双氢青蒿素对蓝氏贾第鞭毛虫滋养体蛋白质的损伤 被引量：8

1

作者 余源 陈阳 +6 位作者 王卫亮 杨志宏 田玉娜 王玥 田喜凤 卢思奇 赵永强 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期995-998,1003,共5页

目的探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对体外培养的蓝氏贾第鞭毛虫(Giardialamblia)滋养体蛋白质的损伤作用。方法用改良TYI-S-33培养基培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体;设立实验组(DHA组)和正常对照组(C组)。实验组用含双氢青蒿素的... 目的探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对体外培养的蓝氏贾第鞭毛虫(Giardialamblia)滋养体蛋白质的损伤作用。方法用改良TYI-S-33培养基培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体;设立实验组(DHA组)和正常对照组(C组)。实验组用含双氢青蒿素的培养基(含LC50=200μg/mL的DHA)培养;对照组培养基不含药物。提取各组虫体总蛋白,经Brad-ford法进行蛋白质定量,样本经2D-电泳和硝酸银染色后,扫描检测凝胶电泳图蛋白点的数量和种类,获取蛋白质点匹配信息,挑选匹配性高的蛋白点,进行质谱(MALDI-TOF MS)分析。结果经双氢青蒿素作用后虫体总蛋白质含量(0.6993μg/mL)明显低于对照组(4.8241μg/mL),二者差异有显著性(P<0.001)。蛋白质二维电泳凝胶图分析结果显示,正常对照组(C组)蛋白点密集,约1253个点,布满整块凝胶,蛋白表达量高(蛋白点颜色深且清晰、明亮);与此相反,实验组(DHA组)蛋白点显著减少,DHA作用6h后约617个点,作用12h后约326个点,蛋白表达量明显降低(蛋白点颜色浅,不清晰)。其次,正常对照组与双氢青蒿素组的12kDa^30kDa、等电点pI3.0~7.6范围内蛋白点表达量存在明显差异,即实验组该范围内大多数蛋白点完全消失,45kD^60kDa的蛋白点仅剩6个点。质谱分析鉴定结果显示,在正常对照组胶图所选的80个匹配良好的蛋白点中,鉴定出6种骨架蛋白(14个点),而实验组(DHA组)蛋白胶图中相对应的蛋白点消失。结论双氢青蒿素对蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的蛋白质具有明显的损伤作用,其中包括细胞骨架蛋白。 展开更多

关键词 蓝氏贾第鞭毛虫 双向电泳 质谱 骨架蛋白

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蓝氏贾第鞭毛虫α-7．1、α-11贾第素的原核表达及抗原活性鉴定 被引量：8

2

作者 王洋 杨志宏 +6 位作者 王沂 曹蕾 余源 陈阳 王卫亮 慈雅丽 田喜凤 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期474-478,共5页

目的原核表达蓝氏贾第鞭毛虫的α-7.1、α-11贾第素蛋白。方法经RT-PCR获得α-7.1、α-11贾第素基因片段,经双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),构建成为重组表达载体pET-28a(+)-α-7.1及pET-28a(+)-α-11,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)。I... 目的原核表达蓝氏贾第鞭毛虫的α-7.1、α-11贾第素蛋白。方法经RT-PCR获得α-7.1、α-11贾第素基因片段,经双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),构建成为重组表达载体pET-28a(+)-α-7.1及pET-28a(+)-α-11,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)。IPTG诱导后,收集菌体,裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测。结果成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-α-7.1和pET-28a(+)-α-11,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中高效表达,SDS-PAGE及Western blot分析显示,在相对分子量约43kD和35kD的位置分别出现目的蛋白条带,与理论值相符;通过相应α-7.1、α-11贾第素抗血清的Westernblot证实两种贾第素重组蛋白的抗原活性良好;经Ni-NTA亲和层析柱纯化获得了高纯度的重组的α-7.1、α-11贾第素融合蛋白。结论成功地克隆、表达并纯化了具有良好抗原活性的α-7.1、α-11贾第素蛋白。 展开更多

