蔗糖非发酵1相关激酶在能量代谢及炎症中的作用及机制研究进展

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作者 蔡劲薇 李杰 邝建 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期945-950,共6页

随着分子克隆技术的诞生和许多致癌基因编码蛋白激酶的发现,目前人类激酶组已鉴定出538种蛋白激酶[1],约占人类所有基因的2%[2]。蛋白激酶及其同源磷酸酶通过催化可逆的蛋白磷酸化在信号转导中起着重要作用。通过改变底物活性,蛋白激酶... 随着分子克隆技术的诞生和许多致癌基因编码蛋白激酶的发现,目前人类激酶组已鉴定出538种蛋白激酶[1],约占人类所有基因的2%[2]。蛋白激酶及其同源磷酸酶通过催化可逆的蛋白磷酸化在信号转导中起着重要作用。通过改变底物活性,蛋白激酶控制着许多细胞过程,包括代谢、转录、细胞周期/增殖、细胞骨架重排及细胞迁移、凋亡和分化。 展开更多

关键词 蔗糖非发酵1相关激酶 糖代谢 脂肪代谢 能量代谢 炎症

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膜型基质金属蛋白酶-1在黏着斑激酶相关非激酶调控肝星状细胞胶原代谢中的作用 被引量：2

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作者 魏娟 张晓岚 +4 位作者 敦志娜 赵春洪 申建刚 霍晓霞 安君艳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2155-2158,共4页

目的:探讨黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)对纤维连接蛋白(FN)刺激的肝星状细胞(HSC)膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)表达的影响并探讨MT1-MMP在FRNK调控HSC胶原代谢中的作用。方法:应用体外细胞培养技术,脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染;... 目的:探讨黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)对纤维连接蛋白(FN)刺激的肝星状细胞(HSC)膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)表达的影响并探讨MT1-MMP在FRNK调控HSC胶原代谢中的作用。方法:应用体外细胞培养技术,脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染;采用Western blotting法测定FRNK蛋白在瞬时转染时相应的表达,鉴定转染效果;分别应用Western blotting和RT-PCR方法测定MT1-MMP在HSC中的相应表达。结果:FRNK质粒成功转染HSC,于转染48h时,FRNK蛋白表达最强,P<0·05;FRNK转染后在基因水平上:MT1-MMP mRNA表达明显增加;翻译蛋白水平上:FRNK质粒转染HSC48h后,MT1-MMP蛋白表达量显著升高。结论:脂质体介导下FRNK质粒转染,可使外源性FRNK在HSC内大量表达,FRNK可能通过上调MT1-MMP值来抑制HSC胶原合成。 展开更多

关键词 肝星状细胞 黏着斑激酶 黏着斑激酶相关非激酶 膜型基质金属蛋白酶-1 胶原 肝硬化

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抑制长链非编码RNA MALAT1对糖脂毒性诱导的内皮细胞功能障碍的影响及可能机制

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作者 张志扬 刘芬 +5 位作者 张雪鹤 房彬彬 张冀鑫 谢骞 杨毅宁 李晓梅 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2024年第2期185-193,共9页

