期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到62篇文章
< 1 2 … 4 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
葡萄卷叶病毒Ⅲ RT-PCR检测技术研究 被引量：11
1
作者 刘三军 郭卫东 +3 位作者 张秋叶 何水涛 周厚成 张亚冰 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期15-18,共4页
利用ＲＴ－ＰＣＲ技术,对葡萄卷叶病毒株系Ⅲ进行了检测。采用的技术流程为:通过提取葡萄叶片或韧皮部总ＲＮＡ,获得病毒的ＲＮＡ,反转录合成ｃＤＮＡ,经ＰＣＲ扩增,获得病毒ｃＤＮＡ的特征片段,并进行了序列分析。对提取的总ＲＮＡ进... 利用ＲＴ－ＰＣＲ技术,对葡萄卷叶病毒株系Ⅲ进行了检测。采用的技术流程为:通过提取葡萄叶片或韧皮部总ＲＮＡ,获得病毒的ＲＮＡ,反转录合成ｃＤＮＡ,经ＰＣＲ扩增,获得病毒ｃＤＮＡ的特征片段,并进行了序列分析。对提取的总ＲＮＡ进行了完整性和纯度检测,确定了良好的ＲＮＡ获得方法。结果表明,通过ＲＴ－ＰＣＲ扩增的片段序列与病毒源序列的同源性高达９９．３%,说明采用本研究确定的方法检测葡萄卷叶病毒株系Ⅲ结果可靠。 展开更多
关键词 葡萄 卷叶病毒ⅲ RT-PCR 检测 克隆 序列分析
在线阅读 下载PDF
DAS-ELISA、RT-PCR和IC-RT-PCR检测葡萄卷叶病毒Ⅲ的比较研究 被引量：16
2
作者 陈建军 2刘崇怀 +2 位作者 古勤生 潘兴 曹孜义 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期173-177,共5页
在生长季节分3次对部分葡萄品种枝条上部、中部和下部叶片及韧皮部,进行双抗体夹心法(DAS-ELISA)、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)3种方法检测卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)的比较。结果表明:DAS-ELISA... 在生长季节分3次对部分葡萄品种枝条上部、中部和下部叶片及韧皮部,进行双抗体夹心法(DAS-ELISA)、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)3种方法检测卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)的比较。结果表明:DAS-ELISA的检出率明显低于RT-PCR和IC-RT-PCR方法。RT-PCR可以检测出RNA提取液为1:10-4的GLRaV-3病毒,但它受到了提取RNA难以及其它物质(如蛋白质、DNA等)干扰的影响,检测难度增加。从检测的灵敏度来看,RT-PCR和IC-RT-PCR比DAS-ELISA灵敏;并且,IC-RT-PCR比其它两种方法较快,整个过程仅需8h。 展开更多
关键词 DAS-ELISA RT-PCR IC-RT-PCR 葡萄 卷叶病毒ⅲ 比较研究 检测 检出率
在线阅读 下载PDF
IC-RT-PCR检测葡萄卷叶病毒Ⅲ的研究 被引量：3
3
作者 陈建军 曹香林 +2 位作者 古勤生 张亚冰 刘崇怀 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2006年第8期109-112,共4页
结合ELISA和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的特点,引入了另外一种方法,即免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)对葡萄卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)进行了检测。从免疫捕捉病毒、释放RNA到反转录成cDNA,最后扩增出了约300bp的预期目的片段。... 结合ELISA和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的特点,引入了另外一种方法,即免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)对葡萄卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)进行了检测。从免疫捕捉病毒、释放RNA到反转录成cDNA,最后扩增出了约300bp的预期目的片段。为了进一步明确PCR扩增的特异性,将PCR产物连接到pGEM-T载体上,转化大肠杆菌E.coliJM109菌株,通过蓝白斑筛选,获得重组质粒,提取质粒DNA,经酶切对重组质粒进行鉴定,结果得到了含有目的片段的重组质粒。由此证明,IC-RT-PCR检测GLRaV-3结果准确可靠。最重要的是它弥补了ELISA易出现假阴性、假阳性以及RT-PCR提取RNA难等的缺点,不失为病毒检测的新型方法。 展开更多
