fc融合蛋白免疫BALB/c小鼠, 杂交瘤技术建立分泌CD112 mAb的杂交瘤细胞株, 间接ELISA、 Western blot及FCM鉴定mAb 的特异性.用流式细胞术（FCM）检测 CD112 的细胞系分布.结果：构建了高效真核表达载体pIg3C-CD112, 表达并纯化了CD112-Fc融合蛋白, 其纯度大于 90%.以纯化重组蛋白为免疫原共制备9株分泌抗CD112 mAb的杂交瘤细胞株（命名为FMU-CD112.1 ～FMU-CD112.9）, 制备腹水并纯化 mAb.FMU-CD112.1、 3、 6和8能用于Western blot, FMU-CD112.1、 4、 6和8可用于 FCM.CD112细胞分布检测显示该分子主要分布在正常上皮及内皮细胞系、巨核细胞谱系和部分T细胞系, 并高表达于上皮及内皮来源的肿瘤、胶质瘤等细胞系.结论：成功地表达纯化了CD112-Fc融合蛋白并建立了稳定分泌CD112 mAb的杂交瘤细胞株, 为CD112的功能研究打下坚实的基础.; 关键词 CD112(Nectin2、PRR2) 蛋白表达和纯化 MAB; Keywords CD112 （Nectin2, PRR2） protein expression and purification monoclonal antibody（mAb）; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	HCA518的蛋白表达、纯化和单克隆抗体的制备	杨小昂钱晓萍孙秀媛邵启祥陈慰峰	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2006	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	鸡补体受体2基因克隆、蛋白表达纯化及其多克隆抗体的制备和鉴定	孔子萌江波蔡云虹何后军李永清靳换	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2020	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	猫传染性腹膜炎病毒N蛋白的原核表达及多抗制备	牛铮徐沙沙张静怡张依玲阚子斐张淑娟邹宏邹卓岚冉玲宋振辉	《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2021	6	在线阅读下载PDF 职称材料
4	兔抗人硒蛋白P抗体的制备与鉴定	房青张明程查园园毕胜利李志伟杨建国小祝修林晨	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2004	6	在线阅读下载PDF 职称材料
5	人CD112(Nectin2/PRR2)单克隆抗体的制备和鉴定	邓虎平庄然宋朝君田莹贾卫张赟金伯泉	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2007	1	在线阅读下载PDF 职称材料