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蓝舌病病毒8型VP2蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定被引量：8: 1; 作者席娜赵国辉 +9 位作者孙恩成秦永丽孙亮魏天徐青元杨涛孙晶刘二战钱爱东吴东来《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期318-322,共5页; 为制备蓝舌病病毒03TV）8型VP2蛋白的单克隆抗体（MAb）TL鉴定其抗原表位，本研究采用Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统表达并纯化的重组VP2蛋白免疫BALB／c小鼠，三免后取小鼠脾淋巴细胞与SP2／0细胞进行融合，并以纯化的重组VP2蛋白为... 展开更多; 关键词蓝舌病病毒8型 VP2蛋白真核表达单克隆抗体抗原表位; 在线阅读下载PDF 职称材料

蓝舌病病毒8型可视化RT-LAMP检测方法的建立被引量：2: 2; 作者李富祥赵文华杨仕标《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1027-1031,共5页; 为建立蓝舌病病毒8型(BTV-8)可视化RT-LAMP检测方法,本研究根据BTV-8外衣壳蛋白(VP2)基因保守序列设计2对BTV-8血清型特异性引物,通过反应条件优化建立了BTV-8可视化RT-LAMP检测方法。该方法最佳反应条件为60℃1 h;利用本实验建立的方... 展开更多; 关键词蓝舌病病毒8型反转录环介等温扩增快速检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

蓝舌病病毒8型实时荧光RT-RAA检测方法的建立及应用被引量：4: 3; 作者曾俊霞李驰 +6 位作者巴娟罗敏意蓝间媛许枣珠罗丽霞刘进芳侯月娥《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1178-1182,共5页; 为建立蓝舌病病毒8型(BTV-8)的快速检测方法,本实验根据GenBank中BTV-8 VP2基因保守序列,设计并合成特异性引物和探针,经各反应条件的优化,建立BTV-8实时荧光重组酶介导扩增(RT-RAA)检测方法。结果显示,该方法仅对BTV-8呈阳性反应,对BT... 展开更多; 关键词蓝舌病病毒8型实时荧光RT-RAA 检测方法; 在线阅读下载PDF 职称材料

蓝舌病病毒8型实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用被引量：2: 4; 作者林彦星花群俊 +7 位作者张彩虹曹琛福阮周曦曾少灵史卫军黄超华杨俊兴花群义《动物医学进展》北大核心 2020年第8期44-48,共5页; 根据蓝舌病病毒8型(BTV-8)VP2基因序列(Seg-2)设计特异性引物和探针,建立了BTV-8实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)检测方法。结果表明该法特异性强,能准确检测BTV-8核酸,与蓝舌病病毒其他血清型病毒、鹿流行性出血热病毒(EHDV)、牛病毒性腹... 展开更多; 关键词蓝舌病病毒8型实时荧光定量RT-PCR 检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

蓝舌病病毒血清8型定性传入风险评估被引量：2: 5; 作者罗倩敏韩佃刚 +9 位作者董俊杨云庆祝贺叶玲玲张冲尹尚莲李瑶瑶何昌霖董仙兰艾军《中国动物检疫》 CAS 2021年第7期42-47,共6页; 2006年8月荷兰暴发的蓝舌病8型(BTV-8)疫情已蔓延至欧洲大陆,而国内目前尚未发现BTV-8感染的报道。为评估BTV-8传入国内的风险,采用定性评估方法,通过收集BTV-8疫源地国家的疫情信息数据,结合其病原学特征、传播媒介、分布及流行情况、... 展开更多; 关键词蓝舌病蓝舌病病毒血清8型定性评估传入风险; 在线阅读下载PDF 职称材料