关键词 蓝氏贾第鞭毛虫 α-7.1贾第素 α-11贾第素 原核表达

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蓝氏贾第鞭毛虫α-4贾第素的原核表达及纯化 被引量：10

3

作者 王洋 余源 +5 位作者 王卫亮 陈阳 慈雅丽 田喜凤 郑佳 杨志宏 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期465-469,共5页

目的原核表达并纯化蓝氏贾第鞭毛虫的α-4贾第素蛋白。方法经RT-PCR获得α-4贾第素基因片段,经双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),构建成为重组表达载体pET-28a(+)-α-4,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)。IPTG诱导后,收集菌体,裂解后进行SDS... 目的原核表达并纯化蓝氏贾第鞭毛虫的α-4贾第素蛋白。方法经RT-PCR获得α-4贾第素基因片段,经双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),构建成为重组表达载体pET-28a(+)-α-4,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)。IPTG诱导后,收集菌体,裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测,并用Ni-NTA亲和层析柱纯化融合蛋白。结果成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-α-4,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中高效表达,目的蛋白以包涵体形式存在;SDS-PAGE及Western blot分析显示,在相对分子量约34 kD的位置出现目的蛋白条带,与理论值相符;经Ni-NTA亲和层析柱纯化获得了高纯度的重组的α-4贾第素融合蛋白。结论成功克隆、表达并纯化了α-4贾第素蛋白,为α-4贾第素的细胞定位及功能研究提供了必要条件。 展开更多

关键词 蓝氏贾第鞭毛虫 α-4贾第素 原核表达

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蓝氏贾第鞭毛虫染色体核型初步观察 被引量：4

4

作者 沈海娥 李冀 +3 位作者 田喜凤 甄静艳 张岸平 卢思奇 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期352-353,共2页

目的初步观察蓝氏贾第鞭毛虫细胞分裂过程中典型凝集染色体的形成及其数目。方法用改良TYI-S-33培养基培养贾第虫滋养体。在结束培养前4h弃去旧培养基,加入事先预热的含有秋水仙素(终浓度为0.2μg/ml)的新鲜培养液。低渗处理55min,用甲... 目的初步观察蓝氏贾第鞭毛虫细胞分裂过程中典型凝集染色体的形成及其数目。方法用改良TYI-S-33培养基培养贾第虫滋养体。在结束培养前4h弃去旧培养基,加入事先预热的含有秋水仙素(终浓度为0.2μg/ml)的新鲜培养液。低渗处理55min,用甲醇∶冰醋酸(体积比=3∶1)固定液固定。收集细胞、滴片、Giemsa染液染色,光学显微镜观察结果。结果获得了较好的染色体分裂相。贾第虫染色体的数目多数为2n=8条。50个细胞分裂相中,有35个为8条染色体,10个为9条染色体,5个为10条染色体。染色体微小呈小杆状,有时成对,形态相同。结论蓝氏贾第鞭毛虫在分裂过程中形成典型的凝集染色体,染色体数目为2n=10条。 展开更多

关键词 蓝氏贾第鞭毛虫 染色体 核型

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反复腹痛患儿蓝氏贾第鞭毛虫的检测与治疗 被引量：6

5

作者 廖红群 邱伟 +1 位作者 李新维 苏水莲 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期545-546,共2页

目的探讨儿童反复腹痛与蓝氏贾第鞭毛虫感染的关系和相应的治疗。方法对200例反复腹痛患儿进行蓝氏贾第鞭毛虫的检测并进行相应的治疗。结果发现蓝氏贾第鞭毛虫感染106例,感染率为53.0%。通过相应的治疗,总有效率为97.2%。结论儿童反复... 目的探讨儿童反复腹痛与蓝氏贾第鞭毛虫感染的关系和相应的治疗。方法对200例反复腹痛患儿进行蓝氏贾第鞭毛虫的检测并进行相应的治疗。结果发现蓝氏贾第鞭毛虫感染106例,感染率为53.0%。通过相应的治疗,总有效率为97.2%。结论儿童反复腹痛患儿中蓝氏贾第鞭毛虫感染率很高,反复腹痛儿童病因的检测应包括蓝氏贾第鞭毛虫,使治疗更有针对性。 展开更多

