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人睫状肌细胞中核转录因子抑制因子-α与基质金属蛋白酶-2作用机制研究
被引量：
3
1
作者
张弛
赵刚平
+4 位作者
陈俊杰
许扬扬
余建洪
虞林丽
胡丹
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2015年第5期424-428,共5页
目的探讨在人睫状肌(human ciliary muscle,HCM)细胞中,基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的表达和核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号转导通路之间的关系。方法合成针对人核转录因子抑制因子-α(inh...
目的探讨在人睫状肌(human ciliary muscle,HCM)细胞中,基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的表达和核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号转导通路之间的关系。方法合成针对人核转录因子抑制因子-α(inhibitorαof nuclear factor-kappa B,IκBα)siRNA片段,并将其转染入HCM中,分别于转染后24 h、48 h、72 h利用RT-PCR和Western blot法检测IκBα、NF-κB p65和MMP-2 mRNA和蛋白水平的表达情况。Zymography技术检测酶原形式的MMP-2(pro-MMP-2)和活性形式的MMP-2(active-MMP-2)的表达变化。结果转染IκBαsiRNA进入HCM后24 h、48 h、72 h,IκBαmRNA水平和蛋白水平均下降(均为P<0.05)。IκBαsiRNA转染入HCM 24 h、48 h、72 h,实验组NF-κB p65总mRNA水平和蛋白水平变化均无显著差异(均为P>0.05),但细胞核内的NF-κB p65蛋白表达却大幅度升高(均为P<0.05)。MMP-2 mRNA水平和蛋白水平的表达在IκBαsiRNA转染入HCM细胞后各时间点均有上升,转染后72 h表达最高(均为P<0.05)。Pro-MMP-2和active-MMP-2的表达也在转染后各时间点不同程度增加,峰值也是出现在转染后72 h,分别为170.2%±10.4%和151.8%±8.4%(均为P<0.05)。各时间点pro-MMP-2、active-MMP-2均较空白对照组表达增加(均为P<0.05)。结论在HCM细胞中通过抑制IκBα表达,引起NF-κB p65的激活,转位入HCM细胞核,促进了MMP-2分泌和活化,从而降解HCM细胞外基质,增加葡萄膜巩膜房水外流。
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关键词
人睫状肌细胞
葡萄膜巩膜通道
RNA干扰
核转录因子-ΚB
基质金属蛋白酶-2
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职称材料
前列腺素衍生物类药物降眼压的作用机制
被引量：
3
2
作者
宋伟
余其智
杜诚
《国际眼科杂志》
CAS
2017年第5期884-887,共4页
病理性眼压升高是青光眼主要的危险因素,目前针对青光眼的手术及药物治疗都旨在降低眼压。前列腺素衍生物因具有降眼压作用而成为治疗青光眼的首选药物。现有的研究表明,前列腺素衍生物类药物主要是通过增加房水从葡萄膜巩膜通道外流来...
病理性眼压升高是青光眼主要的危险因素,目前针对青光眼的手术及药物治疗都旨在降低眼压。前列腺素衍生物因具有降眼压作用而成为治疗青光眼的首选药物。现有的研究表明,前列腺素衍生物类药物主要是通过增加房水从葡萄膜巩膜通道外流来降低眼压的,最新的研究发现贝美前列腺素还可以通过增加房水从小梁网通道外流来降低眼压。目前关于前列腺素衍生物类药物降眼压作用机制仍然在不断地了解、观察、研究中。
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关键词
青光眼
前列腺素衍生物
小梁网-Schlemn式管
通道
葡萄膜巩膜通道
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职称材料
大鼠IκBα基因siRNA序列的体外筛选及体内验证
被引量：
1
3
作者
曾睿
蓝育青
+2 位作者
宫海军
张弛
李金苗
《国际眼科杂志》
CAS
2014年第6期986-991,共6页
目的:寻找可在体内有效抑制大鼠睫状肌核转录因子κB抑制物α(IκBα)基因表达的小干扰RNA(siRNA)序列。方法:设计合成3对针对大鼠IκBα基因的siRNA,体外转染表达IκBα基因的大鼠A7r5细胞,通过流式细胞仪检测转染效率,并经Real Time-...
