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葡萄卷叶病毒3 RT-PCR检测技术研究被引量：5: 1; 作者董雅凤张尊平 +2 位作者杨俊玲何峻张少瑜《中国果树》北大核心 2005年第6期9-12,共4页; 采用改进的二氧化硅吸附法和2组特异性引物进行葡萄卷叶病毒3(GLR aV-3)RT-PCR检测。结果表明,二氧化硅吸附法提取总RNA纯度好、浓度高、操作简便;随机引物合成cDNA能同时用于多种病毒及不同引物的PCR,可简化检测程序,降低检测费用;LC 1... 展开更多; 关键词葡萄卷叶病毒3 RT-PCR 检测 RT-PCR检测技术葡萄卷叶病毒特异性引物 ELISA方法二氧化硅总RNA CDNA; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于重组酶聚合酶扩增技术(RPA)的葡萄卷叶伴随病毒3号检测方法被引量：17: 2; 作者张娜乾义柯 +6 位作者魏霜胡白石陆平赛铁尔汗刘中勇张永江张祥林《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期302-308,共7页; 【目的】建立一种快速、灵敏的重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测葡萄卷叶伴随病毒3(Grapevine leafroll-associated virus 3,GLRaV-3)方法。【方法】根据GLRaV-3已测序和已报道的HSP70基因(Heat shock protein 70)保守序列,设计用于RPA检... 展开更多; 关键词葡萄卷叶伴随病毒3 RPA 检测方法; 在线阅读下载PDF 职称材料

葡萄卷叶伴随病毒-3复制酶基因克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：2: 3; 作者徐章逸王国平洪霓《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期252-255,共4页; 以感染有葡萄卷叶伴随病毒-3(Grapevineleafroll-associatedvirus-3,GLRaV-3)的葡萄韧皮部组织中提取到的dsRNA为模板,利用RT-PCR和重叠延伸PCR技术,对GLRaV-3的复制酶(RNA-dependentRNApolymerase,RdRp)基因进行克隆,获得了预期大小的... 展开更多; 关键词葡萄卷叶伴随病毒-3 复制酶反转录-聚合酶联反应原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

3种葡萄卷叶伴随病毒RT-PCR检测被引量：2: 4; 作者王仲刘命华 +2 位作者李捷李明骏程玉琴《中国果树》北大核心 2012年第4期43-46,I0002,共5页; 2010—2011年我们对河北省涿鹿、怀来、昌黎、宣化等县(区)以及北京市葡萄卷叶病的发生情况进行了调查,并对采集的葡萄植株样品用RT-PCR方法检测病毒种类。在检测的82个样品中,葡萄卷叶伴随病毒3号(GLRaV-3)的检出率为100.0%,葡萄卷叶... 展开更多; 关键词葡萄卷叶病葡萄卷叶伴随病毒1号葡萄卷叶伴随病毒2号葡萄卷叶伴随病毒3号 RT-PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

葡萄卷叶伴随病毒-3 RT-LAMP检测体系的建立与应用被引量：1: 5; 作者张强强王雯雯 +3 位作者闫思远李玲王若彤顾沛雯《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2166-2174,共9页; 为实现葡萄生产中对葡萄卷叶伴随病毒-3(GLRaV-3)的快速检测。本研究以GLRaV-3的CP基因序列(GenBank登录号:KC477128.1)为靶序列设计并合成了3对逆转录环介导恒温扩增技术(RTLAMP)引物,建立并优化GLRaV-3的RT-LAMP检测方法。结果表明,... 展开更多; 关键词葡萄卷叶伴随病毒3 RT-LAMP 引物筛选反应条件优化田间检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

葡萄GLRaV-3和GRSPaV病毒双重PCR方法建立及初步应用: 6; 作者李升李玲玉 +2 位作者乔光龙天文王嘉福《中国南方果树》北大核心 2019年第1期72-77,共6页; 针对我国西南地区葡萄园中卷叶相关病毒3(grapevine leafroll-associated virus 3,GLRaV-3)和茎痘相关病毒(grapevine rupestris stem pitting-associated virus,GRSPaV)发生普遍的情况,在单一PCR检测的基础上,分别从引物浓度和退火温... 展开更多; 关键词葡萄卷叶相关病毒3 葡萄茎痘相关病毒多重PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