关键词 儿童 腹痛 蓝氏贾第鞭毛虫

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C2株蓝氏贾第鞭毛虫组蛋白H2B基因的克隆与同源性分析 被引量：3

6

作者 余源 李明 +6 位作者 李冀 沈海娥 王洋 李巍伟 赵丽娜 王崇罡 田喜凤 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1168-1171,共4页

目的获取C2株蓝氏贾第鞭毛虫H2B组蛋白基因序列,与WB株蓝氏贾第鞭毛虫及其他物种进行同源分析。方法 PCR扩增获取H2B组蛋白基因,连接pGM-T载体,转化E.coli DH5α感受态宿主细胞,挑选阳性克隆并进行序列分析,与美国WB株蓝氏贾第鞭毛虫及... 目的获取C2株蓝氏贾第鞭毛虫H2B组蛋白基因序列,与WB株蓝氏贾第鞭毛虫及其他物种进行同源分析。方法 PCR扩增获取H2B组蛋白基因,连接pGM-T载体,转化E.coli DH5α感受态宿主细胞,挑选阳性克隆并进行序列分析,与美国WB株蓝氏贾第鞭毛虫及模式生物H2B组蛋白基因和蛋白序列进行同源分析。结果测序C2株蓝氏贾第鞭毛虫H2B组蛋白基因序列,同源比对结果显示其基因序列与美国WB株完全一致,进化树分析表明贾第虫H2B组蛋白基因在进化过程中与其他物种分化较早。结论蓝氏贾第鞭毛虫H2B组蛋白基因同源分析结果显示贾第虫与其他现存真核生物亲缘关系较为疏远,为进一步研究蓝氏贾第鞭毛虫的生物进化地位提供有价值的资料。 展开更多

关键词 C2株蓝氏贾第鞭毛虫 H2B组蛋白 同源分析

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蓝氏贾第鞭毛虫诊断 被引量：8

7

作者 高正琴 贺争鸣 岳秉飞 《中国比较医学杂志》 北大核心 2015年第1期76-79,I0008,F0003,共6页

目的蓝氏贾第鞭毛虫作为一种重要的人兽共患寄生虫病贾第虫病的病原,其对SPF实验动物质量造成的潜在威胁不容忽视。本研究的目的是建立蓝氏贾第鞭毛虫快速诊断方法,并对17个生产厂家516批2562只SPF实验动物检查结果进行分析。方法用直... 目的蓝氏贾第鞭毛虫作为一种重要的人兽共患寄生虫病贾第虫病的病原,其对SPF实验动物质量造成的潜在威胁不容忽视。本研究的目的是建立蓝氏贾第鞭毛虫快速诊断方法,并对17个生产厂家516批2562只SPF实验动物检查结果进行分析。方法用直接镜检法、快速姬姆萨染色法和多重PCR方法,对蓝氏贾第鞭毛虫进行检测。结果在SPF实验动物中检出数量众多的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体和包囊,鉴定出蓝氏贾第鞭毛虫18S r DNA、β-giardin、TPI和GDH基因。直接镜检法、快速姬姆萨染色法和多重PCR方法均能检出蓝氏贾第鞭毛虫。17个生产厂家516批2562只SPF实验动物蓝氏贾第鞭毛虫阳性检出率22.9%(586/2562)。结论直接镜检法、快速姬姆萨染色法和多重PCR方法具有高度的敏感性和特异性,可用于蓝氏贾第鞭毛虫的快速诊断。17个生产厂家516批SPF实验动物蓝氏贾第鞭毛虫检查结果未能全部符合规定。 展开更多

关键词 蓝氏贾第鞭毛虫 直接镜检 快速姬姆萨染色 多重PCR SPF实验动物 质量分析

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抗蓝氏贾第鞭毛虫药物研究进展 被引量：2

8

作者 冯宪敏 朱枫 +1 位作者 藏秋雨 卢思奇 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期779-780,791,共3页

