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熄风解痉汤调控内质网应激在蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的应用
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作者 向兴刚 周益凡 +4 位作者 依马木·依达依吐拉 赵永 买买江·阿不力孜 林琳 马震 《世界中医药》 北大核心 2025年第11期1889-1897,1905,共10页
目的:探讨熄风解痉汤(XFJJT)对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠早期脑损伤(EBI)中内质网应激(ER应激)的调控作用。方法:将96只无特定病原体(SPF)级SD大鼠随机分为对照组、假手术组(Sham组)、SAH组、SAH+XFJJT组,每组24只。SAH+XFJJT组在造模成... 目的:探讨熄风解痉汤(XFJJT)对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠早期脑损伤(EBI)中内质网应激(ER应激)的调控作用。方法:将96只无特定病原体(SPF)级SD大鼠随机分为对照组、假手术组(Sham组)、SAH组、SAH+XFJJT组,每组24只。SAH+XFJJT组在造模成功后3 h开始给药,每日早、晚灌胃XFJJT 1.5 mL,持续72 h。建模后6、12、24、48、72 h记录Garcia评分;建模后3、6、12、24、48、72 h处死大鼠,苏木精-伊红(HE)染色观察海马神经细胞形态;TUNEL检测神经元凋亡;蛋白免疫印迹检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CAAT/增强子结合同源蛋白(CHOP)、半胱氨酸酶12(Caspase-12)表达,以及脑含水量和血脑屏障完整性。结果:SAH组6、12、24、48、72 h神经评分低于对照组和Sham组,SAH+XFJJT组高于SAH组(P<0.05);对照组和Sham组各时点GRP78、CHOP、Caspase-12表达低于SAH组(P<0.05),SAH+XFJJT组6、12、24、48、72 h表达低于SAH组(P<0.05);SAH组脑组织伊文思蓝(EB)含量高于对照组和Sham组,SAH+XFJJT组6、48、72 h低于SAH组(P<0.05);SAH组脑组织含水量高于对照组和Sham组,SAH+XFJJT组降低(P<0.05);SAH组6 h TUNEL阳性细胞增多,24 h达高峰,72 h减少,SAH+XFJJT组24、48、72 h凋亡率低于SAH组(P<0.05)。结论:SAH后EBI中存在ER应激反应,XFJJT可调控GRP78、CHOP、Caspase-12表达,改善神经评分,减轻脑含水量,并对血脑屏障通透性产生影响。 展开更多
关键词 熄风解痉汤 蛛网膜下腔出血 内质网应激 早期脑损伤 海马葡萄糖调节蛋白78 CAAT/增强子结合同源蛋白 半胱氨酸酶12 血脑屏障
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内质网应激通路相关分子GRP78及CHOP在糖尿病脑病小鼠海马表达的变化 被引量:28
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作者 闫颖 赵咏梅 +2 位作者 赵志炜 王玉兰 李森 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第1期90-94,共5页
目的本研究通过观察内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ER Stress)通路相关分子葡萄糖调节蛋白78(glucoseregulated protein78,GRP78)及CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)... 目的本研究通过观察内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ER Stress)通路相关分子葡萄糖调节蛋白78(glucoseregulated protein78,GRP78)及CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)在糖尿病脑病小鼠海马CA1区表达的变化,探讨ER Stress在糖尿病脑病发生发展中的作用。方法 60只雄性昆明小鼠随机分为正常组(n=25)和糖尿病(diabetes mellitus,DM)组(n=35)。小鼠禁食12h后,按200mg/kg腹腔注射链脲佐菌素(streptozocin,STZ),3d后尾部非禁食血糖>15mmol/L者为DM模型复制成功。分别在STZ注射后1、4、8周应用免疫组织化学染色方法观察正常组与DM组小鼠海马CA1区GRP78及CHOP阳性细胞形态和数量的变化,并应用图像分析软件计数GRP78及CHOP阳性细胞。结果 ①GRP78免疫组织化学染色结果显示,注射STZ后1、4、8周DM组小鼠海马CA1区GRP78阳性细胞形态和数量与正常组相似。②CHOP免疫组织化学染色结果显示,注射STZ后1、4、8周正常组小鼠海马CA1区CHOP阳性细胞数量较少,染色浅;DM组小鼠海马CA1区CHOP阳性细胞数量较多,染色深。③注射STZ后1、4、8周,DM组小鼠海马CA1区GRP78阳性细胞数量(12.00±3.60,10.50±3.11,13.75±3.01)与正常组(10.33±2.34,8.88±1.89,7.00±3.20)相比差异无统计学意义(P=0.29,P=0.23,P=0.06);注射STZ后1、4、8周,DM组小鼠海马CA1区CHOP阳性细胞数量(45.12±10.27,32.88±6.58,20.19±3.54)比正常组(19.19±6.80,15.44±5.35,13.94±5.00)明显增加,经统计学分析差异均有统计学意义(P分别为0.000,0.000和0.009)。结论 ER Stress相关分子CHOP在DM小鼠海马CA1区表达比正常小鼠增加,说明糖尿病脑病小鼠海马组织内发生了ER Stress。ER Stress可能在糖尿病脑病神经元变性中发挥重要作用。 展开更多
