期刊文献+
共找到8篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
蛋白质免疫印记分析法实验条件的研究 被引量:6
1
作者 姜彬 《实验技术与管理》 CAS 2008年第5期53-55,共3页
蛋白质免疫印记分析(western blotting)是研究和分析蛋白质的重要手段。该文简述了western blot-ting的方法及实验过程,从实际操作的角度,着重探讨了实验条件的控制、影响因素和优化实验结果的方法。这些从实际工作和预实验中总结出... 蛋白质免疫印记分析(western blotting)是研究和分析蛋白质的重要手段。该文简述了western blot-ting的方法及实验过程,从实际操作的角度,着重探讨了实验条件的控制、影响因素和优化实验结果的方法。这些从实际工作和预实验中总结出来的优化方法,可以使实验结果更加明晰和易于进一步的分析研究。 展开更多
关键词 蛋白免疫印记分析 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 丙烯酰胺 亚甲基双丙烯酰胺
在线阅读 下载PDF
Smad2/3/4真核表达质粒的构建及重组蛋白表达
2
作者 张红艳 王春玉 +3 位作者 姚远 李彦姝 王迪 李丰 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期202-206,共5页
目的:构建pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4真核表达质粒,证实融合蛋白在细胞内表达。方法:以pcDNA3.1-Smad2/3和pGEX2T-Smad4质粒为模板,设计特异性引物,PCR扩增Smad2/3/4全长编码基因,亚克隆至含有pcDNA3.1myc-HisA标签的真核表达载体中。... 目的:构建pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4真核表达质粒,证实融合蛋白在细胞内表达。方法:以pcDNA3.1-Smad2/3和pGEX2T-Smad4质粒为模板,设计特异性引物,PCR扩增Smad2/3/4全长编码基因,亚克隆至含有pcDNA3.1myc-HisA标签的真核表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到人胚胎肾细胞HEK293中,提取细胞蛋白进行Western blotting检测。结果:Smad2/3/4全长基因序列克隆到真核表达载体pcDNA3.1myc-HisA中,酶切鉴定片段为1 401、1 275和1 656 bp。Western blotting检测到融合蛋白pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4的表达。结论:成功构建pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4真核表达质粒,同时鉴定其融合蛋白的表达。 展开更多
关键词 SMAD 蛋白免疫印记 融合蛋白
在线阅读 下载PDF
MsWRKY33蛋白的抗体制备及对非生物逆境的响应 被引量:1
3
作者 张锦锦 王云平 +2 位作者 王筱 张书兴 王学敏 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2021年第6期63-70,共8页
为在蛋白水平上探索紫花苜蓿MsWRKY33在抗逆性上的生物学功能,以紫花苜蓿品种中苜1号为材料,克隆了MsWRKY33抗原序列并对其性质和功能进行初步分析。对MsWRKY33蛋白的结构和特性进行生物信息学分析表明,MsWRKY33蛋白全长511 aa,主要由... 为在蛋白水平上探索紫花苜蓿MsWRKY33在抗逆性上的生物学功能,以紫花苜蓿品种中苜1号为材料,克隆了MsWRKY33抗原序列并对其性质和功能进行初步分析。对MsWRKY33蛋白的结构和特性进行生物信息学分析表明,MsWRKY33蛋白全长511 aa,主要由无规则卷曲和延伸链结构组成,不具有信号肽,是一个亲水性蛋白,免疫原性预测结果表明该蛋白免疫原性较强。结合序列的特异性选取适宜区段247~457 aa,利用该区段经蛋白纯化、免疫等步骤制备了MsWRKY33多克隆抗体。后续又采用Western Blotting的方法,对4种非生物胁迫(高盐、冷、PEG、ABA)下MsWRKY33蛋白的表达情况进行分析,发现4种胁迫均能诱导MsWRKY33蛋白表达增强,其中盐胁迫的诱导表达丰度最高,表明MsWRKY33在调控植物的高盐逆境响应中可能具有重要作用。试验结果为深入探索紫花苜蓿MsWRKY33基因功能及其对非生物逆境的抗性调控机制提供依据。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 MsWRKY33 多克隆抗体 蛋白免疫印记 盐胁迫
