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马尾松β-蒎烯合酶基因克隆以及对松材线虫侵染的响应
被引量：
9
1
作者
刘彬
刘青华
+3 位作者
周志春
罗柠
解懿妮
陈献志
《林业科学研究》
CSCD
北大核心
2020年第6期1-12,共12页
[目的]对马尾松β-蒎烯合酶基因PmPinS进行克隆,分析其序列特征和高抗易感马尾松中松材线虫侵染后的表达模式,为解析马尾松抗松材线虫病机制提供理论基础。[方法]采用PCR扩增技术克隆马尾松Pm-PinS的全长编码区序列,进行同源氨基酸序列...
[目的]对马尾松β-蒎烯合酶基因PmPinS进行克隆,分析其序列特征和高抗易感马尾松中松材线虫侵染后的表达模式,为解析马尾松抗松材线虫病机制提供理论基础。[方法]采用PCR扩增技术克隆马尾松Pm-PinS的全长编码区序列,进行同源氨基酸序列比对和系统发育分析,利用生物信息学方法分析其基因特征;利用实时定量PCR技术分析马尾松蒎烯合酶基因在接种松材线虫后的高抗和易感马尾松中的表达模式。[结果]克隆获得马尾松蒎烯合酶基因的全长编码区序列,包含1878 bp的完整开放阅读框,编码625个氨基酸,分子量为71.95 kD,二级结构以α-螺旋和β-折叠为主,含有萜类合酶典型的RR(X)8W、DDXXD和NSE/DTE结构域。系统进化分析发现,PmPinS与扭叶松(-)β-蒎烯合酶聚为一支,序列相似性达93.16%。对高抗和易感马尾松PmPinS在松材线虫接种后的表达模式进行分析发现,PmPinS在高抗马尾松中的表达量显著高于易感马尾松,且在接种30 d内呈现上升趋势,而易感马尾松PmPinS在接种1 d后迅速下降,在接种2 a后,PmPinS表达量在高抗马尾松茎部组织特异性高表达。对松材线虫外源施加α-蒎烯、β-蒎烯及其混合溶液,结果表明:α-蒎烯与β-蒎烯可明显抑制松材线虫存活率,且混合溶液抑制作用更明显。[结论]PmPinS为马尾松单萜合酶家族的一员,复杂催化GPP参与β-蒎烯的合成,该基因在高抗马尾松茎部组织特异性高表达,同时其可能的催化产物α-蒎烯与β-蒎烯对松材线虫具有明显的抑制作用,表明其在马尾松抗松材线虫过程中起正向调控作用。
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关键词
β-
蒎烯合酶
马尾松
松材线虫病
抑制作用
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职称材料
关键酶饱和突变提高酿酒酵母蒎烯产量
被引量：
1
2
作者
任全路
陆信曜
+1 位作者
宗红
诸葛斌
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第22期30-34,共5页
蒎烯是一种应用广泛的天然单萜类化合物,特别是具有高能值的蒎烯二聚体在燃料领域有着极大的应用前景,蒎烯合酶活性是限制酿酒酵母高效生产蒎烯的重要因素。该研究希望获得在酿酒酵母中表现更优的蒎烯合酶突变体,为蒎烯在酿酒酵母中的...
蒎烯是一种应用广泛的天然单萜类化合物,特别是具有高能值的蒎烯二聚体在燃料领域有着极大的应用前景,蒎烯合酶活性是限制酿酒酵母高效生产蒎烯的重要因素。该研究希望获得在酿酒酵母中表现更优的蒎烯合酶突变体,为蒎烯在酿酒酵母中的高效合成提供借鉴。该研究在甲羟戊酸(mevalonate,MVA)通路强化的酿酒酵母中,表达了蒎烯合酶Pt30的Q456位点的饱和突变体,对工程菌株进行两相摇瓶发酵,检测最终蒎烯的产量。结果显示,在构建的蒎烯合酶Pt30的Q456位点饱和突变体中,Pt30(Q456K)和Pt30(Q456I)突变体将蒎烯从不可测定提高到了0.017、0.041 mg/L。蒎烯合酶Pt30的Q456K和Q456I突变体,相对于Pt30野生型酶提高了蒎烯在酿酒酵母中的产量,这也证明了Q456这一位点对蒎烯合酶Pt30的重要性,也为其他蒎烯合酶的改造提供了参考。
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关键词
蒎
烯
酿酒酵母
蒎烯合酶
饱和突变
两相发酵
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职称材料
题名
马尾松β-蒎烯合酶基因克隆以及对松材线虫侵染的响应
被引量：
9
1
作者
刘彬
刘青华
周志春
罗柠
解懿妮
陈献志
机构
中国林业科学研究院亚热带林业研究所
浙江省临海市自然资源和规划局
出处
《林业科学研究》
CSCD
北大核心
2020年第6期1-12,共12页
基金
“十三五”浙江省林木新品种选育重大专项课题(2016C02056-4)
国家自然科学基金项目(31470670)
+1 种基金