关键词 蓝氏贾第鞭毛虫病 药物 贾第虫病 原生生物 发育阶段 消化不良 哺乳动物 寄生性

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蓝氏贾第鞭毛虫滋养体有丝分裂的初步观察 被引量：2

9

作者 李冀 沈海娥 +5 位作者 张岸平 邵薇 陆霜玉 任兴波 卢思奇 田喜凤 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期370-372,388,共4页

目的观察体外培养的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体有丝分裂。方法用改良的TYI-S-33培养基培养贾第虫。从培养第6h开始,每间隔2h取分裂的细胞直至第24h,制备涂片,Giemsa染液染色,用光镜和透射电镜观察细胞分裂状况。结果有丝分裂前期:染色质凝集... 目的观察体外培养的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体有丝分裂。方法用改良的TYI-S-33培养基培养贾第虫。从培养第6h开始,每间隔2h取分裂的细胞直至第24h,制备涂片,Giemsa染液染色,用光镜和透射电镜观察细胞分裂状况。结果有丝分裂前期:染色质凝集形成细长的染色质丝;中期:形成大小约1μm的棒状染色体,且全部排列在细胞核中央,或分散在核内;后期:姐妹染色单体分开,向细胞核两极移动,核膜拉长;末期:核膜中间向内缢束呈葫芦状,细胞核缢裂成两个子核,随即进行胞质分裂。结论蓝氏贾第鞭毛虫滋养体有丝分裂与典型真核细胞相似,但分裂期核膜始终存在,为半开放式分裂。 展开更多

关键词 蓝氏贾第鞭毛虫 滋养体 有丝分裂

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蓝氏贾第鞭毛虫的免疫逃避机制 被引量：4

10

作者 王洋 田喜凤 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期909-913,共5页

蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)是一种世界性分布的机会性致病原虫,能够引起以腹泻为主要表现的贾第虫病,严重影响人类尤其是儿童的健康和发育。在贾第虫感染过程中,宿主的非特异性和特异性免疫系统均会产生强烈的抗贾第... 蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)是一种世界性分布的机会性致病原虫,能够引起以腹泻为主要表现的贾第虫病,严重影响人类尤其是儿童的健康和发育。在贾第虫感染过程中,宿主的非特异性和特异性免疫系统均会产生强烈的抗贾第虫效应,但贾第虫通过抗原漂变、L-精氨酸饥饿等机制逃避和抑制宿主的免疫反应,引起宿主的长期或反复感染。本文对宿主的抗贾第虫免疫以及贾第虫的免疫逃避机制做一综述。 展开更多

关键词 蓝氏贾第鞭毛虫 免疫逃避 抗原漂变 L-精氨酸饥饿

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双氢青蒿素对C2株蓝氏贾第鞭毛虫Alpha-7.3giardin基因mRNA表达水平的影响 被引量：1

11

作者 余源 陈阳 +7 位作者 葛爽 王洋 李巍伟 赵丽娜 刘阿倩 林志强 高雪 田喜凤 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期669-672,共4页

目的观察双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia)Alpha-7.3giardin(α-贾第素)基因mRNA表达水平的影响,探讨其对蓝氏贾第鞭毛虫骨架蛋白的损伤作用。方法用双氢青蒿素浓度为100μg/mL、200μg/mL的改... 目的观察双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia)Alpha-7.3giardin(α-贾第素)基因mRNA表达水平的影响,探讨其对蓝氏贾第鞭毛虫骨架蛋白的损伤作用。方法用双氢青蒿素浓度为100μg/mL、200μg/mL的改良TYI-S-33培养基分别培养C2株蓝氏贾第鞭毛虫2h、4h、8h、12h后,以不含药物组为对照,实时荧光定量RT-PCR检测药物作用后Alpha-7.3giardin基因mRNA表达水平的变化。结果双氢青蒿素作用虫体后Alpha-7.3giardin基因mRNA表达水平明显低于对照组,二者有显著性差异。结论双氢青蒿素对C2株蓝氏贾第鞭毛虫Alpha-7.3giardin基因mRNA的表达具有明显的抑制作用,抑制效果与药物浓度和作用时间相关,提示双氢青蒿素对蓝氏贾第鞭毛虫骨架蛋白具有损伤作用。 展开更多