关键词 葡萄 卷叶病毒ⅲ 检测 IC-RT-PCR
在线阅读 下载PDF
三种ELISA方法检测葡萄卷叶病毒(GLRaV)和扇叶病毒(GFLV)的比较 被引量：4
4
作者 顾沛雯 龚玉梅 《中外葡萄与葡萄酒》 2002年第3期14-16,19,共4页
检测是认识一种病害最基本的前提,通过对三种ELISA检测GLRaV和GFLV的比较认为,双抗夹心-ELISA(DAS-ELISA)、间接-ELISA(PTA-ELISA)和A蛋白夹心-ELISA(PAS-ELISA) 都能检测GLRaV和GFLV。DAS-ELISA能缩短检测的时间,然而这项技术具有较高... 检测是认识一种病害最基本的前提,通过对三种ELISA检测GLRaV和GFLV的比较认为,双抗夹心-ELISA(DAS-ELISA)、间接-ELISA(PTA-ELISA)和A蛋白夹心-ELISA(PAS-ELISA) 都能检测GLRaV和GFLV。DAS-ELISA能缩短检测的时间,然而这项技术具有较高的株系特异性,在检测中可能产生假阴性反应,因此,必要时可用PTA-ELISA和PAS-ELISA对一些关键样品进行复检。 展开更多
关键词 ELISA 方法 检测 葡萄卷叶病毒 扇叶病毒
在线阅读 下载PDF
贺兰山东麓葡萄品种卷叶病毒(GLRaV-3)携带状况研究 被引量：1
5
作者 沙月霞 王国珍 +3 位作者 樊仲庆 古勤生 彭斌 张毅 《宁夏农林科技》 2009年第6期15-16,9,共3页
应用血清学的酶联免疫法(ELISA),对采自宁夏贺兰山东麓7个葡萄主产区内的8个主栽品种,共计50份样本进行了葡萄卷叶病毒病的检测和分析。在被检测的8个主栽品种中,3个品种的10份样本带有卷叶病毒(GLRaV-3),品种带毒率占所测品种的37.5%。
关键词 贺兰山东麓 葡萄品种 卷叶病毒病 携带状况
在线阅读 下载PDF
葡萄卷叶伴随病毒ⅢCP基因在E.coli中的表达 被引量：1
6
作者 赵冬兰 朱水芳 +2 位作者 张满良 张成良 黄文胜 《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第1期88-90,共3页
将葡萄卷叶伴随病毒 的 CP基因克隆到表达载体 p ET- 30 a中 ,转化大肠杆菌 BL2 1,筛选得到阳性克隆 GB- 1,用 IPTG诱导使其表达。SDS- PAGE电泳分析表明 ,该 CP基因在大肠杆菌 BL2 1中得到大量表达。用该病毒的 CP抗血清通过间接 EL
关键词 葡萄卷叶伴随病毒ⅲ CP基因 基因表达 基因克隆
在线阅读 下载PDF
基于重组酶聚合酶扩增技术(RPA)的葡萄卷叶伴随病毒3号检测方法 被引量：17
7
作者 张娜 乾义柯 +6 位作者 魏霜 胡白石 陆平 赛铁尔汗 刘中勇 张永江 张祥林 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期302-308,共7页
【目的】建立一种快速、灵敏的重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测葡萄卷叶伴随病毒3(Grapevine leafroll-associated virus 3,GLRaV-3)方法。【方法】根据GLRaV-3已测序和已报道的HSP70基因(Heat shock protein 70)保守序列,设计用于RPA检... 【目的】建立一种快速、灵敏的重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测葡萄卷叶伴随病毒3(Grapevine leafroll-associated virus 3,GLRaV-3)方法。【方法】根据GLRaV-3已测序和已报道的HSP70基因(Heat shock protein 70)保守序列,设计用于RPA检测的特异性引物,建立GLRaV-3的RPA检测方法,并对其特异性和灵敏度进行验证。【结果】建立RPA检测方法能够从GLRaV-3带毒株中检测到约380 bp的特异性条带,仅需在37℃下恒温反应40 min,无需特殊的仪器设备,经特异性评价特异性好,且该方法与普通PCR检测灵敏度基本一致。【结论】建立的RPA检测方法特异性强、灵敏度高,无需特殊的仪器设备,适合GLRaV-3的快速检测方法。 展开更多