目的:探讨糖脂毒性环境中抑制长链非编码RNA(lnc RNA)人类肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)的表达水平对人脐静脉内皮细胞功能影响的分子机制。方法:用葡萄糖和棕榈酸处理人脐静脉内皮细胞,建立体外糖脂毒性内皮细胞模型,并分为对照组、... 目的:探讨糖脂毒性环境中抑制长链非编码RNA(lnc RNA)人类肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)的表达水平对人脐静脉内皮细胞功能影响的分子机制。方法:用葡萄糖和棕榈酸处理人脐静脉内皮细胞,建立体外糖脂毒性内皮细胞模型,并分为对照组、高糖高脂组、高糖高脂对照组以及小干扰RNA(si-RNA)干预的高糖高脂+si-MALAT1组、高糖高脂+si-丝裂原活化蛋白激酶1(si-MAPK1)组。应用实时荧光定量PCR检测MALAT1、MAPK1的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法检测自噬、线粒体融合分裂、凋亡、通路相关蛋白的表达水平;免疫荧光共聚焦定位检测自噬及溶酶体相关蛋白的荧光共定位情况;透射电镜观察内皮细胞中自噬溶酶体的数目;线粒体探针染色检测线粒体形态;免疫荧光检测细胞内活性氧(ROS)的产生;流式细胞仪检测各组细胞的凋亡;细胞增殖及划痕实验检测不同时间点各组细胞的增殖及迁移能力;血管形成试验检测各组细胞中新生血管数量。结果:与对照组相比,高糖高脂组、高糖高脂对照组的MALAT1 mRNA、磷酸化的丝裂原活化蛋白激酶1(p-MAPK1)的表达水平增加,磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的表达水平下降,P均<0.05。与高糖高脂对照组相比,高糖高脂+si-MALAT1组微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)、螯合体1(p62)、ROS、剪切后活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved caspase-3)、BCL-2相关X蛋白(BAX)、p-MAPK1的表达水平均下降,线粒体融合蛋白视神经萎缩蛋白1(OPA1)、BCL-2、p-mTOR的表达水平均增加,P均<0.05;LC3和溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)蛋白的荧光共定位阳性颗粒增加(P均<0.01),溶酶体数目减少;细胞增殖、迁移、成管能力均增加(P均<0.01)。与高糖高脂对照组相比,高糖高脂+si-MAPK1组内皮细胞中p-MAPK1的表达下降,p-mTOR的表达上升(P均<0.01)。结论:抑制MALAT1表达,可降低糖脂毒性环境中线粒体的自噬水平,减少内皮细胞的凋亡及改善内皮细胞的功能,可能与调节MAPK1/mTOR信号通路有关。 展开更多

关键词 长链非编码RNA人类肺腺癌转移相关转录本1 丝裂原活化蛋白激酶1 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 糖脂毒性 内皮细胞功能 线粒体自噬 凋亡

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lncRNA Rpph1对糖尿病肾病足细胞AMPK/Nrf2通路、焦亡的影响

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作者 古丽鲜·吐尔洪 姑丽孜巴·塔衣尔 《科学技术与工程》 北大核心 2025年第22期9305-9311,共7页

探讨长链非编码RNA(lncRNA)Rpph1促进糖尿病肾病(diabetes nephropathy,DN)足细胞损伤,是否与腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路以及细胞焦亡和凋亡有关。体外培养人肾小球足细胞... 探讨长链非编码RNA(lncRNA)Rpph1促进糖尿病肾病(diabetes nephropathy,DN)足细胞损伤,是否与腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路以及细胞焦亡和凋亡有关。体外培养人肾小球足细胞(Human glomerular podocytes,HGPC)随机分为对照组、模型组、lncRNA Rpph1过表达组、低表达组和空载体组,5 mmol/L的D-葡萄糖孵育HGPC为对照组,其他三组采用30 mmol/L的D-葡萄糖孵育细胞建立DN模型。脂质体转染法将携带lncRNA Rpph1过表达、低表达与空载体的稳定质粒与HGPC共孵育。qRT-PCR检测lncRNA Rpph1表达,Western blot检测p-AMPK/AMPK和Nrf2蛋白,以及细胞焦亡相关蛋白包括Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶-1(caspase-1)和GSDMD-N的表达量,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测凋亡率。与对照组相比,模型组lncRNA Rpph1表达量显著增加(P<0.05)。模型组p-AMPK/AMPK、Nrf2、NLRP3、caspase-1和GSDMD-N蛋白表达量显著增加(P<0.05)。模型组细胞存活率显著减少,凋亡率增加(P<0.05)。与模型组和空载体组相比,lncRNA Rpph1过表达组lncRNA Rpph1、p-AMPK/AMPK、Nrf2、NLRP3、caspase-1和GSDMD-N蛋白表达量显著增加,细胞存活率显著减少,凋亡率增加(P<0.05);lncRNA Rpph1低表达组lncRNA Rpph1、p-AMPK/AMPK、Nrf2、NLRP3、caspase-1和GSDMD-N蛋白表达量显著下降,细胞存活率显著增多,凋亡率下降(P<0.05)。DN中lncRNA Rpph1高表达可以促进足细胞损伤,可能通过AMPK/Nrf2信号通路激活细胞焦亡和凋亡有关。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 足细胞 长链非编码RNA Rpph1 腺苷酸激活蛋白激酶 核因子E2相关因子2 细胞焦亡