胶东半岛地区葡萄病毒病田间调查和血清检测被引量：2: 7; 作者周莹林秀敏 +3 位作者严红燕继晔乔广行李兴红《中国果树》北大核心 2011年第2期43-46,51,共5页; 2008年8—9月对胶东半岛葡萄主产区15个葡萄园的病毒病发生及危害情况进行了田间调查,采集了4个酿酒葡萄品种共计44份葡萄样品,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法进行病毒血清学检测。从样品中分别检出葡萄斑点病毒(GFKV)、葡萄卷叶病毒1(GL... 展开更多; 关键词葡萄葡萄病毒病葡萄斑点病毒葡萄卷叶病毒1 葡萄卷叶病毒3 检测胶东半岛; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名葡萄卷叶病毒3 RT-PCR检测技术研究被引量：5: 1; 作者董雅凤张尊平杨俊玲何峻张少瑜; 机构中国农业科学院果树研究所; 出处《中国果树》北大核心 2005年第6期9-12,共4页; 基金辽宁省自然科学基金资助项目(20032139)。; 文摘采用改进的二氧化硅吸附法和2组特异性引物进行葡萄卷叶病毒3(GLR aV-3)RT-PCR检测。结果表明,二氧化硅吸附法提取总RNA纯度好、浓度高、操作简便;随机引物合成cDNA能同时用于多种病毒及不同引物的PCR,可简化检测程序,降低检测费用;LC 1/LC 2引物进行RT-PCR检测,病毒检出率高于PU/PD引物和EL ISA方法。建立了规范、灵敏、稳定、快速、经济的GLR aV-3RT-PCR检测技术体系。; 关键词葡萄卷叶病毒3 RT-PCR 检测 RT-PCR检测技术葡萄卷叶病毒特异性引物 ELISA方法二氧化硅总RNA CDNA; 分类号 S436.631 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于重组酶聚合酶扩增技术(RPA)的葡萄卷叶伴随病毒3号检测方法被引量：17: 2; 作者张娜乾义柯魏霜胡白石陆平赛铁尔汗刘中勇张永江张祥林; 机构伊犁师范学院伊犁出入境检验检疫局汕头出入境检验检疫局南京农业大学中国检验检疫科学研究院植物检疫研究所新疆出入境检验检疫局; 出处《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期302-308,共7页; 基金新疆维吾尔自治区科技支疆项目(2013911090)~~; 文摘【目的】建立一种快速、灵敏的重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测葡萄卷叶伴随病毒3(Grapevine leafroll-associated virus 3,GLRaV-3)方法。【方法】根据GLRaV-3已测序和已报道的HSP70基因(Heat shock protein 70)保守序列,设计用于RPA检测的特异性引物,建立GLRaV-3的RPA检测方法,并对其特异性和灵敏度进行验证。【结果】建立RPA检测方法能够从GLRaV-3带毒株中检测到约380 bp的特异性条带,仅需在37℃下恒温反应40 min,无需特殊的仪器设备,经特异性评价特异性好,且该方法与普通PCR检测灵敏度基本一致。【结论】建立的RPA检测方法特异性强、灵敏度高,无需特殊的仪器设备,适合GLRaV-3的快速检测方法。; 关键词葡萄卷叶伴随病毒3 RPA 检测方法; Keywords Grapevine leafroll-associated virus 3 RPA method of detection; 分类号 S41 [农业科学—植物保护] S182 [农业科学—农业基础科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名葡萄卷叶伴随病毒-3复制酶基因克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：2: 3; 作者徐章逸王国平洪霓; 机构华中农业大学植物科学技术学院; 出处《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期252-255,共4页; 基金科技部863课题资助项目(2001AA241142)。; 文摘以感染有葡萄卷叶伴随病毒-3(Grapevineleafroll-associatedvirus-3,GLRaV-3)的葡萄韧皮部组织中提取到的dsRNA为模板,利用RT-PCR和重叠延伸PCR技术,对GLRaV-3的复制酶(RNA-dependentRNApolymerase,RdRp)基因进行克隆,获得了预期大小的目标片段。