关键词 C2株蓝氏贾第鞭毛虫 双氢青蒿素 Alpha-7.3 giardin 实时荧光定量RT—PCR

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用酶联免疫吸附试验诊断蓝氏贾第鞭毛虫病免疫价值的研究(英文) 被引量：1

12

作者 陈思礼 陈强 +5 位作者 袁媛 李玲 陈思义 廖林贵 SPITHILL Terry SMOOKER Peter 《华中师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期497-500,共4页

　用蓝氏贾第鞭毛虫纯培养虫株和超声粉碎可溶性虫体部分作为抗原,采用ELISA方法检测人体感染蓝氏贾第鞭毛虫血清免疫抗体并讨论其寄生虫学诊断价值.检测65份成人贾第虫病血清,其中55份IgG和/或IgA阳性,阳性率84.62%.20份10岁以下儿童... 　用蓝氏贾第鞭毛虫纯培养虫株和超声粉碎可溶性虫体部分作为抗原,采用ELISA方法检测人体感染蓝氏贾第鞭毛虫血清免疫抗体并讨论其寄生虫学诊断价值.检测65份成人贾第虫病血清,其中55份IgG和/或IgA阳性,阳性率84.62%.20份10岁以下儿童贾第虫病人血清无1份阳性.结果提示蓝氏贾第鞭毛虫感染产生的体液免疫反应存在有年龄依赖性,酶联免疫吸附试验用于蓝氏贾第鞭毛虫病免疫诊断具有局限性. 展开更多

关键词 循环抗体 蓝氏贾第鞭毛虫 酶联免疫吸附试验 诊断价值

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蓝氏贾第鞭毛虫类高尔基体的研究 被引量：1

13

作者 朱艳红 雷清华 +2 位作者 彭挺 牛安欧 卢思奇 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期672-674,677,共4页

目的探讨类高尔基体结构在蓝氏贾第鞭毛虫滋养体和成囊不同时段的存在情况及其动态变化机理。方法用可特异性标记真核细胞高尔基体的荧光染料C6-NBD神经酰胺,标记有活性的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体及成囊6、12、18h虫体,并用荧光显微镜观察... 目的探讨类高尔基体结构在蓝氏贾第鞭毛虫滋养体和成囊不同时段的存在情况及其动态变化机理。方法用可特异性标记真核细胞高尔基体的荧光染料C6-NBD神经酰胺,标记有活性的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体及成囊6、12、18h虫体,并用荧光显微镜观察。同时利用半定量RT-PCR方法检测高尔基体膜结合蛋白golgin245和膜泡融合的调节蛋白Rab1在蓝氏贾第鞭毛虫对数生长期滋养体及成囊6、12、24h的虫体中的表达水平。结果极少数蓝氏贾第鞭毛虫滋养体被C6-NBD神经酰胺标记;多数处于成囊6、12、18h时段的虫体均可见被特异标记成亮绿色的核周围区域。golgin245和Rab1在滋养体及成囊诱导6、12、24h的虫体中的表达水平无显著变化。结论蓝氏贾第鞭毛虫在成囊过程中出现类高尔基体结构,而在对数期滋养体中却没有。在蓝氏贾第鞭毛虫成囊过程中,高尔基体结构成分无大量合成,出现的类高尔基体结构可能是各组分临时组装的结果。 展开更多

关键词 蓝氏贾第鞭毛虫 类高尔基体 C6-NBD神经酰胺 半定量RT—PCR

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蓝氏贾第鞭毛虫滋养体染色体扫描电镜观察 被引量：1

14

作者 沈海娥 李冀 +4 位作者 路瑶 张文丽 任兴波 布仁满都呼 田喜凤 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期696-698,共3页

目的电镜观察蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的染色体数目及形态。方法用改良TYI-S-33培养基培养贾第虫滋养体。制备分散度较好的染色体玻片标本,对玻片标本进行扫描电镜常规处理,扫描电镜观察。结果在扫描电镜下观察到了蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的... 目的电镜观察蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的染色体数目及形态。方法用改良TYI-S-33培养基培养贾第虫滋养体。制备分散度较好的染色体玻片标本,对玻片标本进行扫描电镜常规处理,扫描电镜观察。结果在扫描电镜下观察到了蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的染色体,染色体数目为2n=10条,1号染色体为亚中央着丝粒染色体,2号、3号、4号、5号为端着丝粒染色体。结论通过电镜观察认为蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的染色体核型公式为2n=10=2sm+8t。 展开更多

