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重组胶原蛋白表达体系研究进展
被引量:
7
1
作者
潘家豪
潘炜松
+3 位作者
邱健
谢东玲
邹奇
吴川
《合成生物学》
CSCD
2023年第4期808-823,共16页
胶原蛋白是哺乳动物中含量最多的蛋白质,至今已发现28种类型,主要分为纤维性胶原蛋白、网状胶原蛋白、珠状丝状胶原蛋白、锚定纤维蛋白、膜蛋白以及multiplexins胶原蛋白,其中纤维性胶原蛋白中Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型胶原蛋白占人体胶原蛋白的...
胶原蛋白是哺乳动物中含量最多的蛋白质,至今已发现28种类型,主要分为纤维性胶原蛋白、网状胶原蛋白、珠状丝状胶原蛋白、锚定纤维蛋白、膜蛋白以及multiplexins胶原蛋白,其中纤维性胶原蛋白中Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型胶原蛋白占人体胶原蛋白的80%~90%。目前,根据来源,胶原蛋白大致分为动物源胶原蛋白和重组胶原蛋白。动物源胶原蛋白主要来源于陆生动物以及海洋动物,而重组胶原蛋白是指将人胶原蛋白基因克隆到选定的表达载体并转化到表达细胞内,最后通过纯化技术所获得的蛋白质。本文简述了胶原蛋白的结构、类别和生物合成机制,重点阐述了重组胶原蛋白表达体系及特点,包括原核生物、酵母、植物、杆状病毒以及哺乳动物细胞等表达体系及其优势与局限性,介绍了重组胶原蛋白市场前景及在眼科、软骨工程、皮肤治疗等生物医药方面的实际应用,并对重组胶原蛋白的研究和产业发展进行了展望。
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关键词
胶原
蛋白
基因工程
重组胶原
蛋白表达体系
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职称材料
谷胱甘肽合成酶系基因协调表达体系的构建
被引量:
1
2
作者
尧辉
魏东芝
+2 位作者
周宇荀
沈立新
刘寿春
《华东理工大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第2期144-148,共5页
通过 PCR获得 E.coli B谷胱甘肽合成酶系基因 ( gsh I,gsh II)片段 ,结合定点突变稀有起始密码子 ,设定 gsh I与 gsh II位置与距离 ,构建双顺反子重组表达载体 p Trc99A/gsh I- gsh II,建立GSHI、GSH- II蛋白表达体系。结果表明 :以 0 ....
通过 PCR获得 E.coli B谷胱甘肽合成酶系基因 ( gsh I,gsh II)片段 ,结合定点突变稀有起始密码子 ,设定 gsh I与 gsh II位置与距离 ,构建双顺反子重组表达载体 p Trc99A/gsh I- gsh II,建立GSHI、GSH- II蛋白表达体系。结果表明 :以 0 .0 8mmol/L IPTG于 2 8℃诱导工程菌 E.coli BL2 1( DE3) ( p Trc99A/gsh I- gsh II) ,GSH- I、GSH- II蛋白比为 4.5∶ 1 ( m∶ m)时谷胱甘肽合成能力最高 ,达到每克湿菌体 8.5 mg。通过构建单顺反子重组表达载体 p Trc99A/gsh I、p Trc99A/gsh II测定GSH- I与 GSH- II蛋白的最适配比 ,结果表明 :在 GSH- I、GSH- II蛋白总量恒定的情况下 ,要提高谷胱甘肽产率 ,两者比例以 3∶ 1~ 6∶
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关键词
谷胱甘肽
合成酶系
蛋白表达体系
双顺反子重组
表达
载体
协调
表达
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职称材料
绿色荧光蛋白在枯草芽孢杆菌WB600中的表达
3
作者
雍婕
杨辉
+2 位作者
肖红仕
田云
周海燕
《生物产业技术》
2019年第5期71-75,共5页
根据绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的特性,将GFP作为目的基因,与穿梭载体pHY300PLK结合,构建一个芽孢杆菌WB600的蛋白表达体系,为在枯草芽孢杆菌中表达其他蛋白提供了一定的技术和理论支持。本文结合pHY300PLK的克隆位点...