将此片段克隆到载体pBluescriptSKⅡ,酶切鉴定后测序。测序结果表明:RdRpcDNA全长为1618bp。经BLAST分析推导其可能编码538个氨基酸,与报道的GLRaV-3美国分离物NY1RdRp核苷酸相似性为99.3%,氨基酸相似性为99.6%;推导的氨基酸序列与其同属的PMWaV-2、GLRaV-1和LChV-2的RdRp氨基酸序列相似性分别为53%,50%和38%,包含了GDD在内的8个保守基元序列。将该段RdRp连接到表达载体pET22b(+)上,获得的重组子pET-RdRp转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS后,用1mmol/L的IPTG进行诱导。SDS-PAGE分析表明,RdRp在大肠杆菌中被诱导表达,融合蛋白分子量约为61kDa。; 关键词葡萄卷叶伴随病毒-3 复制酶反转录-聚合酶联反应原核表达; Keywords Grapevine leafroll-associated virus-3 RdRp RT-PCR Prokaryotic expression; 分类号 S663.1 [农业科学—果树学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名3种葡萄卷叶伴随病毒RT-PCR检测被引量：2: 4; 作者王仲刘命华李捷李明骏程玉琴; 机构北京市优质农产品产销服务站中国农业大学农学与生物技术学院; 出处《中国果树》北大核心 2012年第4期43-46,I0002,共5页; 基金现代农业产业技术体系建设专项(CARS-30-bc-1); 文摘 2010—2011年我们对河北省涿鹿、怀来、昌黎、宣化等县(区)以及北京市葡萄卷叶病的发生情况进行了调查,并对采集的葡萄植株样品用RT-PCR方法检测病毒种类。在检测的82个样品中,葡萄卷叶伴随病毒3号(GLRaV-3)的检出率为100.0%,葡萄卷叶伴随病毒1号(GLRaV-1)的检出率为17.1%,葡萄卷叶伴随病毒2号(GLRaV-2)的检出率为11.0%;病毒混合侵染的样品占总检测样品数的28.1%,其中葡萄卷叶伴随病毒1号、3号混合侵染样品占总检测样品数的17.1%,葡萄卷叶伴随病毒2号、3号混合侵染的样品占总检测样品数的11.0%,且在这些被病毒混合侵染的样品中,有2个样品被葡萄卷叶伴随病毒1号、2号、3号三重侵染。; 关键词葡萄卷叶病葡萄卷叶伴随病毒1号葡萄卷叶伴随病毒2号葡萄卷叶伴随病毒3号 RT-PCR; 分类号 S436.631 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名葡萄卷叶伴随病毒-3 RT-LAMP检测体系的建立与应用被引量：1: 5; 作者张强强王雯雯闫思远李玲王若彤顾沛雯; 机构宁夏大学林业与草业学院宁夏大学农学院; 出处《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2166-2174,共9页; 基金国家重点研发专项子课题(2019YFD1002502) 宁夏回族自治区科技重大专项(2019BBF02013)。; 文摘为实现葡萄生产中对葡萄卷叶伴随病毒-3(GLRaV-3)的快速检测。本研究以GLRaV-3的CP基因序列(GenBank登录号:KC477128.1)为靶序列设计并合成了3对逆转录环介导恒温扩增技术(RTLAMP)引物,建立并优化GLRaV-3的RT-LAMP检测方法。结果表明,该方法能够实现在恒温64℃下反应1 h完成对GLRaV-3的检测,引物GLRaV3-LAMP-Ⅰ特异性高,不与GLRaV-1~2、葡萄扇叶病毒、沙地葡萄茎痘相关病毒、葡萄病毒A、灰皮诺葡萄病毒和葡萄浆果内坏死病毒等7种葡萄常见病毒发生交叉反应;RNA最低检测限为10 pg·μL^(-1),灵敏度是逆转录PCR(RT-PCR)的10倍。田间样品检测验证结果表明,该方法与常规RT-PCR法检测一致率为100%。综上,本研究建立的GLRaV-3 RT-LAMP检测体系具有高特异性、高灵敏度和实用性强等特点,可应用于田间葡萄卷叶病样的检测。