关键词 葡萄卷叶伴随病毒3 RPA 检测方法
在线阅读 下载PDF
我国葡萄主栽区卷叶病相关病毒种类的检测分析 被引量：11
8
作者 裴光前 董雅凤 +2 位作者 张尊平 范旭东 任芳 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期463-468,I0001,共7页
田间调查200个葡萄品种,结果82个品种表现葡萄卷叶病症状,其中欧亚种群表现葡萄卷叶病症状的品种最多,发病率最高,发病症状最重;欧美杂种发病率和严重度均比欧亚种群低;未发现美洲种群的品种表现葡萄卷叶病症状。从58株表现卷叶病的葡... 田间调查200个葡萄品种,结果82个品种表现葡萄卷叶病症状,其中欧亚种群表现葡萄卷叶病症状的品种最多,发病率最高,发病症状最重;欧美杂种发病率和严重度均比欧亚种群低;未发现美洲种群的品种表现葡萄卷叶病症状。从58株表现卷叶病的葡萄上采集休眠枝条进行卷叶病毒ELISA和RT-PCR检测,葡萄卷叶病毒-1,2,3,4,5和7(GLRaV-1,2,3,4,5和7)等6种葡萄卷叶病毒的检出率分别为20.7%,17.2%,62.1%,3.4%,5.2%和15.5%。回收PCR产物进行克隆和序列分析,并将测序结果提交至GeneBank。以葡萄卷叶病毒HSP70基因序列构建系统进化树分析其进化关系,GLRaV-1、3和7,GLRaV-2、4和5分别聚为2大类,其中GLRaV-1和3,GLRaV-4和5在各自的聚类中关系更近。 展开更多
关键词 葡萄卷叶病毒 田间调查 ELISA RT-PCR 进化树
在线阅读 下载PDF
葡萄卷叶病毒RT-PCR检测技术研究 被引量：9
9
作者 牛建新 陈萍 +2 位作者 李西平 马兵钢 鲁晓燕 《西北农业学报》 CAS CSCD 2004年第1期28-32,共5页
以葡萄叶片和皮层为材料,对植物总RNA和dsRNA提取方法进行了研究,从中筛选出了提取葡萄总RNA和dsRNA的适合方法。建立了GLRaV RT-PCR的有效体系,在有效体系基础上,通过研究RT-PCR主要成分对RT-PCR的影响,确立了GLRaVRT-PCR的优化体系。
关键词 葡萄卷叶病毒ⅲ RT-PCR检测
在线阅读 下载PDF
葡萄卷叶伴随病毒2实时荧光定量RT-PCR技术的检测应用 被引量：4
10
作者 任芳 张尊平 +3 位作者 范旭东 胡国君 张梦妍 董雅凤 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期180-187,共8页
通过引物筛选和体系优化建立了葡萄卷叶伴随病毒2 Grapevine leafroll-associated virus 2(GLRaV-2)的SYBR GreenⅠ染料法实时荧光定量RT-PCR检测技术。该技术标准曲线扩增效率为102.2%,决定系数为0.999,最低检出限可达10-3稀释梯度,是... 通过引物筛选和体系优化建立了葡萄卷叶伴随病毒2 Grapevine leafroll-associated virus 2(GLRaV-2)的SYBR GreenⅠ染料法实时荧光定量RT-PCR检测技术。该技术标准曲线扩增效率为102.2%,决定系数为0.999,最低检出限可达10-3稀释梯度,是常规RT-PCR的100倍。对不同季节和不同部位葡萄样品的检出率普遍高于常规RT-PCR。春夏秋季样品检出率分别为67%、89%和86%,比常规RT-PCR检出率分别高42%、28%和17%。冬季休眠枝条检出率最高(100%),与常规RT-PCR相同。夏季老叶柄和卷须、秋季和冬季枝条等样品检测效果最好,检出率均为100%。对来自我国17个省38个品种的116份田间葡萄样品检测结果表明,qRT-PCR共检测到10个样品为阳性,检出率略高于常规RT-PCR。 展开更多
关键词 葡萄 葡萄卷叶伴随病毒2 实时荧光定量RT-PCR 常规RT-PCR 检测
在线阅读 下载PDF
葡萄卷叶病毒Ⅲ RT-PCR检测技术研究
11
作者 牛建新 陈萍 +2 位作者 李西平 马兵钢 鲁晓燕 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第z1期100-103,共4页
以葡萄叶片和皮层为材料,对植物总RNA和dsRNA提取方法进行了研究,从中筛选出了提取葡萄总RNA和dsRNA的适合方法.建立了GLRaVⅢRT-PCR的有效体系,在有效体系基础上,通过研究RT-PCR主要成分对RT-PCR的影响,确立了GLRaV RT-PCR的优化体系.