几种外来动物病毒多重普通和实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其初步应用: 6; 作者赵文华李富祥杨仕标《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2022年第2期27-33,38,共8页; 为了能够同时开展对小反刍兽疫病毒(PPRV)、蓝舌病血清8型病毒(BTV8)、鹿流行性出血热血清1型病毒(EHDV1)和非洲马瘟病毒(AHSV)4种外来动物疫病病原体的核酸检测,本试验根据GenBank中相关病毒序列设计引物和探针,建立多重普通逆转录PCR(... 展开更多; 关键词小反刍兽疫病毒蓝舌病病毒8型流行性出血热病毒1型非洲马瘟病毒四重普通RT-PCR 三重实时荧光定量RT-PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蓝舌病病毒8型VP2蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定被引量：8: 1; 作者席娜赵国辉孙恩成秦永丽孙亮魏天徐青元杨涛孙晶刘二战钱爱东吴东来; 机构吉林农业大学动物科学技术学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期318-322,共5页; 基金国家自然科学基金(31302065) 中国博士后科学基金(2013M540172) +2 种基金兽医生物技术国家重点实验室基金(SKLVBP201316); 文摘为制备蓝舌病病毒03TV）8型VP2蛋白的单克隆抗体（MAb）TL鉴定其抗原表位，本研究采用Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统表达并纯化的重组VP2蛋白免疫BALB／c小鼠，三免后取小鼠脾淋巴细胞与SP2／0细胞进行融合，并以纯化的重组VP2蛋白为包被抗原，通过间接ELISA筛选出两株能够稳定分泌抗BTV8VP2蛋白的MAbs杂交瘤细胞株（2G4和387）。间接免疫荧光结果表明：2G4和387与BTV8均呈阳性反应，与BTV1～7、BTV9-24、茨城病毒、中山病毒以及赤羽病毒均呈阴性反应。Westernblot结果显示，2G4和387均能够识别BTV8及BTV8重组VP2蛋白。Ig亚类鉴定2G4和387均为IgG1／κ链。利用原核表达的96条覆盖VP2全长的麦芽糖结合蛋白（MBP）融合短肽对MAbs的抗原表位进行鉴定，结果表明：MAb2G4识别的抗原表位为捌LCRLLSTIGRKMCNTE^296。本研究结果为BTV8型特异性检测方法的建立及VP2蛋白结构和功能的研究奠定了基础。; 关键词蓝舌病病毒8型 VP2蛋白真核表达单克隆抗体抗原表位; Keywords bluetongue virus serotype 8 VP2 protein eukaryotic expression monoclonal antibody antigen epitopes; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蓝舌病病毒8型可视化RT-LAMP检测方法的建立被引量：2: 2; 作者李富祥赵文华杨仕标; 机构云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1027-1031,共5页; 基金国家重点研发计划项目(2017YFD0501805、2017YFD0501801) 云南省创新人才计划项目(2017HB090); 文摘为建立蓝舌病病毒8型(BTV-8)可视化RT-LAMP检测方法,本研究根据BTV-8外衣壳蛋白(VP2)基因保守序列设计2对BTV-8血清型特异性引物,通过反应条件优化建立了BTV-8可视化RT-LAMP检测方法。该方法最佳反应条件为60℃1 h;利用本实验建立的方法检测BTV-8,以及其它23个血清型BTV以及口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒、鹿流行性出血热病毒、阿卡斑病毒和狂犬病病毒,结果显示除BTV-8外,该方法与其它病原无交叉反应,特异性较强;该方法最低可检测到8.3×10-10 ng/μL的病毒RNA,敏感性是OIE标准套式RT-PCR检测方法的10倍,敏感性较高。应用建立的RT-LAMP方法和普通RT-PCR方法对38份牛羊临床样品进行检测,两种方法检测结果一致均为阴性。本研究建立的BTV-8可视化RT-LAMP检测方法具有特异性强、敏感性高、操作简便、快速和高通量检测的优点,为BTV-8的可视化快速检测提供可行方法。; 关键词蓝舌病病毒8型反转录环介等温扩增快速检测; Keywords Bluetongue virus serotype 8 RT-LAMP visual detection; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蓝舌病病毒8型实时荧光RT-RAA检测方法的建立及应用被引量：4: 3; 作者曾俊霞李驰巴娟罗敏意蓝间媛许枣珠罗丽霞刘进芳侯月娥; 机构珠海科艺普检测科技有限公司珠海市现代农业发展中心中山市小榄镇农业服务中心; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1178-1182,共5页; 基金 2020年珠海市畜禽新品种新技术的引进试验与示范。