江西省林业厅林业科技创新专项项目(201703)
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(CAFYBB2017ZA01-2)。
文摘
[目的]对马尾松β-蒎烯合酶基因PmPinS进行克隆,分析其序列特征和高抗易感马尾松中松材线虫侵染后的表达模式,为解析马尾松抗松材线虫病机制提供理论基础。[方法]采用PCR扩增技术克隆马尾松Pm-PinS的全长编码区序列,进行同源氨基酸序列比对和系统发育分析,利用生物信息学方法分析其基因特征;利用实时定量PCR技术分析马尾松蒎烯合酶基因在接种松材线虫后的高抗和易感马尾松中的表达模式。[结果]克隆获得马尾松蒎烯合酶基因的全长编码区序列,包含1878 bp的完整开放阅读框,编码625个氨基酸,分子量为71.95 kD,二级结构以α-螺旋和β-折叠为主,含有萜类合酶典型的RR(X)8W、DDXXD和NSE/DTE结构域。系统进化分析发现,PmPinS与扭叶松(-)β-蒎烯合酶聚为一支,序列相似性达93.16%。对高抗和易感马尾松PmPinS在松材线虫接种后的表达模式进行分析发现,PmPinS在高抗马尾松中的表达量显著高于易感马尾松,且在接种30 d内呈现上升趋势,而易感马尾松PmPinS在接种1 d后迅速下降,在接种2 a后,PmPinS表达量在高抗马尾松茎部组织特异性高表达。对松材线虫外源施加α-蒎烯、β-蒎烯及其混合溶液,结果表明:α-蒎烯与β-蒎烯可明显抑制松材线虫存活率,且混合溶液抑制作用更明显。[结论]PmPinS为马尾松单萜合酶家族的一员,复杂催化GPP参与β-蒎烯的合成,该基因在高抗马尾松茎部组织特异性高表达,同时其可能的催化产物α-蒎烯与β-蒎烯对松材线虫具有明显的抑制作用,表明其在马尾松抗松材线虫过程中起正向调控作用。
关键词
β-
蒎烯合酶
马尾松
松材线虫病
抑制作用
Keywords
β-pinene synthase
Pinus massoniana
pine wilt disease
inhibition
分类号
S718.46 [农业科学—林学]
S763 [农业科学—森林保护学]
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职称材料
题名
关键酶饱和突变提高酿酒酵母蒎烯产量
被引量：
1
2
作者
任全路
陆信曜
宗红
诸葛斌
机构
江南大学
江南大学
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第22期30-34,共5页
基金
国家自然科学基金(31970033)。
文摘
蒎烯是一种应用广泛的天然单萜类化合物,特别是具有高能值的蒎烯二聚体在燃料领域有着极大的应用前景,蒎烯合酶活性是限制酿酒酵母高效生产蒎烯的重要因素。该研究希望获得在酿酒酵母中表现更优的蒎烯合酶突变体,为蒎烯在酿酒酵母中的高效合成提供借鉴。该研究在甲羟戊酸(mevalonate,MVA)通路强化的酿酒酵母中,表达了蒎烯合酶Pt30的Q456位点的饱和突变体,对工程菌株进行两相摇瓶发酵,检测最终蒎烯的产量。结果显示,在构建的蒎烯合酶Pt30的Q456位点饱和突变体中,Pt30(Q456K)和Pt30(Q456I)突变体将蒎烯从不可测定提高到了0.017、0.041 mg/L。蒎烯合酶Pt30的Q456K和Q456I突变体,相对于Pt30野生型酶提高了蒎烯在酿酒酵母中的产量,这也证明了Q456这一位点对蒎烯合酶Pt30的重要性,也为其他蒎烯合酶的改造提供了参考。
关键词
蒎
烯
酿酒酵母
蒎烯合酶
饱和突变
两相发酵
Keywords
pinene
Saccharomyces cerevisiae
pinene synthase
saturation mutation
two-phase fermentation
分类号
O629.61 [理学—有机化学]
TQ920.1 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
马尾松β-蒎烯合酶基因克隆以及对松材线虫侵染的响应
刘彬
刘青华
周志春
罗柠
解懿妮
陈献志
《林业科学研究》
CSCD
北大核心
2020
9
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
关键酶饱和突变提高酿酒酵母蒎烯产量
任全路
陆信曜
宗红
诸葛斌
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2021
1
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职称材料
已选择
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