在线阅读 下载PDF
Western blot检测家兔动脉组织蛋白质表达条件的优化 被引量:7
4
作者 马艳琴 孙子龙 +2 位作者 王彬 郭超 陈鹏晓 《农学学报》 2011年第4期52-56,共5页
蛋白质免疫印记技术是研究和分析蛋白质的重要手段,由于其步骤繁杂、影响因素众多,常出现背景噪音高、非特异条带多、拖尾等问题,严重影响后续蛋白质定量分析。为建立最佳的检测家兔动脉组织中蛋白质表达的蛋白质免疫印记技术实验条件,... 蛋白质免疫印记技术是研究和分析蛋白质的重要手段,由于其步骤繁杂、影响因素众多,常出现背景噪音高、非特异条带多、拖尾等问题,严重影响后续蛋白质定量分析。为建立最佳的检测家兔动脉组织中蛋白质表达的蛋白质免疫印记技术实验条件,以家兔动脉组织血管细胞粘附分子-1为目标蛋白,从电泳条件、抗体浓度、抗体孵育时间、温度及方法、免疫显色方法等方面进行了改良,成功建立了快速、灵敏、特异的蛋白质免疫印记技术体系;并比较了3种常用的酶免疫显色技术:3,3’-二氨基联苯胺(3,3’-diaminobenzidine,DAB)显色、增强化学发光法(enhanced chemil luminescence,ECL)X光片曝光及ECL化学发光冷却电感耦合成像系统(cooled charged-coupled device,CCD)成像的敏感性。结果表明ECL化学发光法比DAB显色法敏感性高出2~10倍,其中CCD系统敏感性高于X光片4倍,且操作简便,是最理想的检测方法。 展开更多
关键词 蛋白免疫印记技术 聚丙烯酰胺凝胶电泳 增强化学发光法 冷却电感耦合成像系统
在线阅读 下载PDF
链状亚历山大藻组蛋白H3基因克隆与生长过程中的表达分析
5
作者 刘昊昕 Sadaf Riaz +3 位作者 刘源 Anam Khurshid 张巍 隋正红 《海洋科学》 CAS 北大核心 2019年第11期19-27,共9页
链状亚历山大藻(Alexandrium catenella)是一种典型的产毒赤潮甲藻。甲藻曾被认为没有组蛋白,但近年来在多种甲藻中检测到全部四个核心组蛋白的活跃转录,而目前对甲藻中组蛋白表达模式与具体功能还缺乏深入的研究。本文报道了链状亚历... 链状亚历山大藻(Alexandrium catenella)是一种典型的产毒赤潮甲藻。甲藻曾被认为没有组蛋白,但近年来在多种甲藻中检测到全部四个核心组蛋白的活跃转录,而目前对甲藻中组蛋白表达模式与具体功能还缺乏深入的研究。本文报道了链状亚历山大藻组蛋白H3变体之一H3.c的全长ORF序列的克隆和分析;分析了链状亚历山大藻生长过程中组蛋白H3在基因和蛋白水平的表达。目前研究发现的链状亚历山大藻H3变体共三个,其中H3.b在N末端序列与其他物种差异最大,为链状亚历山大藻特有的H3变体。对数生长期的组蛋白H3在基因与蛋白水平上均活跃表达,但表达量并不会随着爆发性增长而显著变化,其中H3.b的基因表达在对数末期呈现上调;培养至衰亡期,各H3变体表达均下调,尤其在蛋白水平上呈现明显衰减。结合前期研究,本文认为链状亚历山大藻三个H3均为复制非依赖型(RI)变体,一些变体可响应伴随藻不断生长而逐渐增强的细胞密度等复杂胁迫,推测其参与某些表观遗传修饰,调控生长进程;而衰亡期基于H3的表观遗传调控受到抑制。 展开更多
关键词 链状亚历山大藻 蛋白H3 表观遗传调控 实时荧光定量PCR 蛋白免疫印记杂交
在线阅读 下载PDF
雌激素受体alpha和肿瘤转移相关因子1在胃癌细胞中的表达和共定位 被引量:2
6
作者 姚远 冯姝婷 +1 位作者 赵鸿梅 李艳 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期5-7,共3页
