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载脂蛋白A-Ⅰ对高糖环境下人视网膜血管内皮细胞生物行为及VEGF表达的抑制作用
被引量：
3
1
作者
谭澄烨
邵珺
+1 位作者
庄淼
姚勇
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第7期586-590,共5页
背景视网膜血管内皮细胞（RVECs）是视网膜微血管的主要成分，通过增生、迁移以及血管发生等生物行为在糖尿病视网膜病变（DR）的发生和发展中发挥关键作用。载脂蛋白A-Ⅰ（ApoA-Ⅰ）是高密度脂蛋白中主要的载脂蛋白，既往研究表明ApoA...
背景视网膜血管内皮细胞（RVECs）是视网膜微血管的主要成分，通过增生、迁移以及血管发生等生物行为在糖尿病视网膜病变（DR）的发生和发展中发挥关键作用。载脂蛋白A-Ⅰ（ApoA-Ⅰ）是高密度脂蛋白中主要的载脂蛋白，既往研究表明ApoA-Ⅰ在糖尿病患者视网膜组织内呈高表达，且在不同微环境中对RVECs发挥不同作用，但其在高糖环境下与RVECs生物学行为的关系仍不清楚。目的研究ApoA-Ⅰ对高糖环境下培养的人RVECs（hRVECs）生物行为及血管内皮生长因子（VEGF）表达的抑制作用。方法用含体积分数10%胎牛血清的DMEM体外培养hRVECs并传代，取3～6代细胞用于实验。将培养的细胞分为低糖组、低糖＋ApoA-Ⅰ组、高糖组和高糖＋ApoA-Ⅰ组，按照分组分别在DMEM中添加葡萄糖和ApoA-Ⅰ，低糖浓度为5 mmol/L，高糖浓度为25 mmol/L，ApoA-Ⅰ终质量浓度为30 μg/ml。采用细胞计数试剂盒-8、CCK-8法检测细胞增生能力（吸光度，A值）；采用细胞划痕法检测细胞的迁移率；采用管腔形成实验检测培养细胞的体外成管能力；分别采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测各组细胞中VEGF mRNA及其蛋白的相对表达量。结果高糖组细胞增生值（A值）和细胞迁移率明显高于低糖组，高糖＋ApoA-Ⅰ组细胞增生值和细胞迁移率明显低于高糖组，差异均有统计学意义（A值：P＝0.001、0.033；迁移率：P＝0.001、0.010）。低糖组、低糖＋ApoA-Ⅰ组、高糖组和高糖＋ApoA-Ⅰ组管腔数分别为（7.250±2.217）、（9.250±2.630）、（19.000±3.916）和（11.500±3.697）个，组间总体比较差异有统计学意义（F＝10.335，P＝0.001）。高糖组管腔数较低糖组显著增加，高糖＋ApoA-Ⅰ组较高糖组管腔数显著减少，差异均有统计学意义（P＝0.001、0.037）。低糖组、低糖＋ApoA-Ⅰ组、高糖组和高糖＋ApoA-Ⅰ组细胞中VEGF mRNA相对表达量分别为0.944±0.083、1.117±0.204、1.768±0.164和1.301±0.077，VEGF蛋白相对表达量分别为1.000±0.130、1.217±0.152、1.871±0.101和1.609±0.087，组间总体比较差异均有统计学意义（mRNA：F＝18.640，P＝0.001；蛋白：F＝10.335，P＝0.001），其中高糖组细胞中VEGF mRNA及其蛋白的相对表达量均明显高于低糖组和高糖＋ApoA-Ⅰ组，差异均有统计学意义（mRNA：P＝0.000、0.004；蛋白：P＝0.000、0.029）。结论ApoA-Ⅰ对高糖环境下hRVECs的增生、迁移及管腔形成具有抑制作用，可能与其下调细胞VEGF的表达有关。
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关键词
载脂蛋白A—Ⅰ
糖尿病视网膜病变
血管内皮细胞
人
细胞培养
葡萄糖/应用和剂量
血管内皮生长因子
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职称材料
题名
载脂蛋白A-Ⅰ对高糖环境下人视网膜血管内皮细胞生物行为及VEGF表达的抑制作用
被引量：
3
1
作者
谭澄烨
邵珺
庄淼
姚勇
机构
南京医科大学附属无锡人民医院眼科
出处