关键词 内质网应激 糖尿病脑病 葡萄糖调节蛋白78 ccaat/增强子结合蛋白同源蛋白 海马
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褪黑素对大鼠移植肝组织GRP-78及CHOP表达的影响 被引量:3
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作者 李萌 潘崎 +1 位作者 程颖 刘永锋 《器官移植》 CAS CSCD 2015年第4期262-267,共6页
目的通过检测褪黑素(MEL)对肝移植大鼠肝脏内质网应激(ERS)通路相关分子葡萄糖调节蛋白-78(GRP-78)及CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达的影响,探讨MEL对移植肝的作用。方法采用"磁环法"制作大鼠原位肝移植模型,雄性SD... 目的通过检测褪黑素(MEL)对肝移植大鼠肝脏内质网应激(ERS)通路相关分子葡萄糖调节蛋白-78(GRP-78)及CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达的影响,探讨MEL对移植肝的作用。方法采用"磁环法"制作大鼠原位肝移植模型,雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(Sham组)、原位肝移植组(OLT组)、原位肝移植+褪黑素处理组(OLT+MEL组),每组各8只。术后24 h,获取血清样本及肝脏标本。检测血清丙氨酸转移酶(ALT)及天冬氨酸转移酶(AST)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察各组肝组织病理学改变,采用聚合酶链反应和蛋白免疫印迹试验检测GRP-78及CHOP的信使核糖核酸(mRNA)和蛋白表达水平。结果与Sham组比较,OLT组血清ALT、AST显著升高(均为P<0.01),肝组织损伤严重,GRP-78及CHOP在mRNA和蛋白水平表达明显增加(均为P<0.01)。与OLT组比较,OLT+MEL组大鼠ALT、AST水平明显降低(均为P<0.05),肝组织损伤减轻,GRP-78及CHOP mRNA和蛋白表达水平明显降低(均为P<0.05)。结论褪黑素能降低移植肝ERS相关分子GRP-78及CHOP在mRNA和蛋白水平的表达,这可能是它减轻移植后肝脏损伤的机制之一。 展开更多
关键词 原位肝移植 大鼠 褪黑素 内质网应激 葡萄糖调节蛋白-78 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白
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西维来司钠对COPD大鼠GRP78/PERK/CHOP信号通路及气道高分泌的影响 被引量:7
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作者 王生成 李琪 +1 位作者 蔡潇阳 唐咏婕 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第2期16-23,共8页
目的探究西维来司钠对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠葡萄糖调节蛋白78/蛋白激酶R样内质网激酶/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(GRP78/PERK/CHOP)信号通路及气道高分泌的影响。方法采用香烟烟熏联合脂多糖(LPS)气管滴注制备COPD大鼠模型。成... 目的探究西维来司钠对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠葡萄糖调节蛋白78/蛋白激酶R样内质网激酶/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(GRP78/PERK/CHOP)信号通路及气道高分泌的影响。方法采用香烟烟熏联合脂多糖(LPS)气管滴注制备COPD大鼠模型。成模大鼠随机分为COPD组、西维来司钠干预组(低、中、高剂量),另取正常饲养大鼠为对照组(NC组),每组12只,西维来司钠低、中、高剂量组分别尾静脉注射西维来司钠2.5 mg/kg、5.0 mg/kg、10.0 mg/kg,NC组、COPD组注射等量生理盐水,每天2次,连续干预21 d。检测大鼠肺功能指标0.1 s用力呼气量(FEV0.1)、用力肺活量(FVC)水平,采用原位末端标记法(TUNEL)检测大鼠肺泡上皮细胞凋亡情况,显微镜观察大鼠肺组织病理学改变,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测大鼠肺组织黏蛋白5AC(MUC5AC)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)mRNA表达水平,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测大鼠肺组织MUC5AC、GRP78、PERK、CHOP蛋白表达量。结果NC组大鼠肺泡组织结构完整,无明显病理改变;COPD组大鼠肺组织支气管壁增高,肺泡组织壁变薄,纤毛脱落、倒伏明显,有大量炎性细胞浸润;西维来司钠各干预组大鼠肺组织病理改变均减轻。与NC组比较,COPD组大鼠FEV0.1、FVC水平显著降低,肺泡上皮细胞凋亡率、肺组织MUC5AC、GRP78、PERK、CHOP mRNA及蛋白水平显著增加(P<0.05);与COPD组比较,西维来司钠低、中、高剂量组大鼠FEV0.1、FVC水平依次升高,肺泡上皮细胞凋亡率、肺组织MUC5AC、GRP78、PERK、CHOP mRNA及蛋白水平依次降低(P<0.05)。结论西维来司钠可减轻COPD大鼠气道黏液高分泌,可能与抑制GRP78/PERK/CHOP信号通路激活,抑制COPD肺组织上皮细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 西维来司钠 慢性阻塞性肺疾病大鼠 黏膜蛋白5AC 葡萄糖调节蛋白78/蛋白激酶R样内质网激酶/ccaat增强子结合蛋白同源蛋白信号通路