关键词 蓝氏贾第鞭毛虫 滋养体 染色体 扫描电镜

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C2株蓝氏贾第鞭毛虫SUMO基因的克隆、原核表达和生物信息学分析(英文) 被引量：1

15

作者 王洋 王沂 +3 位作者 李冀 李思瑾 楚晗 田喜凤 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期785-790,共6页

目的克隆、原核表达C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)的小泛素相关修饰物(small ubiquitn-related modifier,SUMO)蛋白,并对其序列进行生物信息学分析。方法提取C2株贾第虫基因组DNA,以基因组DNA为模板PCR获得SUMO基因片... 目的克隆、原核表达C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)的小泛素相关修饰物(small ubiquitn-related modifier,SUMO)蛋白,并对其序列进行生物信息学分析。方法提取C2株贾第虫基因组DNA,以基因组DNA为模板PCR获得SUMO基因片段,双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),经测序验证并进行生物信息学分析,将重组质粒pET-28a(+)-SUMO转化大肠杆菌Rosetta(DE3)。IPTG诱导后收集菌体,裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测。结果成功构建了C2株贾第虫SUMO基因原核表达载体pET-28a(+)-SUMO,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中高效表达,SDSPAGE及Western blot分析显示,在相对分子量约12.7kD的位置出现目的蛋白条带,与理论值相符;生物信息学分析显示C2株贾第虫SUMO序列与WB株相同,其蛋白形成类似"泛素折叠"样结构,进化分析表明贾第虫SUMO蛋白与其它现存真核生物亲缘关系较远。结论成功地克隆、表达了贾第虫SUMO蛋白,明确了该蛋白的空间结构和进化地位,为贾第虫SUMO蛋白抗体的制备及相关蛋白功能的研究提供了基础。 展开更多

关键词 蓝氏贾第鞭毛虫 SUMO原核表达 生物信息学

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蓝氏贾第鞭毛虫C2株rRNA基因ITS1-5.8SrDNA-ITS2序列测定与分析 被引量：2

16

作者 温少芳 卢思奇 王凤云 《首都医科大学学报》 CAS 2005年第6期769-770,共2页

关键词 蓝氏贾第鞭毛虫 RRNA基因 ITS1-5.8SrDNA-ITS2 序列测定 内转录间隔区

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胆囊癌伴蓝氏贾第鞭毛虫感染一例报告 被引量：1

17

作者 侯丽娜 梁开忠 高春芳 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1305-1305,共1页

1 临床资料 患者，女，46岁。因反复右上腹疼痛不适10余年，加重1个月，以“胆囊癌伴肝、肺多处转移”于2007年3月28日收治入本院。患者右上腹持续性疼痛，阵发性加剧，无肩背部放射痛，不伴发热。疼痛以进食油腻食物后为重。

关键词 胆囊肿瘤 蓝氏贾第鞭毛虫 感染

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C2株蓝氏贾第鞭毛虫组蛋白H3基因的克隆表达与基因分析(英文)

18

作者 余源 葛爽 +3 位作者 李明 刘阿倩 林志强 田喜凤 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期568-574,共7页