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第7期586-590,共5页
基金
国家自然科学基金项目（81400415）
江苏省卫生厅面上科研课题项目（H201449）
文摘
背景视网膜血管内皮细胞（RVECs）是视网膜微血管的主要成分，通过增生、迁移以及血管发生等生物行为在糖尿病视网膜病变（DR）的发生和发展中发挥关键作用。载脂蛋白A-Ⅰ（ApoA-Ⅰ）是高密度脂蛋白中主要的载脂蛋白，既往研究表明ApoA-Ⅰ在糖尿病患者视网膜组织内呈高表达，且在不同微环境中对RVECs发挥不同作用，但其在高糖环境下与RVECs生物学行为的关系仍不清楚。目的研究ApoA-Ⅰ对高糖环境下培养的人RVECs（hRVECs）生物行为及血管内皮生长因子（VEGF）表达的抑制作用。方法用含体积分数10%胎牛血清的DMEM体外培养hRVECs并传代，取3～6代细胞用于实验。将培养的细胞分为低糖组、低糖＋ApoA-Ⅰ组、高糖组和高糖＋ApoA-Ⅰ组，按照分组分别在DMEM中添加葡萄糖和ApoA-Ⅰ，低糖浓度为5 mmol/L，高糖浓度为25 mmol/L，ApoA-Ⅰ终质量浓度为30 μg/ml。采用细胞计数试剂盒-8、CCK-8法检测细胞增生能力（吸光度，A值）；采用细胞划痕法检测细胞的迁移率；采用管腔形成实验检测培养细胞的体外成管能力；分别采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测各组细胞中VEGF mRNA及其蛋白的相对表达量。结果高糖组细胞增生值（A值）和细胞迁移率明显高于低糖组，高糖＋ApoA-Ⅰ组细胞增生值和细胞迁移率明显低于高糖组，差异均有统计学意义（A值：P＝0.001、0.033；迁移率：P＝0.001、0.010）。低糖组、低糖＋ApoA-Ⅰ组、高糖组和高糖＋ApoA-Ⅰ组管腔数分别为（7.250±2.217）、（9.250±2.630）、（19.000±3.916）和（11.500±3.697）个，组间总体比较差异有统计学意义（F＝10.335，P＝0.001）。高糖组管腔数较低糖组显著增加，高糖＋ApoA-Ⅰ组较高糖组管腔数显著减少，差异均有统计学意义（P＝0.001、0.037）。低糖组、低糖＋ApoA-Ⅰ组、高糖组和高糖＋ApoA-Ⅰ组细胞中VEGF mRNA相对表达量分别为0.944±0.083、1.117±0.204、1.768±0.164和1.301±0.077，VEGF蛋白相对表达量分别为1.000±0.130、1.217±0.152、1.871±0.101和1.609±0.087，组间总体比较差异均有统计学意义（mRNA：F＝18.640，P＝0.001；蛋白：F＝10.335，P＝0.001），其中高糖组细胞中VEGF mRNA及其蛋白的相对表达量均明显高于低糖组和高糖＋ApoA-Ⅰ组，差异均有统计学意义（mRNA：P＝0.000、0.004；蛋白：P＝0.000、0.029）。结论ApoA-Ⅰ对高糖环境下hRVECs的增生、迁移及管腔形成具有抑制作用，可能与其下调细胞VEGF的表达有关。
关键词
载脂蛋白A—Ⅰ
糖尿病视网膜病变
血管内皮细胞
人
细胞培养
葡萄糖/应用和剂量
血管内皮生长因子
Keywords
Apolipoprotein A-Ⅰ
Diabetic retinopathy
Vascular endothelial cells
Humans
Cells,cultured
Glucose/administration ＆ dosage
Vascular endothelial growth factor
分类号
R774.1 [医药卫生—眼科]
R587.2 [医药卫生—内分泌]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
载脂蛋白A-Ⅰ对高糖环境下人视网膜血管内皮细胞生物行为及VEGF表达的抑制作用
谭澄烨
邵珺
庄淼
姚勇
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
3
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