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单细胞蛋白表达定量分析技术在造血干细胞异质性检测中的应用
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作者 李淑惠 容婵 +3 位作者 梁翠莎 李小波 唐亚犁 张选红 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期527-531,共5页
目的利用单细胞蛋白表达定量分析技术建立研究造血干细胞(HSC)异质性的方法.方法将不表达绿色荧光蛋白(GFP)的小鼠HSC(HSC-GFP-)与表达绿色荧光蛋白的小鼠HSC(HSC-GFP+)按1∶1比例混合,采用单细胞蛋白表达定量分析技术:通过标准孔径芯... 目的利用单细胞蛋白表达定量分析技术建立研究造血干细胞(HSC)异质性的方法.方法将不表达绿色荧光蛋白(GFP)的小鼠HSC(HSC-GFP-)与表达绿色荧光蛋白的小鼠HSC(HSC-GFP+)按1∶1比例混合,采用单细胞蛋白表达定量分析技术:通过标准孔径芯片捕获HSC单细胞,在单细胞蛋白质分离模块(Milo系统)进行细胞裂解、蛋白电泳及紫外照射激活芯片内交联物质;芯片中的蛋白与相应抗体发生免疫反应,再与荧光标记的二抗结合;最后通过双荧光通道扫描模块采集荧光信号成像、运用Scout软件分析每个细胞中表达β微管蛋白(β-tubulin)和GFP的蛋白条带吸光度值,得到表达蛋白的细胞数及细胞中蛋白水平表达分布以分析细胞异质性.通过表达GFP及β-tubulin的细胞数计算转染GFP的细胞得率,与流式细胞术检测结果相比对验证.结果单细胞蛋白表达定量分析技术检测表达GFP的小鼠HSC比例为44.20%,流式细胞术检测结果为42.528%;细胞中GFP表达水平分布在(0.42~7.35)×10^(5)之间,表明存在细胞异质性.结论单细胞蛋白表达定量分析技术可用于HSC异质性的检测. 展开更多
关键词 造血干细胞(HSC) 单细胞蛋白表达定量分析技术 细胞异质性
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Survivin在口腔鳞癌中的定量分析及平阳霉素对其表达的影响 被引量:4
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作者 陈中 张雨温 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期263-265,共3页
目的探讨Survivin在口腔鳞状细胞癌组织中的定量表达及平阳霉素化疗对该基因表达的影响。方法收集口腔鳞状细胞癌石蜡包埋组织44例,分化疗组22例,未化疗组22例,正常口腔黏膜组织8例3组。应用流式细胞术定量分析技术和单克隆抗体免疫荧... 目的探讨Survivin在口腔鳞状细胞癌组织中的定量表达及平阳霉素化疗对该基因表达的影响。方法收集口腔鳞状细胞癌石蜡包埋组织44例,分化疗组22例,未化疗组22例,正常口腔黏膜组织8例3组。应用流式细胞术定量分析技术和单克隆抗体免疫荧光间接法标记法,以荧光指数(FI)代表Survivin在口腔鳞细胞癌中的定量表达。对3组FI值行t检验。结果Survivin在正常黏膜组FI值为1.0±0.05,平阳霉素化疗组FI值为1.2±0.14,未化疗FI值为1.4±0.06。各组之间FI值均有显著性差异(P<0.01)。结论Survivin在口腔鳞状细胞癌组织中呈高表达,平阳霉素化疗使其含量下降。 展开更多
关键词 SURVIVIN 口腔黏膜鳞状细胞癌 凋亡抑制基因 流式细胞术 蛋白定量表达
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