根据绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的特性,将GFP作为目的基因,与穿梭载体pHY300PLK结合,构建一个芽孢杆菌WB600的蛋白表达体系,为在枯草芽孢杆菌中表达其他蛋白提供了一定的技术和理论支持。本文结合pHY300PLK的克隆位点,设计gfp基因的引物,PCR扩增后回收的gfp基因片段进行双酶切,与相同双酶切的pHY300PLK连接获得pHY300PLK-GFP,通过电转化将pHY300PLK-GFP转化至芽孢杆菌WB600中并检测。获得转化子WB1,检测到转化子在荧光显微镜下显示绿色荧光,且后续测序检测表明重组质粒构建成功。
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关键词
芽孢杆菌WB600
荧光
蛋白
蛋白表达体系
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职称材料
草莓FaMRLK47蛋白原核表达条件优化
被引量:
1
4
作者
张卿
邢宇
+1 位作者
曹庆芹
秦岭
《北京农学院学报》
2018年第1期10-14,共5页
【目的】优化草莓FaMRLK47蛋白原核表达条件并在研究中应用。【方法】以八倍体草莓‘红颜’(Fragaria×ananassa Duch.‘Benihoppe’)为试材,对比研究异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)在0.5m...
【目的】优化草莓FaMRLK47蛋白原核表达条件并在研究中应用。【方法】以八倍体草莓‘红颜’(Fragaria×ananassa Duch.‘Benihoppe’)为试材,对比研究异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)在0.5mmol/L和1mmol/L处理,对比分析0、2、4、6、8、12h等不同时间FaMRLK47蛋白诱导表达效率和产量。【结果】IPTG在1mmol/L下诱导8h,FaMRLK47蛋白的表达效率和产量高。【结论】优化草莓FaMRLK47原核诱导表达体系并检测FaMRLK47与寡糖的特异性结合。
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关键词
FaMRLK47
草莓
蛋白
原核
表达
体系
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职称材料
题名
重组胶原蛋白表达体系研究进展
被引量:
7
1
作者
潘家豪
潘炜松
邱健
谢东玲
邹奇
吴川
机构
中南大学冶金与环境学院
湖南诺合新生物科技有限公司
中南大学湘雅医院
华南师范大学生命科学学院
出处
《合成生物学》
CSCD
2023年第4期808-823,共16页
基金
国家自然科学基金(31670955)
中南大学前沿交叉项目(2023QYJC035)。
文摘
胶原蛋白是哺乳动物中含量最多的蛋白质,至今已发现28种类型,主要分为纤维性胶原蛋白、网状胶原蛋白、珠状丝状胶原蛋白、锚定纤维蛋白、膜蛋白以及multiplexins胶原蛋白,其中纤维性胶原蛋白中Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型胶原蛋白占人体胶原蛋白的80%~90%。目前,根据来源,胶原蛋白大致分为动物源胶原蛋白和重组胶原蛋白。动物源胶原蛋白主要来源于陆生动物以及海洋动物,而重组胶原蛋白是指将人胶原蛋白基因克隆到选定的表达载体并转化到表达细胞内,最后通过纯化技术所获得的蛋白质。本文简述了胶原蛋白的结构、类别和生物合成机制,重点阐述了重组胶原蛋白表达体系及特点,包括原核生物、酵母、植物、杆状病毒以及哺乳动物细胞等表达体系及其优势与局限性,介绍了重组胶原蛋白市场前景及在眼科、软骨工程、皮肤治疗等生物医药方面的实际应用,并对重组胶原蛋白的研究和产业发展进行了展望。
关键词
胶原
蛋白
基因工程
重组胶原
蛋白表达体系
Keywords
collagen
gene engineering
recombinant collagen expression system
分类号
Q816 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
谷胱甘肽合成酶系基因协调表达体系的构建
被引量:
1
2
作者
尧辉
魏东芝
周宇荀
沈立新
刘寿春
机构
华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物化学研究所
DepartmentofVascularBiology
出处
《华东理工大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第2期144-148,共5页
基金
教育部高等学校重点实验室访问学者基金资助
上海市重点学科资助项目
上海市生物工程重点学科建设资助项目
文摘
