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草莓FaMRLK47蛋白原核表达条件优化被引量：1: 1; 作者张卿邢宇 +1 位作者曹庆芹秦岭《北京农学院学报》 2018年第1期10-14,共5页; 【目的】优化草莓FaMRLK47蛋白原核表达条件并在研究中应用。【方法】以八倍体草莓‘红颜’(Fragaria×ananassa Duch.‘Benihoppe’)为试材,对比研究异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)在0.5m... 展开更多; 关键词 FaMRLK47 草莓蛋白原核表达体系; 在线阅读下载PDF 职称材料

间接ELISA检测非洲猪瘟病毒P22蛋白原核表达方法建立: 2; 作者刘桂升《吉林畜牧兽医》 2023年第8期1-2,共2页; 非洲猪瘟(ASF)是由属于Asfaviridae家族的非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的。本文主要研究间接ELISA(酶联免疫吸附测定)检测ASFV(非洲猪瘟病毒)P22蛋白原核表达方法建立,并得出了一定的实验成果,本研究中开发的基于重组p22∆TM/p30的间接ELISA... 展开更多; 关键词间接ELISA检测非洲猪瘟病毒 P22蛋白原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

红嘴鸥髓样分化因子88基因序列分析、蛋白表达及其多克隆抗体的制备: 3; 作者张宏莉王一涵 +2 位作者马俊蕊段纲常华《福建农业学报》北大核心 2025年第4期361-369,共9页; 【目的】分析红嘴鸥(Larus ridibundus)髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88, MyD88)基因序列并制备多克隆抗体,以期了解红嘴鸥MyD88蛋白的结构和功能,获得针对该物种天然免疫信号通路机制的研究工具。【方法】采用Trizo... 展开更多; 关键词红嘴鸥髓样分化因子88 序列分析蛋白原核表达多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

GST-Jab1融合蛋白表达载体的构建及表达纯化: 4; 作者黄瑾郑玉建 +1 位作者鲁重元万梅《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2007年第5期585-588,共4页; 目的获取GST-Jab1蛋白,进一步研究Jab1的功能。方法以pMSCVneo-Jab1为模板,PCR扩增Jab1 DNA片断,EcoRI和XhoI双酶切后克隆至pGEX-5X-1表达载体,测序验证。将正确重组的pGEX-5X-1-Jab1表达质粒转化E.coli BL21,IPTG诱导后,超声破碎细胞,... 展开更多; 关键词 JAB1 GST融合蛋白原核表达蛋白质纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

山羊IL-2的体外表达及其多克隆抗血清的制备被引量：4: 5; 作者海岗刘胜旺 +1 位作者韩宗玺陈洪岩《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期685-689,共5页; 应用RT-PCR方法从山羊外周血淋巴细胞中克隆了山羊白细胞介素-2(Caprine interleukin-2,CapIL-2)基因并进行测序,将编码山羊IL-2蛋白的基因亚克隆至pET30a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3)并用IPTG于37℃诱导培养。表达融合蛋白通过ProBondT... 展开更多; 关键词山羊IL-2 融合蛋白原核表达抗血清; 在线阅读下载PDF 职称材料

山羊IL-2基因的克隆、表达及其多克隆抗血清的制备: 6; 作者海岗刘胜旺陈洪岩《中国比较医学杂志》 CAS 2007年第8期I0060-I0060,共1页; 应用RT-PCR方法从山羊外周血淋巴细胞中克隆了山羊白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)基因并测序,将编码山羊白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)成熟蛋白的基因亚克隆至原核表达载体pET30a(+)上,构建重组质粒并进行确证性测定。然后将重... 展开更多; 关键词山羊IL-2 融合蛋白原核表达抗血清; 在线阅读下载PDF 职称材料

甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)的CUB1、CUB2片段多克隆抗体的制备及鉴定被引量：5: 7; 作者韩小东贾天军 +2 位作者贾晓晖李婷赵霞《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期689-692,696,共5页; 目的原核表达甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)的CUB1、CUB2功能区蛋白,制备其功能区蛋白的多克隆抗体并进行鉴定。方法利用带有CUB1、CUB2基因片段的p GEX-6P-2原核载体诱导表达GST-CUB1和GST-CUB2融合蛋白并进行纯化,将... 展开更多; 关键词 MASP-2 CUB1和CUB2功能区片段蛋白原核表达多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名草莓FaMRLK47蛋白原核表达条件优化被引量：1: 1; 作者张卿邢宇曹庆芹秦岭; 机构北京农学院植物科学技术学院/农业应用新技术北京市重点实验室; 出处《北京农学院学报》 2018年第1期10-14,共5页; 基金北京市自然科学基金重点项目(6171001) 科技北京领军人才培养计划(LJ201612) +1 种基金 2017年北京市农委菜篮子工程提升项目; 文摘【目的】优化草莓FaMRLK47蛋白原核表达条件并在研究中应用。【方法】以八倍体草莓‘红颜’(Fragaria×ananassa Duch.‘Benihoppe’)为试材,对比研究异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)在0.5mmol/L和1mmol/L处理,对比分析0、2、4、6、8、12h等不同时间FaMRLK47蛋白诱导表达效率和产量。【结果】IPTG在1mmol/L下诱导8h,FaMRLK47蛋白的表达效率和产量高。【结论】优化草莓FaMRLK47原核诱导表达体系并检测FaMRLK47与寡糖的特异性结合。; 关键词 FaMRLK47 草莓蛋白原核表达体系; Keywords FaMRLK47 strawberry protein prokaryotic expression system; 分类号 Q946.1 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名间接ELISA检测非洲猪瘟病毒P22蛋白原核表达方法建立: 2; 作者刘桂升; 机构茂名市科技事务中心; 出处《吉林畜牧兽医》 2023年第8期1-2,共2页; 文摘非洲猪瘟(ASF)是由属于Asfaviridae家族的非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的。本文主要研究间接ELISA(酶联免疫吸附测定)检测ASFV(非洲猪瘟病毒)P22蛋白原核表达方法建立,并得出了一定的实验成果,本研究中开发的基于重组p22∆TM/p30的间接ELISA显示出高重复性,具有可接受的诊断敏感性和特异性。值得注意的是,这种间接ELISA可以检测针对毒性基因Ⅱ型ASFV的抗体,而其他可用的试剂盒则不能。这些特征对于在毒力基因型II型ASFV流行的地区应用此类测试很有用。; 关键词间接ELISA检测非洲猪瘟病毒 P22蛋白原核表达; 分类号 S85 [农业科学—兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名红嘴鸥髓样分化因子88基因序列分析、蛋白表达及其多克隆抗体的制备: 3; 作者张宏莉王一涵马俊蕊段纲常华; 机构云南农业大学动物医学院; 出处《福建农业学报》北大核心 2025年第4期361-369,共9页; 基金云南省重大科技专项计划项目(202302AA310020、 202202AE090024) 云南农业大学校级一流本科课程项目(A1010103001、 2021YLKC017)。; 文摘【目的】分析红嘴鸥(Larus ridibundus)髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88, MyD88)基因序列并制备多克隆抗体,以期了解红嘴鸥MyD88蛋白的结构和功能,获得针对该物种天然免疫信号通路机制的研究工具。【方法】采用Trizol法提取红嘴鸥外周血淋巴细胞的总RNA,通过RT-PCR扩增MyD88基因,利用生物信息学软件对红嘴鸥MyD88基因的相似性、亲缘关系、蛋白理化性质、蛋白二级和三级结构等进行分析;构建红嘴鸥MyD88基因重组原核表达载体,转化获得MyD88重组蛋白原核表达菌株并优化诱导条件获得重组表达蛋白。采用Ni柱法、超滤法和梯度透析方式纯化重组蛋白,将其与弗氏佐剂乳化后免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体血清,通过双向琼脂扩散实验测定多抗血清滴度,同时通过SDS-PAGE和Western Blotting对MyD88重组蛋白多克隆抗体的特异性进行鉴定。