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蓝莓联合益生菌通过IL-22调控的JAK1/STAT3/BAX通路改善非酒精性脂肪性肝病的作用机制 被引量：13

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作者 祝娟娟 程明亮 +1 位作者 赵雪珂 穆茂 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2018年第9期1936-1944,共9页

目的研究蓝莓联合益生菌通过对IL-22调控的JAK1/STAT3/BAX信号通路的影响,进一步探明其改善非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的作用机制。方法清洁级SD大鼠40只分为正常对照组(CG)、IL-22siRNA阴性对照组(IL-22SI-NC)、IL-22siRNA组(IL-22SI)... 目的研究蓝莓联合益生菌通过对IL-22调控的JAK1/STAT3/BAX信号通路的影响,进一步探明其改善非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的作用机制。方法清洁级SD大鼠40只分为正常对照组(CG)、IL-22siRNA阴性对照组(IL-22SI-NC)、IL-22siRNA组(IL-22SI)、IL-22siRNA阴性对照+蓝莓益生菌组(IL-22SI-NC+BPG)、IL-22siRNA+蓝莓益生菌组(IL-22SI+BPG)。正常对照组予100%普通饮食,其余大鼠均采用复合高脂饲料制备脂肪肝模型,同时予IL-22siRNA阴性对照慢病毒及IL-22siRNA慢病毒腹部肝区注射(盲穿),隔日1次,共12周,取肝脏确认造模及siRNA封闭效果后予蓝莓益生菌原液灌胃,同时按上述分组后给予正常饮食,予蓝莓益生菌原液灌胃,共观察8周。多组间比较采用单因素方差分析,进一步比较方差齐时采用SNK法(q检验),方差不齐时用Tamhane法(q'检验)。结果 IL-22SI组与IL-22SI-NC组比较,ALT、AST、TC、TG、LDL均显著升高(P值均<0.01),HDL显著降低(P<0.01),IL-22、JAK1、STAT3的mRNA及蛋白表达均明显减弱(P值均<0.01)、BAX的表达明显升高(P<0.01);与IL-22SI-NC相比,IL-22SI-NC+BPG的ALT、AST、TC、TG、LDL均明显降低(P值均<0.01),HDL明显升高(P<0.01),IL-22、JAK1、STAT3的mRNA及蛋白表达均显著升高(P值均<0.01),BAX的表达显著下降(P<0.01);IL-22SI+BPG较IL-22SI组ALT、AST、TC、TG、LDL均略有降低(P值均<0.05),HDL略有升高(P<0.05),IL-22、JAK1、STAT3的mRNA及蛋白表达均有所增加(P值均<0.05),BAX的表达略有减少(P<0.05)。结论蓝莓联合益生菌能一定程度拮抗IL-22siRNA所加剧的肝细胞脂肪变性,并可以增强IL-22的表达,提示IL-22可能为蓝莓联合益生菌影响NAFLD的关键作用因子。推测蓝莓联合益生菌能增强IL-22表达,激活JAK1/STAT3信号通路,抑制其下游凋亡因子BAX的表达,减少肝细胞凋亡,增强胆固醇代谢,减少脂质沉积,达到改善NAFLD的目的,是NAFLD的一个辅助治疗方案。 展开更多