目的:寻找可在体内有效抑制大鼠睫状肌核转录因子κB抑制物α(IκBα)基因表达的小干扰RNA(siRNA)序列。方法:设计合成3对针对大鼠IκBα基因的siRNA,体外转染表达IκBα基因的大鼠A7r5细胞,通过流式细胞仪检测转染效率,并经Real Time-PCR及western blot在mRNA及蛋白水平筛选对IκBα表达抑制率最高的序列。通过前房注射选出的siRNA进行大鼠体内转染,荧光显微镜下观察其在大鼠睫状肌的分布并利用Real Time-PCR及免疫荧光验证其对该部位IκBα基因沉默的有效性。结果:体外筛选证明针对大鼠IκBα基因CTACGATG ACTGTGTGTTT靶序列的siRNA对IκBα的表达抑制效果最明显,大鼠前房注射该siRNA可到达睫状肌,并能有效抑制该部位IκBα基因的表达,IκBαmRNA水平在转染后24h降低最明显,抑制率达59.0%,而蛋白水平则在72h达最低,抑制率为52.3%(P<0.01)。结论:针对大鼠IκBα基因CTACGATGACTGTGTGTTT靶序列的siRNA是对大鼠睫状肌IκBα基因进行体内RNA干扰的有效序列。
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关键词
IΚBΑ
小干扰RNA
大鼠睫状肌
青光眼
葡萄膜
巩膜
房水流出
通道
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职称材料
题名
人睫状肌细胞中核转录因子抑制因子-α与基质金属蛋白酶-2作用机制研究
被引量：
3
1
作者
张弛
赵刚平
陈俊杰
许扬扬
余建洪
虞林丽
胡丹
机构
佛山市第一人民医院眼科
增城市人民医院眼科
佛山市第一人民医院
出处
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2015年第5期424-428,共5页
基金
广东省医学科研基金资助(编号:B2014385)~~
文摘
目的探讨在人睫状肌(human ciliary muscle,HCM)细胞中,基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的表达和核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号转导通路之间的关系。方法合成针对人核转录因子抑制因子-α(inhibitorαof nuclear factor-kappa B,IκBα)siRNA片段,并将其转染入HCM中,分别于转染后24 h、48 h、72 h利用RT-PCR和Western blot法检测IκBα、NF-κB p65和MMP-2 mRNA和蛋白水平的表达情况。Zymography技术检测酶原形式的MMP-2(pro-MMP-2)和活性形式的MMP-2(active-MMP-2)的表达变化。结果转染IκBαsiRNA进入HCM后24 h、48 h、72 h,IκBαmRNA水平和蛋白水平均下降(均为P<0.05)。IκBαsiRNA转染入HCM 24 h、48 h、72 h,实验组NF-κB p65总mRNA水平和蛋白水平变化均无显著差异(均为P>0.05),但细胞核内的NF-κB p65蛋白表达却大幅度升高(均为P<0.05)。MMP-2 mRNA水平和蛋白水平的表达在IκBαsiRNA转染入HCM细胞后各时间点均有上升,转染后72 h表达最高(均为P<0.05)。Pro-MMP-2和active-MMP-2的表达也在转染后各时间点不同程度增加,峰值也是出现在转染后72 h,分别为170.2%±10.4%和151.8%±8.4%(均为P<0.05)。各时间点pro-MMP-2、active-MMP-2均较空白对照组表达增加(均为P<0.05)。结论在HCM细胞中通过抑制IκBα表达,引起NF-κB p65的激活,转位入HCM细胞核,促进了MMP-2分泌和活化,从而降解HCM细胞外基质,增加葡萄膜巩膜房水外流。
关键词
人睫状肌细胞
葡萄膜巩膜通道
RNA干扰
核转录因子-ΚB
基质金属蛋白酶-2
Keywords
human ciliary muscle cells
uveoscleral outflow RNA interference
nuclear factor-kappa B
