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葡萄斑点病毒的血清学检测技术 被引量:4
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作者 刘永清 洪霓 王国平 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期289-291,共3页
应用A蛋白酶联免疫吸附法(ProteinASandwichEnzymeLinkImmunoSorbantAssay,PAS-ELISA)、三抗体夹心酶联免疫吸附法(TripleAntibodySandwich,TAS-ELISA)、酶联板直接捕获抗原的酶联免疫吸附法(PlateTrappedAntigen-Indirect-ELISA,PTA-I-... 应用A蛋白酶联免疫吸附法(ProteinASandwichEnzymeLinkImmunoSorbantAssay,PAS-ELISA)、三抗体夹心酶联免疫吸附法(TripleAntibodySandwich,TAS-ELISA)、酶联板直接捕获抗原的酶联免疫吸附法(PlateTrappedAntigen-Indirect-ELISA,PTA-I-ELISA)、直接组织印迹法(DirectTissueBlotImmunoassay,DTBIA)和圆点免疫印迹分析法(Dot-ImmunoBindingAssay,DIBA)等5种方法检测葡萄斑点病毒(GrapevineFleckVirus,GFkV)感染的葡萄枝条、叶柄和叶片。结果表明:TAS-ELISA法灵敏度最高,其粗汁液的最大稀释度为1:5120,DTBIA和DIBA法均为1:1280,PAS-ELISA法为1:640,PTA-I-ELISA法检测的灵敏度最低,为1:320。针对不同季节和葡萄不同的取样部位进行的血清学检测结果表明,以秋末冬初和葡萄中下部枝条为GFkV最佳的检测时机和器官。另外,用健康汁液吸附抗血清,可以明显降低DTBIA和DIBA的非特异性反应,便于得到直观、准确可靠的检测结果。 展开更多
关键词 葡萄斑点病毒 血清学检测
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葡萄斑点病毒研究进展
2
作者 刘永清 王国平 《中国南方果树》 北大核心 2004年第4期70-72,共3页
关键词 葡萄斑点 葡萄斑点病毒 病原学 检测 生物学特性
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葡萄斑点病毒的RT-PCR检测 被引量:7
3
作者 卓娜 王国平 +1 位作者 邓丛良 洪霓 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期717-720,共4页
由葡萄斑点病毒(Grapevine fleck virus,GFkV)引起的葡萄斑点病是世界上普遍发生的葡萄病毒病害。采用RT-PCR从表现明显斑点症状的葡萄样品维多利亚、无核白鸡心和胜宝叶片中检测到预期大小为179 bp的片段。对这些扩增片段进行克隆、序... 由葡萄斑点病毒(Grapevine fleck virus,GFkV)引起的葡萄斑点病是世界上普遍发生的葡萄病毒病害。采用RT-PCR从表现明显斑点症状的葡萄样品维多利亚、无核白鸡心和胜宝叶片中检测到预期大小为179 bp的片段。对这些扩增片段进行克隆、序列测定及比对分析,结果表明,来源于这3个样品的GFkV序列间相似性为97.2%~98.9%,与NCBI已登录GFkV序列AJ309022的相似性为96.6%~97.8%。在此基础上,采用纳米磁珠法从以上3个葡萄品种的休眠枝条韧皮部与休眠芽中提取病毒RNA,根据上述已测序列设计合成了TaqMan探针与引物,初步建立了GFkV的MNP Real time-RT-PCR检测体系。结果表明,无核白鸡心中GFkV含量最高,且该病毒在休眠芽中的含量比韧皮部约高出10倍,通过MNP Real time-RT-PCR最低可从100μg葡萄组织中检测到GFkV。 展开更多
关键词 葡萄斑点病毒 纳米磁珠 Realtime-RT-PCR
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葡萄斑点病毒研究进展
4
作者 刘永清 王国平 《中外葡萄与葡萄酒》 2004年第1期51-52,共2页
关键词 葡萄斑点病毒 病毒 分布 生化特性 病原学 检测 防治措施
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葡萄病毒病主要检测技术 被引量:5
5
作者 鲁晓燕 鲁晓燕 +1 位作者 牛建新 赵英 《中国南方果树》 北大核心 2005年第2期59-61,共3页
关键词 葡萄斑点病毒 病毒 检测技术 卷叶病毒 无性繁殖 水果 种苗检疫 葡萄 增加 栽培面积
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胶东半岛地区葡萄病毒病田间调查和血清检测 被引量:2
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作者 周莹 林秀敏 +3 位作者 严红 燕继晔 乔广行 李兴红 《中国果树》 北大核心 2011年第2期43-46,51,共5页
2008年8—9月对胶东半岛葡萄主产区15个葡萄园的病毒病发生及危害情况进行了田间调查,采集了4个酿酒葡萄品种共计44份葡萄样品,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法进行病毒血清学检测。从样品中分别检出葡萄斑点病毒(GFKV)、葡萄卷叶病毒1(GL... 2008年8—9月对胶东半岛葡萄主产区15个葡萄园的病毒病发生及危害情况进行了田间调查,采集了4个酿酒葡萄品种共计44份葡萄样品,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法进行病毒血清学检测。从样品中分别检出葡萄斑点病毒(GFKV)、葡萄卷叶病毒1(GLRaV-1)和葡萄卷叶病毒3(GLRaV-3),检出率分别为6.82%、2.27%和40.91%。蛇龙珠样品中3种病毒均被检出,总检出率达60.71%;赤霞珠样品中检出了葡萄卷叶病毒3和葡萄斑点病毒,总检出率为36.46%。蓬莱地区葡萄样品中3种病毒均被检出,检出率达55.56%,龙口地区病毒检出率也达到了52.17%。 展开更多
关键词 葡萄 葡萄病毒 葡萄斑点病毒 葡萄卷叶病毒1 葡萄卷叶病毒3 检测 胶东半岛
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阳光玫瑰葡萄皱叶、花叶、畸形叶症状嫁接传染研究 被引量:1
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作者 白先进 娄兵海 +3 位作者 王博 韩佳宇 白扬 陈萧 《南方园艺》 2021年第3期94-94,共1页
为明确阳光玫瑰上普遍出现的皱叶、花叶、畸形叶导致树势衰弱的症状是否具有传染性,并验证其与病毒侵染间的关系,试验采用两步法RT-PCR检测方法对田间表现症状的阳光玫瑰葡萄植株进行葡萄斑点病毒、葡萄病毒A、葡萄病毒B、葡萄卷叶伴随... 为明确阳光玫瑰上普遍出现的皱叶、花叶、畸形叶导致树势衰弱的症状是否具有传染性,并验证其与病毒侵染间的关系,试验采用两步法RT-PCR检测方法对田间表现症状的阳光玫瑰葡萄植株进行葡萄斑点病毒、葡萄病毒A、葡萄病毒B、葡萄卷叶伴随病毒1、葡萄卷叶伴随病毒3、葡萄扇叶病毒、沙地葡萄茎痘相关病毒以及葡萄灰比诺病毒检测,并将有症植株上的老熟枝段嫁接到脱毒健康阳光玫瑰葡萄植株上。 展开更多
关键词 阳光玫瑰葡萄 葡萄扇叶病毒 花叶 病毒侵染 田间表现 葡萄斑点病毒 卷叶 病毒检测
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