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蛇毒类凝血酶的纯化及鉴定被引量：5: 1; 作者段涛程波 +1 位作者王旻孔毅《化学与生物工程》 CAS 2006年第7期40-41,62,共3页; 采用Source 30Q及Phenyl sepharose HP柱层析进行纯化,并用体外MTT实验研究了蛇毒类凝血酶抗肿瘤转移作用。结果得到SDS-PAGE条带均一、分子量为27.6 ku的类凝血酶I11-H2,体外MTT实验证明,I11-H2具有较理想的抗肿瘤转移作用。; 关键词蛇毒类凝血酶纯化抗肿瘤转移; 在线阅读下载PDF 职称材料

蛇毒类凝血酶基因在大肠埃希菌中诱导表达及影响因素被引量：1: 2; 作者闫强何桂梅 +2 位作者陆一鸣陈明勇孙树汉《动物医学进展》 CSCD 2006年第8期77-79,共3页; 将蛇毒类凝血酶基因(TLE)亚克隆到原核表达载体pMAL-p2X上,对重组表达质粒鉴定正确后,转化大肠埃希菌BL21进行诱导表达;同时采用不同的OD值、诱导时间I、PTG浓度和诱导温度对尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶基因重组表达质粒pMAL-p2X进行了条件优... 展开更多; 关键词蛇毒类凝血酶基因原核表达影响因素; 在线阅读下载PDF 职称材料

注射用蛇毒类凝血酶的Ⅰ期临床耐受性试验研究: 3; 作者徐勤娥李建勇 +4 位作者陆化刘彭蒋秀梅赵俊于浩《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期706-707,736,共3页; 关键词蛇毒类凝血酶出血时间耐受性试验; 在线阅读下载PDF 职称材料

蛇毒类凝血酶的研究进展被引量：1: 4; 作者胡慧珍董淑清《当代畜禽养殖业》 2009年第9期12-16,共5页; 蛇毒是从毒蛇的毒腺中分泌出来的一种毒液，属于生物毒素（biotoxin），含有多种生物活性成分．其中大部分是酶和多肽。丝氨酸蛋白酶是蛇毒中的重要组成成分，特别是蝰亚科（Crotalinae）和腹亚科（Viperinae）蛇毒，含有大量丝氨酸蛋... 展开更多; 关键词毒蛇蛇毒类凝血酶生物毒素丝氨酸蛋白酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

一种来自于尖吻蝮蛇毒的新类凝血酶对血液止血机制的研究被引量：2: 5; 作者周振香李红枝 +2 位作者张旭东张娟辉唐松山《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2015年第12期1367-1372,共6页; 目的：研究尖吻蝮蛇蛇毒止血酶Agacutase的止血机制。方法：水蛭素、肝素、苯甲基磺酰氟（PMSF）、钙离子或尿素等分别与Agacutase酶混合,在体外研究它们对酶凝结活性的影响。新西兰白兔静脉注射Agacutase,观察新西兰白兔的血凝和纤溶... 展开更多; 关键词尖吻蝮蛇毒蛇毒类凝血酶止血剂 Agacutase; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于特征肽的超高效液相色谱-串联质谱法检测矛头蝮蛇蛇毒种属来源及类凝血酶含量被引量：8: 6; 作者咸瑞卿杭宝建 +4 位作者巩丽萍王聪聪张迅杰彭丽石峰《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期810-816,共7页; 蛇毒血凝酶类药物是以蝮蛇蛇毒为原料制备的止血药,主要活性成分为蛇毒类凝血酶(svTLEs)。不同蛇种来源的svTLEs结构不同,止血机制不同,药理作用也存在差异,因此准确鉴别蛇毒种属来源和svTLEs含量对于保障该类产品的质量至关重要。研究... 展开更多; 关键词超高效液相色谱-串联质谱特征肽蛇毒类凝血酶矛头蝮蛇蛇毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

尖吻蝮蛇类凝血酶基因的克隆及生物信息学分析被引量：4: 7; 作者张艳宇马平 +5 位作者陆一鸣吕丽萍姜升阳周锡鹏孙树汉许金波《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期542-547,共6页; 为了获得蛇毒类凝血酶基因,本研究根据不同蛇毒类凝血酶cDNA5'和3'保守性序列设计了引物;通过RT-PCR从尖吻蝮蛇毒腺总RNA中扩增到1个808bp特异性片段,将该cDNA重组到pMD18-T载体中,利用生物信息学的方法对测序结果进行了分析。... 展开更多; 关键词尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶 RT-PCR 生物信息学; 在线阅读下载PDF 职称材料