; 关键词葡萄卷叶伴随病毒3 RT-LAMP 引物筛选反应条件优化田间检测; Keywords grapevine leafroll-associated virus-3 RT-LAMP primer screening optimization of reaction conditions field testing; 分类号 S436.631 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名葡萄GLRaV-3和GRSPaV病毒双重PCR方法建立及初步应用: 6; 作者李升李玲玉乔光龙天文王嘉福; 机构贵州大学农业生物工程研究院贵州大学生命科学学院铜仁学院; 出处《中国南方果树》北大核心 2019年第1期72-77,共6页; 基金贵州省农业攻关项目(黔科合农NY字(2014)3057号) 贵州2015年度千层次创新型人才项目贵州省2015年度"三区"科技人才项目资助; 文摘针对我国西南地区葡萄园中卷叶相关病毒3(grapevine leafroll-associated virus 3,GLRaV-3)和茎痘相关病毒(grapevine rupestris stem pitting-associated virus,GRSPaV)发生普遍的情况,在单一PCR检测的基础上,分别从引物浓度和退火温度对双重PCR体系进行优化,建立了同时检测GLRaV-3和GRSPaV的双重PCR技术。建立的双重PCR反应体系最适退火温度为56.1℃,20μL PCR反应体系中10μmol/L浓度的混合引物最适用量为0.1μL;该方法能够检测出GLRaV-3和GRSPaV的cDNA最低浓度分别为0.99pg/μL和99.43ng/μL,且特异性良好。应用该双重PCR方法检测了来自贵州凯里和遵义地区"南玉""温克""摩尔多瓦"葡萄品种疑似病株样品,GLRaV-3检出率为100%,部分样品检出GRSPaV。通过核苷酸序列克隆测序和对比发现,贵州检测出的GLRaV-3与美国分离株(AJ748523)相似度最高,为99.82%;贵州检测出的GRSPaV与巴西分离株(KT008370)相似度最高,为99.08%。; 关键词葡萄卷叶相关病毒3 葡萄茎痘相关病毒多重PCR; 分类号 S436.631 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名胶东半岛地区葡萄病毒病田间调查和血清检测被引量：2: 7; 作者周莹林秀敏严红燕继晔乔广行李兴红; 机构北京市农林科学院植物保护环境保护研究所; 出处《中国果树》北大核心 2011年第2期43-46,51,共5页; 基金国家葡萄产业技术体系项目(nycytx-30); 文摘 2008年8—9月对胶东半岛葡萄主产区15个葡萄园的病毒病发生及危害情况进行了田间调查,采集了4个酿酒葡萄品种共计44份葡萄样品,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法进行病毒血清学检测。从样品中分别检出葡萄斑点病毒(GFKV)、葡萄卷叶病毒1(GLRaV-1)和葡萄卷叶病毒3(GLRaV-3),检出率分别为6.82%、2.27%和40.91%。蛇龙珠样品中3种病毒均被检出,总检出率达60.71%;赤霞珠样品中检出了葡萄卷叶病毒3和葡萄斑点病毒,总检出率为36.46%。蓬莱地区葡萄样品中3种病毒均被检出,检出率达55.56%,龙口地区病毒检出率也达到了52.17%。; 关键词葡萄葡萄病毒病葡萄斑点病毒葡萄卷叶病毒1 葡萄卷叶病毒3 检测胶东半岛; 分类号 S436.631 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	葡萄卷叶病毒3 RT-PCR检测技术研究	董雅凤张尊平杨俊玲何峻张少瑜	《中国果树》北大核心	2005	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	基于重组酶聚合酶扩增技术(RPA)的葡萄卷叶伴随病毒3号检测方法	张娜乾义柯魏霜胡白石陆平赛铁尔汗刘中勇张永江张祥林	《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心	2016	17	在线阅读下载PDF 职称材料
3	葡萄卷叶伴随病毒-3复制酶基因克隆及其在大肠杆菌中的表达	徐章逸王国平洪霓	《果树学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	3种葡萄卷叶伴随病毒RT-PCR检测	王仲刘命华李捷李明骏程玉琴	《中国果树》北大核心	2012	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	葡萄卷叶伴随病毒-3 RT-LAMP检测体系的建立与应用	张强强王雯雯闫思远李玲王若彤顾沛雯	《核农学报》 CAS CSCD 北大核心	2023	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	葡萄GLRaV-3和GRSPaV病毒双重PCR方法建立及初步应用	李升李玲玉乔光龙天文王嘉福	《中国南方果树》北大核心	2019	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	胶东半岛地区葡萄病毒病田间调查和血清检测	周莹林秀敏严红燕继晔乔广行李兴红	《中国果树》北大核心	2011	2	在线阅读下载PDF 职称材料