【结果】红嘴鸥MyD88基因CDS区长921 bp,共编码306个氨基酸;该基因同三趾鸥(Rissa tridactyla)的基因相似性最高,为98.8%,同绿头鸭(Anas platyrhynchos)MyD88基因相似性较低,为84.6%;进化树结果表明,其与三趾鸥亲缘关系最近,同家禽类亲缘关系较远;其编码蛋白的分子大小约34.5 kDa,含1个N-糖基化位点和24个磷酸化位点,无信号肽和跨膜结构,属于亲水性蛋白;MyD88蛋白二级结构以无规则卷曲为主,三级结构与二级结构一致,且蛋白含有完整的死亡结构域和TIR结构域。红嘴鸥MyD88重组蛋白在37℃、1.0 mmoL·L^(-1)IPTG诱导4 h时表达最佳,大小为54 kDa。制备的多克隆抗体血清效价为1∶16,能识别红嘴鸥MyD88重组蛋白,具有较好的特异性。【结论】红嘴鸥MyD88基因编码蛋白为富含磷酸化位点且具有完整死亡结构域和TIR结构域的亲水性蛋白。红嘴鸥MyD88重组蛋白能在体外进行大量表达且具有较好的免疫原性,制备的多克隆抗体具有较好的特异性。; 关键词红嘴鸥髓样分化因子88 序列分析蛋白原核表达多克隆抗体; Keywords Larus ridibundus myeloid differentiation factor 88 sequence analysis protein prokaryotic expression polyclonal antibody; 分类号 S852.4 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名GST-Jab1融合蛋白表达载体的构建及表达纯化: 4; 作者黄瑾郑玉建鲁重元万梅; 机构新疆医科大学公共卫生学院阿拉巴马大学医学院病理系; 出处《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2007年第5期585-588,共4页; 基金美国NIH项目(CA112942-01)提供部分资助; 文摘目的获取GST-Jab1蛋白,进一步研究Jab1的功能。方法以pMSCVneo-Jab1为模板,PCR扩增Jab1 DNA片断,EcoRI和XhoI双酶切后克隆至pGEX-5X-1表达载体,测序验证。将正确重组的pGEX-5X-1-Jab1表达质粒转化E.coli BL21,IPTG诱导后,超声破碎细胞,用GST琼脂糖珠对上述表达产物进行纯化,SDS-PAGE、Western Blot分析和鉴定诱导表达和纯化的GST-Jab1蛋白质。结果成功构建了pGEX-5X-1-Jab1重组表达载体,SDS-PAGE分析结果显示表达和纯化的蛋白质与融合蛋白GST-Jab1预期分子量一致,Western Blot鉴定结果证实纯化的蛋白质为GST-Jab1。结论成功地表达、纯化了GST-Jab1融合蛋白。; 关键词 JAB1 GST融合蛋白原核表达蛋白质纯化; Keywords Jab1 expression of GST fusion protein in E.coli protein purification; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名山羊IL-2的体外表达及其多克隆抗血清的制备被引量：4: 5; 作者海岗刘胜旺韩宗玺陈洪岩; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期685-689,共5页; 文摘应用RT-PCR方法从山羊外周血淋巴细胞中克隆了山羊白细胞介素-2(Caprine interleukin-2,CapIL-2)基因并进行测序,将编码山羊IL-2蛋白的基因亚克隆至pET30a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3)并用IPTG于37℃诱导培养。表达融合蛋白通过ProBondTM蛋白纯化试剂盒纯化。纯化产物经3次免疫新西兰白兔,制备出山羊IL-2抗血清。本次试验成功地表达、纯化了山羊IL-2,并制备出兔抗山羊IL-2抗血清,为下一步开展山羊IL-2重组蛋白的应用研究奠定了基础。; 关键词山羊IL-2 融合蛋白原核表达抗血清; Keywords caprine IL-2 fusion protein prokaryotic expression antisera; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学] S852.43 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名山羊IL-2基因的克隆、表达及其多克隆抗血清的制备: 6; 作者海岗刘胜旺陈洪岩; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室; 出处《中国比较医学杂志》 CAS 2007年第8期I0060-I0060,共1页; 文摘应用RT-PCR方法从山羊外周血淋巴细胞中克隆了山羊白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)基因并测序,将编码山羊白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)成熟蛋白的基因亚克隆至原核表达载体pET30a(+)上,构建重组质粒并进行确证性测定。