用苯眯分离纯化类凝血酶: 8; 作者龙姝黄永华杨青《长沙电力学院学报（自然科学版）》 2004年第1期71-73,共3页; 用亲和层析分离纯化类凝血酶是一种迅速、高效的方法.根据酶与其竞争性抑制剂之间存在特异性相互作用的原理,本文制备了一种以类凝血酶竞争性抑制剂Benzamidine作为专一性配基的亲和吸附剂用于分离纯化类凝血酶.结果表明,用该吸附剂纯... 展开更多; 关键词亲和吸附剂配基苯眯啶纯化亲和层析心血管疾病蛇毒类凝血酶苯眯分离; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蛇毒类凝血酶的纯化及鉴定被引量：5: 1; 作者段涛程波王旻孔毅; 机构广东药学院武汉工程大学中国药科大学; 出处《化学与生物工程》 CAS 2006年第7期40-41,62,共3页; 文摘采用Source 30Q及Phenyl sepharose HP柱层析进行纯化,并用体外MTT实验研究了蛇毒类凝血酶抗肿瘤转移作用。结果得到SDS-PAGE条带均一、分子量为27.6 ku的类凝血酶I11-H2,体外MTT实验证明,I11-H2具有较理想的抗肿瘤转移作用。; 关键词蛇毒类凝血酶纯化抗肿瘤转移; Keywords snake venom thrombin-like enzyme（SVTLE） purification tumor anti-metastasis; 分类号 Q814.1 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蛇毒类凝血酶基因在大肠埃希菌中诱导表达及影响因素被引量：1: 2; 作者闫强何桂梅陆一鸣陈明勇孙树汉; 机构中国农业大学动物医学院第二军医大学遗传学教研室; 出处《动物医学进展》 CSCD 2006年第8期77-79,共3页; 基金国家自然科学基金(30400272) 上海市科委基础研究重点项目(04JC14002)资助; 文摘将蛇毒类凝血酶基因(TLE)亚克隆到原核表达载体pMAL-p2X上,对重组表达质粒鉴定正确后,转化大肠埃希菌BL21进行诱导表达;同时采用不同的OD值、诱导时间I、PTG浓度和诱导温度对尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶基因重组表达质粒pMAL-p2X进行了条件优化。研究发现,不同的诱导时间、IPTG诱导浓度和诱导温度与融合蛋白表达量有很大关系。SDS-PAGE结果显示,当OD值为0.5,IPTG终浓度为0.3 mmol/L,诱导温度为37℃时,诱导3 h后蛋白表达量最高,超出此范围可使表达量显著减少。在优化诱导条件后,融合蛋白的表达量可达全菌总蛋白量的66%。; 关键词蛇毒类凝血酶基因原核表达影响因素; Keywords thrombin-like enzyme gene prokaryotic expression influence factor; 分类号 S856.9 [农业科学—临床兽医学] S852.612 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名注射用蛇毒类凝血酶的Ⅰ期临床耐受性试验研究: 3; 作者徐勤娥李建勇陆化刘彭蒋秀梅赵俊于浩; 机构南京医科大学第一附属医院科技处南京医科大学第一附属医院血液科南京医科大学统计学教研室; 出处《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期706-707,736,共3页; 关键词蛇毒类凝血酶出血时间耐受性试验; 分类号 R619.1 [医药卫生—外科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蛇毒类凝血酶的研究进展被引量：1: 4; 作者胡慧珍董淑清; 机构乌兰察布市动物疫病预防控制中心呼和浩特市农牧业局菜篮子市场工作站; 出处《当代畜禽养殖业》 2009年第9期12-16,共5页; 文摘蛇毒是从毒蛇的毒腺中分泌出来的一种毒液，属于生物毒素（biotoxin），含有多种生物活性成分．其中大部分是酶和多肽。丝氨酸蛋白酶是蛇毒中的重要组成成分，特别是蝰亚科（Crotalinae）和腹亚科（Viperinae）蛇毒，含有大量丝氨酸蛋白酶。这是自然界长期进化过程中演化出的一类。既和哺乳动物蛋白酶相似，又存在相当程度结构与功能分化的生物大分子，通过激活、灭活和转变机体中的凝血因子而广泛作用于血液凝固系统同。