通过 PCR获得 E.coli B谷胱甘肽合成酶系基因 ( gsh I,gsh II)片段 ,结合定点突变稀有起始密码子 ,设定 gsh I与 gsh II位置与距离 ,构建双顺反子重组表达载体 p Trc99A/gsh I- gsh II,建立GSHI、GSH- II蛋白表达体系。结果表明 :以 0 .0 8mmol/L IPTG于 2 8℃诱导工程菌 E.coli BL2 1( DE3) ( p Trc99A/gsh I- gsh II) ,GSH- I、GSH- II蛋白比为 4.5∶ 1 ( m∶ m)时谷胱甘肽合成能力最高 ,达到每克湿菌体 8.5 mg。通过构建单顺反子重组表达载体 p Trc99A/gsh I、p Trc99A/gsh II测定GSH- I与 GSH- II蛋白的最适配比 ,结果表明 :在 GSH- I、GSH- II蛋白总量恒定的情况下 ,要提高谷胱甘肽产率 ,两者比例以 3∶ 1~ 6∶
关键词
谷胱甘肽
合成酶系
蛋白表达体系
双顺反子重组
表达
载体
协调
表达
Keywords
glutathione
synthetase
protein expression system
two cistrons recombinant expression vector
coordinated expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
绿色荧光蛋白在枯草芽孢杆菌WB600中的表达
3
作者
雍婕
杨辉
肖红仕
田云
周海燕
机构
湖南农业大学生物科学技术学院
湖南省农业生物工程研究所
出处
《生物产业技术》
2019年第5期71-75,共5页
基金
湖南省研究生科研创新项目(CX2017B388)
湖南省自然科学基金(2016JJ4038)
湖南省教育厅科研项目(15K062)
文摘
根据绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的特性,将GFP作为目的基因,与穿梭载体pHY300PLK结合,构建一个芽孢杆菌WB600的蛋白表达体系,为在枯草芽孢杆菌中表达其他蛋白提供了一定的技术和理论支持。本文结合pHY300PLK的克隆位点,设计gfp基因的引物,PCR扩增后回收的gfp基因片段进行双酶切,与相同双酶切的pHY300PLK连接获得pHY300PLK-GFP,通过电转化将pHY300PLK-GFP转化至芽孢杆菌WB600中并检测。获得转化子WB1,检测到转化子在荧光显微镜下显示绿色荧光,且后续测序检测表明重组质粒构建成功。
关键词
芽孢杆菌WB600
荧光
蛋白
蛋白表达体系
Keywords
Bacillus subtilis WB600
f luorescent protein
protein expression system
分类号
Q816 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
草莓FaMRLK47蛋白原核表达条件优化
被引量:
1
4
作者
张卿
邢宇
曹庆芹
秦岭
机构
北京农学院植物科学技术学院/农业应用新技术北京市重点实验室
出处
《北京农学院学报》
2018年第1期10-14,共5页
基金
北京市自然科学基金重点项目(6171001)
科技北京领军人才培养计划(LJ201612)
+1 种基金
2016年北京市教委科研计划一般项目(PXM2016-014207-000008)
2017年北京市农委菜篮子工程提升项目
文摘
【目的】优化草莓FaMRLK47蛋白原核表达条件并在研究中应用。【方法】以八倍体草莓‘红颜’(Fragaria×ananassa Duch.‘Benihoppe’)为试材,对比研究异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)在0.5mmol/L和1mmol/L处理,对比分析0、2、4、6、8、12h等不同时间FaMRLK47蛋白诱导表达效率和产量。【结果】IPTG在1mmol/L下诱导8h,FaMRLK47蛋白的表达效率和产量高。【结论】优化草莓FaMRLK47原核诱导表达体系并检测FaMRLK47与寡糖的特异性结合。
关键词
FaMRLK47
草莓
蛋白
原核
表达
体系
Keywords
FaMRLK47
strawberry
protein prokaryotic expression system
分类号
Q946.1 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组胶原蛋白表达体系研究进展
潘家豪
潘炜松
邱健
谢东玲
邹奇
吴川
《合成生物学》
CSCD
2023
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
谷胱甘肽合成酶系基因协调表达体系的构建
尧辉
魏东芝
周宇荀
沈立新
刘寿春
《华东理工大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2002
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
绿色荧光蛋白在枯草芽孢杆菌WB600中的表达
雍婕
杨辉
肖红仕
田云
周海燕
《生物产业技术》
2019
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
草莓FaMRLK47蛋白原核表达条件优化
张卿
邢宇
曹庆芹
秦岭
《北京农学院学报》
2018
1
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职称材料
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