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GALNT14与MT2A相互作用验证
1
作者
左涛
刘学敏
+2 位作者
单金帅
汤静珍
吴琛
《河北大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2016年第1期65-71,共7页
利用免疫共沉淀(Co-IP)和蛋白沉降实验(GST pull-down),分别从体内外对N-乙酰氨基半乳糖转移酶(GALNT14)与金属硫蛋白2A(MT2A)之间的相互作用进行了验证.将MT2A全长c DNA片段克隆到p ET-Dsb A和p CMV-Myc载体上.表达并纯化了His-Dsba-M...
利用免疫共沉淀(Co-IP)和蛋白沉降实验(GST pull-down),分别从体内外对N-乙酰氨基半乳糖转移酶(GALNT14)与金属硫蛋白2A(MT2A)之间的相互作用进行了验证.将MT2A全长c DNA片段克隆到p ET-Dsb A和p CMV-Myc载体上.表达并纯化了His-Dsba-MT2A和GST-GALNT14蛋白,在体外通过GST pulldown技术分析,显示MT2A能与GALNT14结合,证实了二者在体外的直接相互作用.继而,共转染p CMVMyc-MT2A和p CDNA3.1-Flag-GALNT14到人乳腺癌细胞株MCF-7中,通过免疫共沉淀实验发现抗Myc抗体可以将GALNT14从细胞裂解液中沉淀下来,证实了它们在胞内的相互作用.结果显示了GALNT14和MT2A在体内外条件下能够发生直接相互作用,这为进一步明确GALNT14的功能及作用机制奠定了基础.
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关键词
N-乙酰氨基半乳糖转移酶14(GALNT14)
金属硫
蛋白
2A(MT2A)
蛋白
沉降
实验
(
gstpull-down
)
免疫共沉淀(Co-IP)
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职称材料
题名
GALNT14与MT2A相互作用验证
1
作者
左涛
刘学敏
单金帅
汤静珍
吴琛
机构
河北大学生命科学学院
出处
《河北大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2016年第1期65-71,共7页
基金
河北省自然科学基金资助项目(C2013201112)
河北省教育厅优秀青年基金资助项目(Y2012024)
文摘
利用免疫共沉淀(Co-IP)和蛋白沉降实验(GST pull-down),分别从体内外对N-乙酰氨基半乳糖转移酶(GALNT14)与金属硫蛋白2A(MT2A)之间的相互作用进行了验证.将MT2A全长c DNA片段克隆到p ET-Dsb A和p CMV-Myc载体上.表达并纯化了His-Dsba-MT2A和GST-GALNT14蛋白,在体外通过GST pulldown技术分析,显示MT2A能与GALNT14结合,证实了二者在体外的直接相互作用.继而,共转染p CMVMyc-MT2A和p CDNA3.1-Flag-GALNT14到人乳腺癌细胞株MCF-7中,通过免疫共沉淀实验发现抗Myc抗体可以将GALNT14从细胞裂解液中沉淀下来,证实了它们在胞内的相互作用.结果显示了GALNT14和MT2A在体内外条件下能够发生直接相互作用,这为进一步明确GALNT14的功能及作用机制奠定了基础.
关键词
N-乙酰氨基半乳糖转移酶14(GALNT14)
金属硫
蛋白
2A(MT2A)
蛋白
沉降
实验
(
gstpull-down
)
免疫共沉淀(Co-IP)
Keywords
N -acetylgalactosaminyltransferase 14 （ GALNT14 ）
metallothionein 2A （MT2A）
gstpull-down
assay（GST pull-down）
co-immunoprecitipation analysis（Co-IP）
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
GALNT14与MT2A相互作用验证
左涛
刘学敏
单金帅
汤静珍
吴琛
《河北大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2016
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