关键词 非酒精性脂肪性肝病 白细胞介素10 有益菌种 蓝莓 Janus激酶1 转录激活因子3 BCL-2相关X蛋白质

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橡胶树蛋白激酶基因SnRK2.7的克隆及表达

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作者 刘云飞 李言 田维敏 《热带生物学报》 2024年第1期1-9,共9页

为了探索蔗糖非发酵相关蛋白激酶2(Sucrose non-fermentating1-related protein kinase 2,SnRK2)在巴西橡胶树响应低温胁迫应答中的作用,采用RT-PCR技术,从橡胶树抗寒无性系93-114的叶片中克隆了SnRK2亚家族的一个成员,命名为HbSnRK2.7... 为了探索蔗糖非发酵相关蛋白激酶2(Sucrose non-fermentating1-related protein kinase 2,SnRK2)在巴西橡胶树响应低温胁迫应答中的作用,采用RT-PCR技术,从橡胶树抗寒无性系93-114的叶片中克隆了SnRK2亚家族的一个成员,命名为HbSnRK2.7。该基因包含一个1095 bp的开放阅读框,编码364个氨基酸。HbSnRK2.7的分子量为41.39 kD,等电点为4.70,具有保守丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶结构域,预测其能催化磷酸基从ATP转移到蛋白质底物上的丝氨酸/苏氨酸残基上,也是磷酸化位点的集中区域,还具有非生物胁迫所需的结构域和ABA(脱落酸)依赖的HbSnRK2.7激活所需结构域。q-PCR结果显示,HbSnRK2.7基因响应ABA诱导,呈下调表达模式。在ABA处理8 h时,表达量下调到最低点。在低温胁迫下,HbSnRK2.7的表达量极显著降低。低温胁迫4 h和8 h时,HbSnRK2.7持续下调表达,低温胁迫24 h时,HbSnRK2.7表达量下调到最低,大约为非胁迫表达量的1/2。而且,HbSnRK2.7在不抗寒种质中的表达量显著高于抗寒种质。这些结果表明,HbSnRK2.7可能作为负调控因子介导橡胶树依赖ABA的低温胁迫抗性形成。 展开更多

关键词 巴西橡胶树 蔗糖非发酵相关蛋白激酶 荧光定量PCR 低温胁迫抗性 脱落酸信号途径

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岩藻黄素对小鼠非酒精性脂肪性肝病的修复作用 被引量：2

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作者 任祥雨 郑佳文 +4 位作者 田笑笑 曹洪杰 李航婷 唐云平 杨最素 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第3期42-52,共11页