; 关键词毒蛇蛇毒类凝血酶生物毒素丝氨酸蛋白酶; 分类号 R595.8 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一种来自于尖吻蝮蛇毒的新类凝血酶对血液止血机制的研究被引量：2: 5; 作者周振香李红枝张旭东张娟辉唐松山; 机构广东药学院基础学院广东省武警总队医院检验科广东省武警总队医院妇产科; 出处《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2015年第12期1367-1372,共6页; 基金广东省自然基金(2014A030313589 2015A030313843) 中山市科技计划(2009H015); 文摘目的：研究尖吻蝮蛇蛇毒止血酶Agacutase的止血机制。方法：水蛭素、肝素、苯甲基磺酰氟（PMSF）、钙离子或尿素等分别与Agacutase酶混合,在体外研究它们对酶凝结活性的影响。新西兰白兔静脉注射Agacutase,观察新西兰白兔的血凝和纤溶指标。结果：水蛭素和肝素对该酶没有影响,PMSF和尿素明显抑制酶的凝结活性,而钙离子激活酶凝结活性。静脉注射Agacutase 0.03-0.12 U/kg剂量后,各组全血凝固时间与给药前相比均有不同程度的缩短,给药后2 h药效达高峰,药效持续24 h。与给药前比较,各组兔血纤维蛋白原含量和血黏度在给药后有不同程度的降低,这与血液凝固时间缩短一致,对活化部分凝血活酶时间（APTT）无影响。结论：Agacutase在血管内引起较高浓度的可溶性纤维蛋白,但不激活凝血因子II和XIII,在伤口部位加速止血。在正常的血管内,不会造成血栓形成。所有实验结果显示,Agacutase是一个有效的潜在止血剂。; 关键词尖吻蝮蛇毒蛇毒类凝血酶止血剂 Agacutase; Keywords Deinagkistrodon acutus snake venom thrombin-like enzyme coagulant Agacutase; 分类号 R965.2 [医药卫生—药理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于特征肽的超高效液相色谱-串联质谱法检测矛头蝮蛇蛇毒种属来源及类凝血酶含量被引量：8: 6; 作者咸瑞卿杭宝建巩丽萍王聪聪张迅杰彭丽石峰; 机构山东省食品药品检验研究院山东大学药学院华润双鹤利民药业(济南)有限公司质量部; 出处《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期810-816,共7页; 基金国家药典委员会药品标准制修订研究课题(2019H04).; 文摘蛇毒血凝酶类药物是以蝮蛇蛇毒为原料制备的止血药,主要活性成分为蛇毒类凝血酶(svTLEs)。不同蛇种来源的svTLEs结构不同,止血机制不同,药理作用也存在差异,因此准确鉴别蛇毒种属来源和svTLEs含量对于保障该类产品的质量至关重要。研究基于蛋白质组学技术,筛选出了具有种属特异性的矛头蝮蛇svTLE特征肽,并建立了基于特征肽的超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)检测矛头蝮蛇蛇毒种属来源及类凝血酶含量的方法。采用胰蛋白酶对纯化的矛头蝮蛇svTLE进行酶解,利用纳升液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(Nano LC-Q-Exactive-MS)和Proteome Discoverer^(2).2软件分别进行多肽的检测和鉴定,通过BLAST搜索与Uniprot数据库对比分析,筛选出具有种属特异性的矛头蝮蛇svTLEs特征肽“EAYNGLPAK”。针对该特征肽对酶解温度、酶解时间和酶用量等样品前处理方法进行了优化,利用超高效液相色谱-串联质谱,以m/z 481.9>315.2和481.9>485.2作为检测离子对,采用ESI+模式进行了多反应监测(MRM)定性定量分析。结果显示,特征肽在2.5~30 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数(r)大于0.9996,多水平加标回收率范围为95.5%~101.9%,各水平平行测定结果的相对标准偏差(RSD)为1.1%~3.2%,完全能够满足实际样品检测需求。方法简便快捷,灵敏度高,专属性强,可用于矛头蝮蛇蛇毒种属鉴别及svTLE含量测定,从源头保证血凝酶类产品的质量,并可为其他蛇毒类产品的质量控制提供参考。