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砷及MPST过表达对SH-SY5Y细胞GRP78/CHOP通路的影响 被引量:2
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作者 李成 楼迪栋 +3 位作者 齐晓岚 范海琼 朱卫 潘际刚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期131-135,共5页
目的探讨内质网应激是否参与亚砷酸钠(NaAsO2)神经毒性损伤,明确3-巯基丙酮酸硫转移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,MPST)过表达是否调节砷诱导的内质网应激。方法通过构建MPST基因慢病毒表达载体来获得稳定表达外源MPST基因... 目的探讨内质网应激是否参与亚砷酸钠(NaAsO2)神经毒性损伤,明确3-巯基丙酮酸硫转移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,MPST)过表达是否调节砷诱导的内质网应激。方法通过构建MPST基因慢病毒表达载体来获得稳定表达外源MPST基因的SH-SY5Y细胞株作为SH-MPST过表达组,另设空载体转染细胞为SH-PEB组,染砷组(NaAsO2组),内质网应激阻断剂TUDCA组,TUDCA预处理染砷组。Western blot法分别检测过表达MPST、染砷及TUDCA预处理后细胞内GRP78和CHOP蛋白表达的变化。结果单纯MPST过表达不影响SH-SY5Y细胞内GRP78、CHOP蛋白的表达水平;经NaAsO2处理后,SH-PEB细胞内GRP78、CHOP蛋白明显上调(P<0.01),而被内质网应激阻断剂TUDCA所拮抗;MPST过表达则抑制砷对GRP78、CHOP蛋白的上调(P<0.01);然而,TUDCA预处理则明显逆转MPST过表达对GRP78、CHOP蛋白的影响(P<0.01)。结论GRP78/CHOP内质网应激通路参与了砷诱导的神经毒性损伤;MPST过表达可降低砷诱导的内质网应激水平。 展开更多
关键词 亚砷酸钠 内质网应激 3-巯基丙酮酸硫转移酶 硫化氢 葡萄糖调节蛋白78 环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白 SH-SY5Y细胞
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滋补脾阴方药对脾阴虚痴呆大鼠脑组织内质网应激影响的研究 被引量:12
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作者 战丽彬 林海燕 +2 位作者 宫晓洋 刘莉 梁丽娜 《世界科学技术-中医药现代化》 2011年第6期993-998,共6页
目的:观察滋补脾阴方药(ZBPYR)对脾阴虚痴呆大鼠不同脑区内质网应激的影响。方法:通过证病结合的方法建立脾阴虚痴呆大鼠模型,以免疫组化方法检测各组大鼠海马(CA1、CA3、DG区)、大脑皮质中内质网应激相关分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)... 目的:观察滋补脾阴方药(ZBPYR)对脾阴虚痴呆大鼠不同脑区内质网应激的影响。方法:通过证病结合的方法建立脾阴虚痴呆大鼠模型,以免疫组化方法检测各组大鼠海马(CA1、CA3、DG区)、大脑皮质中内质网应激相关分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、凋亡促进因子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的表达变化。结果:与脾阴虚痴呆组比较,ZBPYR治疗组大鼠海马CA1区(0.2913±0.0025)、CA3区(0.2835±0.0012)、DG区(0.2855±0.0002)、大脑皮质(0.2929±0.0028)GRP78蛋白表达水平明显上调(P<0.05);海马CA1区(0.2476±0.0012)、CA3区(0.2499±0.0013)、DG区(0.2519±0.0023)、大脑皮质(0.2488±0.0007)CHOP蛋白表达水平明显下调(P<0.05)。结论:滋补脾阴方药改善脾阴虚痴呆大鼠的学习记忆能力,可能是通过增强内质网应激介导的未折叠蛋白反应的存活途径,抑制凋亡途径而实现。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 脾阴虚痴呆 滋补脾阴方药 内质网应激 葡萄糖调节蛋白78ccaat/增强子结合蛋白同源蛋白
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二至丸对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的防护作用及机制 被引量:11