; 文摘为建立蓝舌病病毒8型(BTV-8)的快速检测方法,本实验根据GenBank中BTV-8 VP2基因保守序列,设计并合成特异性引物和探针,经各反应条件的优化,建立BTV-8实时荧光重组酶介导扩增(RT-RAA)检测方法。结果显示,该方法仅对BTV-8呈阳性反应,对BTV其他血清型、小反刍兽疫病毒、牛病毒性腹泻病毒、伪狂犬病病毒和口蹄疫病毒均为阴性结果,特异性强;对重组质粒标准品的最低检测限为20拷贝/μL,敏感性与已报道的BTV-8荧光定量RT-PCR检测方法相同;批内和批间变异系数均小于5%,重复性好。对146份临床血清样品和4份盲样进行检测,结果与已报道的荧光定量RT-PCR方法检测结果一致,其中1份盲样检测结果为阳性其余样品均为阴性,二者符合率达100%。本研究建立的BTV-8实时荧光RT-RAA检测方法具有特异性强、灵敏度高、快速、稳定性好的优点,可以应用于蓝舌病流行病学调查和BTV感染的早期监测。; 关键词蓝舌病病毒8型实时荧光RT-RAA 检测方法; Keywords Bluetongue virus serotype 8 real-time fluorescent RT-RAA detection method; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蓝舌病病毒8型实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用被引量：2: 4; 作者林彦星花群俊张彩虹曹琛福阮周曦曾少灵史卫军黄超华杨俊兴花群义; 机构深圳海关动植物检验检疫技术中心云南省武定县动物疫病预防控制中心; 出处《动物医学进展》北大核心 2020年第8期44-48,共5页; 基金国家重点研发计划项目资助(2017YFD0501805、2017YFD0502304)。; 文摘根据蓝舌病病毒8型(BTV-8)VP2基因序列(Seg-2)设计特异性引物和探针,建立了BTV-8实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)检测方法。结果表明该法特异性强,能准确检测BTV-8核酸,与蓝舌病病毒其他血清型病毒、鹿流行性出血热病毒(EHDV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)等病原核酸无交叉反应;最低可检测核酸浓度为2.8×10^3 copies/mL;Ct值组内和组间变异系数(CV)均小于2%。用所建立方法对115份临床样品进行检测,结果均为阴性,与文献报道的方法检测结果一致。建立的RT-qPCR方法可用于BTV-8的临床检测和流行病学调查。; 关键词蓝舌病病毒8型实时荧光定量RT-PCR 检测; Keywords Bluetongue virus serotype 8(BTV-8) RT-qPCR detection; 分类号 S851.33 [农业科学—预防兽医学] S852.659.4 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蓝舌病病毒血清8型定性传入风险评估被引量：2: 5; 作者罗倩敏韩佃刚董俊杨云庆祝贺叶玲玲张冲尹尚莲李瑶瑶何昌霖董仙兰艾军; 机构昆明海关技术中心; 出处《中国动物检疫》 CAS 2021年第7期42-47,共6页; 基金国家重点研发计划项目(2017YFF0210202,2016YFD0501104) 云南省院士专家工作站项目(2018IC078)。; 文摘 2006年8月荷兰暴发的蓝舌病8型(BTV-8)疫情已蔓延至欧洲大陆,而国内目前尚未发现BTV-8感染的报道。为评估BTV-8传入国内的风险,采用定性评估方法,通过收集BTV-8疫源地国家的疫情信息数据,结合其病原学特征、传播媒介、分布及流行情况、传染源、传播途径和易感动物等方面的研究内容进行传入风险分析。鉴于我国与欧洲BTV-8疫源地各国的畜产品贸易以及活动物、精液和胚胎交易频繁,贸易数量巨大,而且BTV-8还可以通过家养动物与野生动物接触以及库蠓等媒介传播,综合分析认为BTV-8传入国内的风险较高。建议加强边境口岸检验检疫,以及牛羊等反刍动物及库蠓的BTV-8监测,防范BTV-8传入国内,并做到传入时早发现、早控制。