然后将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)并用IPTG于37℃诱导培养。表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在。SDS-PAGE分析显示,表达的山羊IL-2融合蛋白分子量约为18kD。包涵体被6mol/L盐酸胍裂解后,通过ProBondTM蛋白纯化试剂盒纯化。用所获得的重组山羊IL-2纯化产物经3次肌内注射新西兰白兔,制备了兔抗山羊IL-2多克隆血清,并用Western blot进行了证明。本次试验成功地表达、纯化了山羊IL-2融合蛋白,并制备了抗山羊IL-2多克隆抗血清,为下一阶段关于山羊IL-2重组蛋白生物学特性及其应用的研究打下了坚实的基础。; 关键词山羊IL-2 融合蛋白原核表达抗血清; 分类号 R512.6 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)的CUB1、CUB2片段多克隆抗体的制备及鉴定被引量：5: 7; 作者韩小东贾天军贾晓晖李婷赵霞; 机构河北北方学院医学检验学院病原生物与免疫学研究所; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期689-692,696,共5页; 基金河北北方学院校级重大课题(ZD201313); 文摘目的原核表达甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)的CUB1、CUB2功能区蛋白,制备其功能区蛋白的多克隆抗体并进行鉴定。方法利用带有CUB1、CUB2基因片段的p GEX-6P-2原核载体诱导表达GST-CUB1和GST-CUB2融合蛋白并进行纯化,将纯化后的融合蛋白作为抗原,与Freund佐剂充分混合后免疫5周龄BALB/c雌性小鼠,制备多克隆抗体;应用Western blot法检测多克隆抗体特异性,应用ELISA检测多克隆抗体效价。结果成功表达并纯化GST-CUB1和GST-CUB2蛋白;应用其作为抗原对小鼠进行免疫后,成功制备出与其相应的多克隆抗体,且特异性强,与其他蛋白无交叉反应;间接ELISA测得CUB1抗体效价大于1∶32 000,CUB2抗体效价大于1∶16 000。结论成功制备了特异性强,效价高的GST-CUB1和GST-CUB2蛋白多克隆抗体。; 关键词 MASP-2 CUB1和CUB2功能区片段蛋白原核表达多克隆抗体; Keywords mannan-binding lectin-associated serine protease-2 （MASP-2） CUB1 and CUB2 functional domains prokaryotic expression polyclonal antibody; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	草莓FaMRLK47蛋白原核表达条件优化	张卿邢宇曹庆芹秦岭	《北京农学院学报》	2018	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	间接ELISA检测非洲猪瘟病毒P22蛋白原核表达方法建立	刘桂升	《吉林畜牧兽医》	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	红嘴鸥髓样分化因子88基因序列分析、蛋白表达及其多克隆抗体的制备	张宏莉王一涵马俊蕊段纲常华	《福建农业学报》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	GST-Jab1融合蛋白表达载体的构建及表达纯化	黄瑾郑玉建鲁重元万梅	《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	山羊IL-2的体外表达及其多克隆抗血清的制备	海岗刘胜旺韩宗玺陈洪岩	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	4	在线阅读下载PDF 职称材料
6	山羊IL-2基因的克隆、表达及其多克隆抗血清的制备	海岗刘胜旺陈洪岩	《中国比较医学杂志》 CAS	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)的CUB1、CUB2片段多克隆抗体的制备及鉴定	韩小东贾天军贾晓晖李婷赵霞	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2015	5	在线阅读下载PDF 职称材料