目的:探究岩藻黄素对高脂饮食诱导的C57BL/6小鼠非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的修复作用及其机制。方法:将52只C57BL/6小鼠随机分成4组,正常组14只,其余为实验组,实验组给予8周的高脂饮食喂养之后,再... 目的:探究岩藻黄素对高脂饮食诱导的C57BL/6小鼠非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的修复作用及其机制。方法:将52只C57BL/6小鼠随机分成4组,正常组14只,其余为实验组,实验组给予8周的高脂饮食喂养之后,再分为模型组、岩藻黄素低剂量和高剂量组,给予灌胃6周,每日1次。每周记录小鼠的体质量,第14周结束时小鼠禁食12 h后全部处死。后续分别测定各组小鼠血清中谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)活力,总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(lowdensitylipoproteincholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(highdensitylipoproteincholesterol,HDL-C)、游离脂肪酸、脂联素和瘦素含量;检测肝脏组织匀浆液中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH-Px)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、白细胞介素-1β、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子α含量;透射电镜下观察肝脏的组织病理学变化并采用蛋白免疫印迹法检测肝脏中5’-单磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)、核因子红系2相关因子2(nuclear factor erythroid2-related factor 2,Nrf2)和Toll样受体4(toll-like receptors 4,TLR4)信号通路蛋白表达情况。结果:与模型组相比,岩藻黄素组中的TC、TG、LDL-C、ALT、AST显著降低(P<0.05),HDL-C显著升高(P<0.05),且降低了瘦素水平,增加了脂联素分泌,GSH-Px、SOD、CAT升高(P<0.05),MDA降低(P<0.05),且炎症因子的水平降低。苏木精-伊红染色、油红O染色、糖原染色和透射电镜结果显示岩藻黄素组肝脏组织学结构好转,趋近于正常组。蛋白免疫印迹法结果显示岩藻黄素治疗可上调AMPK信号通路中磷酸化5’-单磷酸腺苷活化蛋白激酶和过氧化物酶体增殖物激活受体α、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶、肉碱脂酰转移酶1,下调固醇调节元件结合蛋白-1c、脂肪酸合酶表达;抑制Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1/Nrf2信号通路中Keap-1的水平,提高Nrf2及其下游抗氧化蛋白血红素氧合酶1、NAD(P)H-醌氧化还原酶1和谷氨酸-半胱氨酸连接酶的表达水平;下调TLR4信号通路中TLR4蛋白的表达,抑制髓样分化因子88、磷酸化人核因子κB抑制蛋白α和磷酸化核因子κB蛋白(p65)的表达。结论:岩藻黄素可通过调节脂质代谢、减少氧化应激和调节炎症等途径修复高脂饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝病。 展开更多

关键词 岩藻黄素 小鼠 非酒精性脂肪性肝病 5’-单磷酸腺苷活化蛋白激酶/核因子κB通路 Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1-核转录因子红系2相关因子2通路

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马铃薯StSnRK1基因过表达提高烟草耐盐性研究 被引量：2

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作者 王飞兵 李威 +5 位作者 张扬 党长喜 叶玉秀 张凡 陈新红 周青 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1674-1680,共7页

为研究马铃薯蔗糖非发酵-1-型相关蛋白激酶-1基因StSnRK1对于调控植物耐盐性的促进作用,以过表达StSnRK1的烟草株系及野生型为试验材料,研究盐胁迫下StSnRK1对植株生长的影响。耐盐性鉴定结果表明,过表达StSnRK1基因显著提高烟草植株的... 为研究马铃薯蔗糖非发酵-1-型相关蛋白激酶-1基因StSnRK1对于调控植物耐盐性的促进作用,以过表达StSnRK1的烟草株系及野生型为试验材料,研究盐胁迫下StSnRK1对植株生长的影响。耐盐性鉴定结果表明,过表达StSnRK1基因显著提高烟草植株的耐盐性。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析显示,StSnRK1基因显著上调脯氨酸生物合成相关基因(吡咯琳-5-羧酸合酶NtP5CS)、胚胎发育后期丰富蛋白基因(NtLEA5)和活性氧清除系统相关基因(超氧化物歧化酶NtSOD和过氧化物酶NtPOD)。同时,转基因烟草植株的SOD活性、POD活性和脯氨酸含量显著高于野生型烟草植株,丙二醛(MDA)含量和过氧化氢(H2O2)含量显著低于野生型植株。由此可见,StSnRK1基因在改良植物耐盐性方面具有重要作用,为耐盐马铃薯生物技术育种提供了理论基础。 展开更多

关键词 马铃薯 蔗糖非发酵-1-型相关蛋白激酶-1(StSnRK1) 基因克隆 烟草 耐盐性

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拟南芥AKIN11基因的过表达及其功能分析

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作者 马毅 唐冬英 +3 位作者 赵小英 秦玉芝 郭新红 刘选明 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期145-149,共5页