关键词 葡萄卷叶病毒ⅲ RT-PCR检测
在线阅读 下载PDF
葡萄卷叶病毒3 RT-PCR检测技术研究 被引量：5
12
作者 董雅凤 张尊平 +2 位作者 杨俊玲 何峻 张少瑜 《中国果树》 北大核心 2005年第6期9-12,共4页
采用改进的二氧化硅吸附法和2组特异性引物进行葡萄卷叶病毒3(GLR aV-3)RT-PCR检测。结果表明,二氧化硅吸附法提取总RNA纯度好、浓度高、操作简便;随机引物合成cDNA能同时用于多种病毒及不同引物的PCR,可简化检测程序,降低检测费用;LC 1... 采用改进的二氧化硅吸附法和2组特异性引物进行葡萄卷叶病毒3(GLR aV-3)RT-PCR检测。结果表明,二氧化硅吸附法提取总RNA纯度好、浓度高、操作简便;随机引物合成cDNA能同时用于多种病毒及不同引物的PCR,可简化检测程序,降低检测费用;LC 1/LC 2引物进行RT-PCR检测,病毒检出率高于PU/PD引物和EL ISA方法。建立了规范、灵敏、稳定、快速、经济的GLR aV-3RT-PCR检测技术体系。 展开更多
关键词 葡萄卷叶病毒3 RT-PCR 检测 RT-PCR检测技术 葡萄卷叶病毒 特异性引物 ELISA方法 二氧化硅 总RNA CDNA
在线阅读 下载PDF
葡萄卷叶病毒主要检测技术比较 被引量：4
13
作者 王升吉 尚佑芬 +3 位作者 赵玖华 杨崇良 路兴波 孙红炜 《山东农业科学》 2008年第3期95-98,共4页
葡萄卷叶病(GLRaV)是葡萄上的一种重要病毒病害。本文主要阐述了该病的病原、分布及近些年来各种检测技术在该病检测中的应用情况,分析了各种检测技术的优势和不足及如何在该病检测中对各种方法做合理的搭配应用,优势互补,提高效率。
关键词 葡萄 葡萄卷叶病毒(glrav) 检测技术 检测方法
在线阅读 下载PDF
葡萄卷叶病病毒双链RNA(dsRNA)提纯分析研究 被引量：8
14
作者 李东栋 牛建新 潘立忠 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2000年第3期205-210,共6页
以传统的检测方法为对照经过一系列的筛选后 ,在国内首次将病毒的dsRNA检测分析引入果树无病毒苗的检测方法之中 ,确立了葡萄病毒病dsRNA的提取步骤 ,包括试剂选择、浓度的设定、操作方法的确立 ,与国外文献相比有多方面的改进 ,使其更... 以传统的检测方法为对照经过一系列的筛选后 ,在国内首次将病毒的dsRNA检测分析引入果树无病毒苗的检测方法之中 ,确立了葡萄病毒病dsRNA的提取步骤 ,包括试剂选择、浓度的设定、操作方法的确立 ,与国外文献相比有多方面的改进 ,使其更加简单、实用 ,并在实际的应用当中取得成功。在确立方法的基础上对生产中广泛发生的葡萄卷叶病病毒 (GLRv)进行检测并确立检测标准 。 展开更多
关键词 葡萄 卷叶病病毒 提纯 RNA DSRNA
在线阅读 下载PDF
葡萄卷叶伴随病毒基因的克隆及序列分析 被引量：5
15
作者 张满良 朱水芳 赵冬兰 《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2000年第5期70-75,共6页
根据葡萄卷叶伴随病毒 美国分离物的 GLRa V- 3CP基因序列 ,设计并合成了 1对该病毒的 PCR引物 ,利用 IC- RT- PCR成功地检查到合适大小的 PCR产物 ;同时将PCR产物克隆到中间载体 PGEM- 3Zf上 ,转化大肠杆菌 DH5α菌株 ,筛选阳性克隆... 根据葡萄卷叶伴随病毒 美国分离物的 GLRa V- 3CP基因序列 ,设计并合成了 1对该病毒的 PCR引物 ,利用 IC- RT- PCR成功地检查到合适大小的 PCR产物 ;同时将PCR产物克隆到中间载体 PGEM- 3Zf上 ,转化大肠杆菌 DH5α菌株 ,筛选阳性克隆。通过双酶切以及序列分析表明 ,扩增样品与美国分离物的同源性为 94.1 %。 展开更多