; 关键词蓝舌病蓝舌病病毒血清8型定性评估传入风险; Keywords bluetongue BTV-8 qualitative assessment entry risk; 分类号 S852.23 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名几种外来动物病毒多重普通和实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其初步应用: 6; 作者赵文华李富祥杨仕标; 机构云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2022年第2期27-33,38,共8页; 基金国家重点研发项目(2017YFD0501805,2017YFD0501801) 国家自然科学基金项目(32060809)。; 文摘为了能够同时开展对小反刍兽疫病毒(PPRV)、蓝舌病血清8型病毒(BTV8)、鹿流行性出血热血清1型病毒(EHDV1)和非洲马瘟病毒(AHSV)4种外来动物疫病病原体的核酸检测,本试验根据GenBank中相关病毒序列设计引物和探针,建立多重普通逆转录PCR(RT-PCR)和实时荧光定量RT-PCR检测方法,并在采集的临床样本检测中进行初步应用验证。结果显示:建立的PPRV/BTV8/EHDV1三重实时荧光定量RT-PCR检测方法仅对PPRV、BTV8和EHDV1有特异荧光信号,检测敏感度可达10^(1.70)~10^(2.08) copies/μL DNA;建立的PPRV/BTV8/EHDV1/AHSV四重普通RT-PCR方法可特异性同步检测PPRV、BTV8、EHDV1和AHSV,检测敏感度可达10^(3) copies/μL DNA;2种方法对羊痘、羊口疮、口蹄疫、阿卡斑、牛病毒性腹泻等临床相似的病毒均无扩增。在925份临床样本中检测出1例PPRV核酸阳性样本;经核苷酸序列测定及BLAST比对确定为谱系Ⅳ型PPRV毒株序列。本试验所建立的三重实时荧光定量RT-PCR检测方法和四重普通RT-PCR方法可特异性同步检测相应的3种或4种病毒病原,且具有临床样本检测的应用潜力。; 关键词小反刍兽疫病毒蓝舌病病毒8型流行性出血热病毒1型非洲马瘟病毒四重普通RT-PCR 三重实时荧光定量RT-PCR; Keywords peste des petits ruminants virus(PPRV) bluetongue virus serotype 8(BTV8) epizootic haemorrhagic disease virus serotype 1(EHDV1) African horse sickness virus(AHSV) quadruplex routine RT-PCR triplex fluorescent quantitative real-time RT-PCR; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	蓝舌病病毒8型VP2蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定	席娜赵国辉孙恩成秦永丽孙亮魏天徐青元杨涛孙晶刘二战钱爱东吴东来	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	8	在线阅读下载PDF 职称材料
2	蓝舌病病毒8型可视化RT-LAMP检测方法的建立	李富祥赵文华杨仕标	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2019	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	蓝舌病病毒8型实时荧光RT-RAA检测方法的建立及应用	曾俊霞李驰巴娟罗敏意蓝间媛许枣珠罗丽霞刘进芳侯月娥	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2022	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	蓝舌病病毒8型实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用	林彦星花群俊张彩虹曹琛福阮周曦曾少灵史卫军黄超华杨俊兴花群义	《动物医学进展》北大核心	2020	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	蓝舌病病毒血清8型定性传入风险评估	罗倩敏韩佃刚董俊杨云庆祝贺叶玲玲张冲尹尚莲李瑶瑶何昌霖董仙兰艾军	《中国动物检疫》 CAS	2021	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	几种外来动物病毒多重普通和实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其初步应用	赵文华李富祥杨仕标	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2022	0	在线阅读下载PDF 职称材料