目的:观察雌激素受体alpha(ERα)和肿瘤转移相关因子1(MTA1)在胃癌细胞中的表达和共定位,探讨胃癌的发病机制。方法:提取BGC823、SGC7901胃癌细胞蛋白,利用Western blotting法检测内源性ERα和MTA1的表达,利用共聚焦激光扫描显微镜观察... 目的:观察雌激素受体alpha(ERα)和肿瘤转移相关因子1(MTA1)在胃癌细胞中的表达和共定位,探讨胃癌的发病机制。方法:提取BGC823、SGC7901胃癌细胞蛋白,利用Western blotting法检测内源性ERα和MTA1的表达,利用共聚焦激光扫描显微镜观察2种胃癌细胞中ERα和MTA1的定位情况。结果:Western blotting法检测,BGC823、SGC7901胃癌细胞均表达ERα和MTA1;共聚焦激光扫描显微镜观察,ERα和MTA1能够共定位于BGC823和SGC7901细胞的细胞核中。结论:胃癌细胞中表达ERα,并且能够与MTA1共定位在细胞核中。 展开更多
关键词 雌激素受体 肿瘤转移相关因子1 蛋白免疫印记 定位
在线阅读 下载PDF
EZH2在维吾尔族妇女宫颈癌中的表达及临床意义 被引量:1
7
作者 林晨 热沙来提.艾米多 +1 位作者 叶静 拉莱.苏祖克 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期292-294,共3页
目的观察EZH2(Enhancer of Zeste Homolog 2)蛋白在维吾尔族妇女宫颈癌和对照组中的表达,探讨其与维吾尔族妇女宫颈癌临床病理因素之间的关系。方法应用免疫组化和Western blot法检测维吾尔族妇女正常宫颈或慢性宫颈炎和宫颈癌组织中EZH... 目的观察EZH2(Enhancer of Zeste Homolog 2)蛋白在维吾尔族妇女宫颈癌和对照组中的表达,探讨其与维吾尔族妇女宫颈癌临床病理因素之间的关系。方法应用免疫组化和Western blot法检测维吾尔族妇女正常宫颈或慢性宫颈炎和宫颈癌组织中EZH2蛋白的表达。结果用免疫组化检测出EZH2在维吾尔族正常宫颈和宫颈癌中的阳性率分别为28.89%和61.02%,Western blot法检测显示EZH2/GADPH在宫颈癌中为1.172 2,对照组为0.994 4,差异均具有统计学意义。宫颈癌组中EZH2与年龄、临床分期、病理分级均无关。结论 EZH2在维吾尔族妇女宫颈癌中过表达,在宫颈癌的发生、发展过程中起一定作用,其检测对宫颈癌的早期诊断有一定的参考价值。 展开更多
关键词 子宫颈肿瘤 维吾尔族 EZH2基因 免疫组织化学 蛋白免疫印记
在线阅读 下载PDF
花生AhGPAT9与AhLPAAT4基因的原核表达及Western Blot分析
8
作者 杨珍 郝翠翠 +9 位作者 李昊远 焦坤 王通 王冕 陈娜 陈明娜 潘丽娟 姜焕焕 禹山林 迟晓元 《花生学报》 北大核心 2017年第3期6-12,19,共8页
酰基转移酶基因家族是甘油三酯合成的关键基因。本研究以前期克隆的AhGPAT9与AhLPAAT4基因部分序列设计引物,构建原核表达载体,转化进大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE检测表明,重组蛋白在37℃,5h诱导条件下获得高效表达。重... 酰基转移酶基因家族是甘油三酯合成的关键基因。本研究以前期克隆的AhGPAT9与AhLPAAT4基因部分序列设计引物,构建原核表达载体,转化进大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE检测表明,重组蛋白在37℃,5h诱导条件下获得高效表达。重组蛋白经纯化和富集,对新西兰兔进行4次免疫,纯化获得的多克隆抗血清,通过间接ELISA检测,表明获得了效价比较高的多克隆抗体。通过对重组蛋白纯化后样品进行Western Blot分析,结果显示在纯化样品相应位置有明显信号,表明所制备的抗体具有很高灵敏度和特异性。并采用制备的抗体对AhGPAT9与AhLPAAT4蛋白在花生不同组织及种子不同发育时期的表达进行了Western Blot分析。为深入研究AhGPAT9与AhLPAAT4基因的功能提供了科学数据。 展开更多
关键词 花生 AhGPAT9 AhLPAAT4 原核表达 多克隆抗体 蛋白免疫印记
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部