; 关键词超高效液相色谱-串联质谱特征肽蛇毒类凝血酶矛头蝮蛇蛇毒; Keywords ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry(UHPLC-MS/MS) marker peptide snake venom thrombin-like enzymes(svTLEs) Bothrops atrox snake venom; 分类号 O658 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名尖吻蝮蛇类凝血酶基因的克隆及生物信息学分析被引量：4: 7; 作者张艳宇马平陆一鸣吕丽萍姜升阳周锡鹏孙树汉许金波; 机构军事医学科学院野战输血研究所第二军医大学遗传教研室; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期542-547,共6页; 基金国家自然科学基金(30400272) 上海市科委基础研究重点项目资助(04JC14002); 文摘为了获得蛇毒类凝血酶基因,本研究根据不同蛇毒类凝血酶cDNA5'和3'保守性序列设计了引物;通过RT-PCR从尖吻蝮蛇毒腺总RNA中扩增到1个808bp特异性片段,将该cDNA重组到pMD18-T载体中,利用生物信息学的方法对测序结果进行了分析。结果表明:该特异性片段中有一个783bp的开放阅读框架,其编码蛋白质序列与蛇的类凝血酶序列有98.5%的同源性,也具有蛇毒类凝血酶的典型特征。结论:本实验获得了一个新的尖吻蝮蛇类凝血酶基因。; 关键词尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶 RT-PCR 生物信息学; Keywords Agkistrodon aeutus snake venom thrombin-like enzyme RT-PCR bioinfomaties; 分类号 R995.3 [医药卫生—毒理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名用苯眯分离纯化类凝血酶: 8; 作者龙姝黄永华杨青; 机构长沙理工大学化学与环境工程系大连理工大学生物工程研究所; 出处《长沙电力学院学报（自然科学版）》 2004年第1期71-73,共3页; 文摘用亲和层析分离纯化类凝血酶是一种迅速、高效的方法.根据酶与其竞争性抑制剂之间存在特异性相互作用的原理,本文制备了一种以类凝血酶竞争性抑制剂Benzamidine作为专一性配基的亲和吸附剂用于分离纯化类凝血酶.结果表明,用该吸附剂纯化重组类凝血酶能达SDS-PAGE电泳纯.; 关键词亲和吸附剂配基苯眯啶纯化亲和层析心血管疾病蛇毒类凝血酶苯眯分离; Keywords affinity chromatography ligand benzamidine thrombin-like enzyme purification; 分类号 R972 [医药卫生—药品] R914 [医药卫生—药物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	蛇毒类凝血酶的纯化及鉴定	段涛程波王旻孔毅	《化学与生物工程》 CAS	2006	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	蛇毒类凝血酶基因在大肠埃希菌中诱导表达及影响因素	闫强何桂梅陆一鸣陈明勇孙树汉	《动物医学进展》 CSCD	2006	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	注射用蛇毒类凝血酶的Ⅰ期临床耐受性试验研究	徐勤娥李建勇陆化刘彭蒋秀梅赵俊于浩	《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2006	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	蛇毒类凝血酶的研究进展	胡慧珍董淑清	《当代畜禽养殖业》	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	一种来自于尖吻蝮蛇毒的新类凝血酶对血液止血机制的研究	周振香李红枝张旭东张娟辉唐松山	《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD	2015	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	基于特征肽的超高效液相色谱-串联质谱法检测矛头蝮蛇蛇毒种属来源及类凝血酶含量	咸瑞卿杭宝建巩丽萍王聪聪张迅杰彭丽石峰	《色谱》 CAS CSCD 北大核心	2022	8	在线阅读下载PDF 职称材料
7	尖吻蝮蛇类凝血酶基因的克隆及生物信息学分析	张艳宇马平陆一鸣吕丽萍姜升阳周锡鹏孙树汉许金波	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2005	4	在线阅读下载PDF 职称材料
8	用苯眯分离纯化类凝血酶	龙姝黄永华杨青	《长沙电力学院学报（自然科学版）》	2004	0	在线阅读下载PDF 职称材料