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作者 段冷昕 高杨 +3 位作者 胡举 赵亚飞 吴欣芳 王建刚 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期462-468,共7页
目的研究二至丸对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的预防作用及潜在机制。方法雄性昆明种小鼠每天1次ig给予二至丸1.4,2.8和5.6 g·kg-1,连续14 d,末次给药8 h后,模型组和二至丸组小鼠ip给予10%CCl4溶液10 mL·kg-1,24 h后处死... 目的研究二至丸对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的预防作用及潜在机制。方法雄性昆明种小鼠每天1次ig给予二至丸1.4,2.8和5.6 g·kg-1,连续14 d,末次给药8 h后,模型组和二至丸组小鼠ip给予10%CCl4溶液10 mL·kg-1,24 h后处死小鼠,计算肝和脾指数。采用生化法测定血清谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的活性及丙二醛(MDA)的含量;HE染色观察肝组织病理改变;TUNEL法观察肝细胞凋亡;免疫组化法和Western蛋白质印迹法检测内质网应激(ERS)标志性蛋白CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和葡糖调节蛋白78(GRP78)表达。结果与正常对照组相比,模型组小鼠血清中GPT和GOT活性及MDA含量显著升高(P<0.01),SOD和GPX活性显著下降(P<0.01);肝组织出现明显的炎症细胞浸润和坏死,肝指数明显增加(P<0.01),脾指数显著减小(P<0.01);CHOP和GRP78表达水平显著上调(P<0.01)。与模型组相比,二至丸各剂量组血清GPT和GOT的活性及MDA含量显著降低(P<0.05,P<0.01),SOD和GPX活性显著升高(P<0.05,P<0.01);HE染色结果显示,二至丸各剂量组均不同程度地减轻肝组织脂肪空泡和炎症细胞浸润;二至丸2.8和5.6 g·kg-1组小鼠肝指数显著减小,脾指数显著增加(P<0.05);TUNEL检测结果显示,二至丸各剂量组肝细胞凋亡率明显下降(P<0.05,P<0.01),并呈剂量依赖性(r=0.99,P<0.01);免疫组化及Western蛋白质印迹结果显示,二至丸1.4,2.8和5.6 g·kg-1组CHOP表达显著下降(P<0.01),并呈剂量依赖性(r=0.89,P<0.05),2.8和5.6 g·kg-1组GRP78表达显著下降(P<0.01)。结论二至丸对CCl4致小鼠急性肝损伤具有预防保护作用,其机制可能与抗氧化应激,抑制ERS,从而抑制肝细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 二至丸 四氯化碳 药物性肝损伤 急性 内质网应激 ccaat/增强子结合蛋白同源蛋白 葡糖调节蛋白78
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龙蛭汤对脑缺血再灌注损伤大鼠血管新生的促进作用 被引量:1
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作者 李南方 陈永斌 +3 位作者 刘启华 黄显雯 范俊逸 罗燕萍 《辽宁中医杂志》 CAS 2022年第9期195-198,227,共5页
目的探究龙蛭汤对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑血管新生的促进作用及其与内质网应激之间的关系。方法将72只大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、龙蛭汤组、丁苯酞组、4-苯基丁酸(4-PBA)组、4-PBA+龙蛭汤组,每组12只。除假手术组外,其余5组... 目的探究龙蛭汤对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑血管新生的促进作用及其与内质网应激之间的关系。方法将72只大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、龙蛭汤组、丁苯酞组、4-苯基丁酸(4-PBA)组、4-PBA+龙蛭汤组,每组12只。除假手术组外,其余5组均采用改良线栓法建立右侧脑缺血再灌注损伤大鼠模型。于术后第3天,对各组大鼠进行神经功能评分;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法(RT-PCR)比较各组大鼠葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和特异性蛋白C增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)mRNA的表达;通过免疫组织化学法计算各组大鼠脑微血管密度(MVD);采用免疫印迹法(Western Blot)比较各组大鼠GRP78和CHOP蛋白的表达。结果与假手术组相比,模型组可见明显的神经功能缺损评分和微血管密度计数升高,海马组织中GRP78和CHOP蛋白和mRNA的表达均明显升高(P<0.05);与模型组相比,其余4组的神经功能评分、海马组织中GRP78和CHOP蛋白和mRNA的表达量均有不同程度降低(P<0.05),且龙蛭汤组、丁苯酞组、4-PBA+龙蛭汤组微血管密度均比模型组高(P<0.05)。结论龙蛭汤可能通过下调内质网应激相关因子GRP78和CHOP的表达以抑制大鼠脑组织过度的内质网应激反应,进而促进血管新生。 展开更多
关键词 龙蛭汤 血管新生 脑缺血再灌注 内质网应激 葡萄糖调节蛋白78 特异性蛋白C增强子结合蛋白同源蛋白
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