将蔗糖非发酵基因相关蛋白激酶AKIN11克隆到植物表达载体pEGAD的35S启动子下游与GFP融合,基因枪法导入洋葱表皮细胞进行瞬时表达,发现集中在细胞核内表达.农杆菌介导花序浸泡法转化拟南芥,Basta筛选和RT-PCR鉴定得到两个遗传稳定的T3代... 将蔗糖非发酵基因相关蛋白激酶AKIN11克隆到植物表达载体pEGAD的35S启动子下游与GFP融合,基因枪法导入洋葱表皮细胞进行瞬时表达,发现集中在细胞核内表达.农杆菌介导花序浸泡法转化拟南芥,Basta筛选和RT-PCR鉴定得到两个遗传稳定的T3代转基因株系.突变体和野生型的表型没有明显差异,但突变体叶片中淀粉含量较野生型增加.RT-PCR分析淀粉合成途径关键酶的mRNA水平,发现突变体中腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶表达量增加,而α-淀粉酶却没有变化.表明AKIN11基因可能在拟南芥淀粉积累途径中起着重要的调节作用. 展开更多

关键词 拟南芥 蔗糖非发酵基因相关蛋白激酶 腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶 Α-淀粉酶

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黄瓜全基因组SnRK2基因的鉴定和序列特征分析 被引量：7

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作者 李利斌 曹齐卫 +1 位作者 张允楠 孙小镭 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期800-807,共8页

植物SnRK2基因在逆境应答和ABA信号转导及生长发育过程中具有重要功能。但是有关黄瓜(cucumis satovus L.)SnRK2全基因组水平的研究鲜见报道。本文利用生物信息学的方法从黄瓜基因组中鉴定出9个SnRK2基因,并对这些基因的染色体分布、内... 植物SnRK2基因在逆境应答和ABA信号转导及生长发育过程中具有重要功能。但是有关黄瓜(cucumis satovus L.)SnRK2全基因组水平的研究鲜见报道。本文利用生物信息学的方法从黄瓜基因组中鉴定出9个SnRK2基因,并对这些基因的染色体分布、内含子-外显子结构、系统进化、顺式调控元件等进行了系统分析。结果显示,黄瓜的SnRK2基因不均匀地的分布在基因组中,它们的外显子多数为9,编码区序列长度在909-1140bp之间。它们在遗传上分为3个不同的类群,预测编码的蛋白都具有激酶的典型结构。而且,在SnRK2基因上游调控序列中都含有多个不同激素和逆境应答顺式元件,预示它们在逆境应答和激素信号转导过程中具有一定功能。本文为进一步研究黄瓜SnRK2基因在逆境和激素应答中的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 黄瓜 蔗糖非发酵因子1相关蛋白激酶2 基因组分布 遗传进化 序列特征分析

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甘蓝型油菜SnRK基因家族生物信息学分析及其与种子含油量的关系 被引量：6

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作者 唐婧泉 王南 +6 位作者 高界 刘婷婷 文静 易斌 涂金星 傅廷栋 沈金雄 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期416-426,共11页

蔗糖非发酵相关蛋白激酶(sucrose non-fermenting-1-related protein kinase,SnRK)是植物中广泛存在的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,它们参与调控植物的信号传导、逆境响应和种子生长等生物学过程。为了解析甘蓝型油菜(Brassica napus L.)中S... 蔗糖非发酵相关蛋白激酶(sucrose non-fermenting-1-related protein kinase,SnRK)是植物中广泛存在的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,它们参与调控植物的信号传导、逆境响应和种子生长等生物学过程。为了解析甘蓝型油菜(Brassica napus L.)中SnRK基因家族的性质及其对种子含油量的影响,本研究对BnSnRK基因家族的系统进化、基因结构、蛋白质理化性质、保守基序、蛋白质二级结构、顺式作用元件和亚细胞定位预测等进行分析,并通过候选基因关联分析、单倍型分析和qRT-PCR筛选影响种子含油量的BnSnRK基因。结果显示,鉴定得到92个BnSnRK成员,分为3个亚族,分布于甘蓝型油菜19条染色体上,亚族之间蛋白质理化性质差异显著。多数基因拥有7~14个外显子;同一亚族的motif分布情况更相似。BnSnRK家族主要在细胞质中表达,蛋白质二级结构主要以α-螺旋和不规则卷曲为主。关联分析筛选出与油菜种子含油量相关的12个家族成员,基因BnaC02g10730D可能负向调控甘蓝型油菜种子含油量,基因BnaA07g12290D、BnaA10g22850D、BnaA08g18050D、BnaC04g44390D可能正向调控甘蓝型油菜种子含油量。不同环境之间种子含油量差异显著,且与含油量相关的12个成员均含有MYB、MYC和ABA响应元件,环境特异的含油量关联基因可能与植物非生物胁迫响应相关。本研究为BnSnRK基因功能验证及育种工作提供了理论参考。 展开更多