matrix metalloproteinase-2
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
前列腺素衍生物类药物降眼压的作用机制
被引量：
3
2
作者
宋伟
余其智
杜诚
机构
浙江中医药大学附属嘉兴中医院眼科
出处
《国际眼科杂志》
CAS
2017年第5期884-887,共4页
文摘
病理性眼压升高是青光眼主要的危险因素,目前针对青光眼的手术及药物治疗都旨在降低眼压。前列腺素衍生物因具有降眼压作用而成为治疗青光眼的首选药物。现有的研究表明,前列腺素衍生物类药物主要是通过增加房水从葡萄膜巩膜通道外流来降低眼压的,最新的研究发现贝美前列腺素还可以通过增加房水从小梁网通道外流来降低眼压。目前关于前列腺素衍生物类药物降眼压作用机制仍然在不断地了解、观察、研究中。
关键词
青光眼
前列腺素衍生物
小梁网-Schlemn式管
通道
葡萄膜巩膜通道
Keywords
glaucoma
prostaglandin analogue
trabecular meshwork-Schlemm＇s canal pathway
uveoscleral pathway
分类号
R775 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
大鼠IκBα基因siRNA序列的体外筛选及体内验证
被引量：
1
3
作者
曾睿
蓝育青
宫海军
张弛
李金苗
机构
中山大学孙逸仙纪念医院眼科
佛山市第一人民医院眼科
出处
《国际眼科杂志》
CAS
2014年第6期986-991,共6页
基金
广东省科技计划项目(No.2011B031800158)
广州市科技计划项目(No.201300000149)~~
文摘
目的:寻找可在体内有效抑制大鼠睫状肌核转录因子κB抑制物α(IκBα)基因表达的小干扰RNA(siRNA)序列。方法:设计合成3对针对大鼠IκBα基因的siRNA,体外转染表达IκBα基因的大鼠A7r5细胞,通过流式细胞仪检测转染效率,并经Real Time-PCR及western blot在mRNA及蛋白水平筛选对IκBα表达抑制率最高的序列。通过前房注射选出的siRNA进行大鼠体内转染,荧光显微镜下观察其在大鼠睫状肌的分布并利用Real Time-PCR及免疫荧光验证其对该部位IκBα基因沉默的有效性。结果:体外筛选证明针对大鼠IκBα基因CTACGATG ACTGTGTGTTT靶序列的siRNA对IκBα的表达抑制效果最明显,大鼠前房注射该siRNA可到达睫状肌,并能有效抑制该部位IκBα基因的表达,IκBαmRNA水平在转染后24h降低最明显,抑制率达59.0%,而蛋白水平则在72h达最低,抑制率为52.3%(P<0.01)。结论:针对大鼠IκBα基因CTACGATGACTGTGTGTTT靶序列的siRNA是对大鼠睫状肌IκBα基因进行体内RNA干扰的有效序列。
关键词
IΚBΑ
小干扰RNA
大鼠睫状肌
青光眼
葡萄膜
巩膜
房水流出
通道
Keywords
IκBα
small interfering RNA
rat ciliary muscles
glaucoma
uveoscleral outflow route
分类号
R775 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人睫状肌细胞中核转录因子抑制因子-α与基质金属蛋白酶-2作用机制研究
张弛
赵刚平
陈俊杰
许扬扬
余建洪
虞林丽
胡丹
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2015
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
前列腺素衍生物类药物降眼压的作用机制
宋伟
余其智
杜诚
《国际眼科杂志》
CAS
2017
3
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下载PDF
职称材料
3
大鼠IκBα基因siRNA序列的体外筛选及体内验证
曾睿
蓝育青
宫海军
张弛
李金苗
《国际眼科杂志》
CAS
2014
1
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