目的克隆表达C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白基因,与WB株蓝氏贾第鞭毛虫进行同源分析,构建C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白分子进化树。方法 PCR扩增获取H3组蛋白基因,构建pGM-T-H3重组载体,转化E.coli TOP10感受态宿主细胞,挑选阳性克隆并进... 目的克隆表达C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白基因,与WB株蓝氏贾第鞭毛虫进行同源分析,构建C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白分子进化树。方法 PCR扩增获取H3组蛋白基因,构建pGM-T-H3重组载体,转化E.coli TOP10感受态宿主细胞,挑选阳性克隆并进行序列分析,利用限制性内切酶NcoⅠ和XhoⅠ构建pET28a(+)-H3重组载体,转化E.coli Rosetta(DE3),IPTG诱导组蛋白H3表达,Western blotting鉴定表达,与美国WB株蓝氏贾第鞭毛虫及模式生物H3组蛋白基因和蛋白序列进行同源分析。结果成功克隆表达C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白基因,同源比对结果显示C2株蓝氏贾第鞭毛虫基因序列与美国WB株完全一致,但与其他现存真核生物亲缘关系较为疏远。结论 C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白分子进化树分析表明贾第虫H3组蛋白基因在进化过程中与其他物种分化较早,本研究结果为进一步研究蓝氏贾第鞭毛虫的生物进化地位提供有价值的实验资料。 展开更多

关键词 C2株蓝氏贾第鞭毛虫 克隆 表达 同源性分析 分子进化树

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C2株蓝氏贾第鞭毛虫TCTP基因的克隆、表达和序列分析（英文）

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作者 王沂 余源 +3 位作者 田喜凤 李冀 楮晗 王洋 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期717-723,共7页

目的克隆C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)的翻译调控肿瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein,TCTP)编码区,对其进行生物信息学分析和原核表达。方法根据WB株贾第虫TCTP编码区序列设计引物,以C2株贾第虫基因... 目的克隆C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)的翻译调控肿瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein,TCTP)编码区,对其进行生物信息学分析和原核表达。方法根据WB株贾第虫TCTP编码区序列设计引物,以C2株贾第虫基因组DNA为模板扩增获得TCTP编码区片段,双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),将酶切和测序验证正确的重组质粒转化E.coli Rosetta(DE3),经IPTG诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE及Western blot鉴定蛋白产物,采用Ni-NTA经亲和层析纯化重组蛋白。同时根据测序结果分析C2株贾第虫TCTP蛋白结构特征和进化关系。结果克隆了包含酶切位点全长470bp的C2株贾第虫TCTP编码区,构建了原核表达载体pET-28a(+)-TCTP,在Rosetta(DE3)中表达、纯化得到了相对分子量约18.5kDa的融合蛋白,与预期相符;测序结果显示C2株贾第虫TCTP序列与WB株相同,生物信息学分析显示贾第虫TCTP蛋白虽然序列长度较其它物种更短但与裂殖酵母TCTP空间结构相似,均由4个β折叠和3个主要的α螺旋组成,位于序列中部的不规则环状结构更小,仅9个氨基酸残基组成,在进化上与其它真核生物亲缘关系较远。结论成功克隆表达了贾第虫TCTP,为TCTP功能及贾第虫致病机制的研究提供了实验依据。 展开更多

关键词 蓝氏贾第鞭毛虫 翻译调控肿瘤蛋白 原核表达 序列分析

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蓝氏贾第鞭毛虫染色体的制备

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作者 李冀 沈海娥 +2 位作者 布仁满都呼 高青 田喜凤 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第6期1182-1184,共3页

目的:探讨蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)在分裂过程中是否形成典型的凝集染色体以及染色体的数目。方法:用改良的TYI-S-33培养基培养贾第虫滋养体。分别在不同浓度的秋水仙素(0、0.05、0.10、0.20、0.40和0.80mg/L)、低渗处理不同时间(30... 目的:探讨蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)在分裂过程中是否形成典型的凝集染色体以及染色体的数目。方法:用改良的TYI-S-33培养基培养贾第虫滋养体。分别在不同浓度的秋水仙素(0、0.05、0.10、0.20、0.40和0.80mg/L)、低渗处理不同时间(30、50、55、65和80min)和不同固定液[V(甲醇):V(冰醋酸)为3:1和2:1]等条件下制备贾第虫染色体。结果和结论:在制备贾第虫染色体时,秋水仙素的最佳作用浓度为0.20mg/L,最佳低渗处理时间为55min,固定液推荐V(甲醇):V(冰醋酸)为3:1。贾第虫在分裂过程中形成典型的凝集染色体,染色体数目为2n=10。 展开更多

关键词 蓝氏贾第鞭毛虫 染色体 制备

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