关键词 甘蓝型油菜 种子含油量 蔗糖非发酵相关蛋白激酶 关联分析 生物信息分析

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舒芬太尼对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及其作用机制 被引量：6

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作者 赵智慧 白香花 +3 位作者 何金玲 段伟琴 刘敏 张生茂 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期364-373,共10页

目的:探讨舒芬太尼对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌细胞凋亡及长链非编码RNA(LncRNA)-肺癌转移相关转录本1(MALAT1)靶向细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)信号通路的影响,阐明舒芬太尼对MIRI大鼠的可能作用机制。方法:30只雄性SD... 目的:探讨舒芬太尼对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌细胞凋亡及长链非编码RNA(LncRNA)-肺癌转移相关转录本1(MALAT1)靶向细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)信号通路的影响,阐明舒芬太尼对MIRI大鼠的可能作用机制。方法:30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和舒芬太尼组,每组10只。采用结扎左冠状动脉前降支(LAD)的方法制备MIRI模型,假手术组只开胸不结扎,舒芬太尼组大鼠于再灌注前10 min时尾静脉注射舒芬太尼1μg·kg^(-1),假手术组和模型组大鼠分别尾静脉注射等量生理盐水。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法及荧光探针原位杂交(FISH)法检测各组大鼠心肌组织中LncRNA-MALAT1表达水平,原位末端标记(TUNEL)染色法检测各组大鼠心肌细胞凋亡率,Western blotting法检测各组大鼠心肌组织中半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、活化半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved-caspase-3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、ERK1/2和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白表达水平。构建心肌细胞缺氧复氧模型模拟体内MIRI,分为对照组、模型组、舒芬太尼组、pcDNA-MALAT1组(MALAT1组)和舒芬太尼+pcDNA-MALAT1组(舒芬太尼+MALAT1组)。H9C2细胞缺氧培养10 h后复氧构建缺氧复氧损伤模型;采用Western blotting法检测各组H9C2细胞中caspase-3、cleaved-caspase-3、Bax、Bcl-2、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达水平。结果:动物实验,与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织中LncRNA-MALAT1表达水平、心肌细胞凋亡率、cleaved-caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2比值均明显升高(P<0.05),p-ERK1/2蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,舒芬太尼组大鼠心肌组织中LncRNA-MALAT1表达水平、心肌细胞凋亡率、cleaved-caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2比值均明显降低(P<0.05),p-ERK1/2蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。细胞实验,与对照组比较,模型组H9C2细胞中cleaved-caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2比值明显升高(P<0.05),p-ERK1/2蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,舒芬太尼组H9C2细胞中cleaved-caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2比值明显降低(P<0.05),p-ERK1/2蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与MALAT1组比较,舒芬太尼+MALAT1组H9C2细胞中cleaved-caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2比值明显降低(P<0.05),p-ERK1/2蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:舒芬太尼能减轻MIRI大鼠心肌细胞凋亡,其作用机制可能与抑制LncRNA-MALAT1表达从而激活ERK1/2信号通路有关。 展开更多

关键词 舒芬太尼 缺血再灌注损伤 长链非编码RNA 肺癌转移相关转录本1 细胞凋亡 细胞外信号调节蛋白激酶1 细胞外信号调节蛋白激酶2

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