关键词 CP基因 克隆 序列分析 葡萄卷叶伴随病毒ⅲ 葡萄卷叶病
在线阅读 下载PDF
葡萄卷叶伴随病毒1号和3号宁夏分离物部分基因序列分析 被引量：3
16
作者 吕苗苗 李文学 +2 位作者 孙牧笛 胡丽杰 顾沛雯 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期74-80,共7页
为明确葡萄卷叶伴随病毒(GLRaVs)在宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄上的侵染状况,采用RT-PCR技术对40份酿酒葡萄样品中的GLRaV-1~GLRaV-5进行了外壳蛋白(CP)、复制酶(RdRp)和热激蛋白(HSP70)基因序列的克隆和分析。检测结果表明,在所检测的5种... 为明确葡萄卷叶伴随病毒(GLRaVs)在宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄上的侵染状况,采用RT-PCR技术对40份酿酒葡萄样品中的GLRaV-1~GLRaV-5进行了外壳蛋白(CP)、复制酶(RdRp)和热激蛋白(HSP70)基因序列的克隆和分析。检测结果表明,在所检测的5种病毒中,除GLRaV-2和GLRaV-4未检测到外,GLRaV-1和GLRaV-3的检出率最高,分别为20.0%和32.5%,GLRaV-5的检出率仅为5.0%;有6个样品存在GLRaV-1和GLRaV-3两种病毒复合侵染。序列分析表明,GLRaV-1宁夏分离物的部分CP基因序列长度为232nt,其两种分离物间的核苷酸序列同源率为90%,与已报道的国内外其他分离物CP基因序列相比,其同源率为90%~99%;GLRaV-3宁夏分离物的CP基因序列长度为942nt,其两种分离物间的核苷酸序列同源率为40%,与已报道的国内外其他分离物CP基因序列相比,其同源率为40%~99%;GLRaV-3宁夏分离物的RdRp基因序列长度为683nt,其各分离物间的核苷酸序列同源率为90%以上,与已报道的国内外其他分离物RdRp基因序列相比,其同源率为90%~99%;GLRaV-3宁夏分离物的HSP70基因序列长度为546nt,其两种分离物间的核苷酸序列同源率为96%,与已报道的国内外其他分离物HSP70基因序列相比,其同源率为96%~99%。 展开更多
关键词 葡萄卷叶伴随病毒(glravs) RT-PCR检测 克隆 序列分析
在线阅读 下载PDF
甘肃葡萄扇叶病毒和卷叶病毒的检测 被引量：3
17
作者 谭雪莲 马静芳 曹孜义 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2005年第1期65-68,共4页
采用 DAS-ELISA 检测方法对甘肃地区的葡萄主要品种进行扇叶病毒和卷叶病毒的调查和测定。结果表明,这两种病毒病在甘肃地区的主要葡萄产区均有发生。兰州地区和一些老的葡萄产区葡萄带病毒病较严重。通过对比植株下部枝条的幼叶、幼茎... 采用 DAS-ELISA 检测方法对甘肃地区的葡萄主要品种进行扇叶病毒和卷叶病毒的调查和测定。结果表明,这两种病毒病在甘肃地区的主要葡萄产区均有发生。兰州地区和一些老的葡萄产区葡萄带病毒病较严重。通过对比植株下部枝条的幼叶、幼茎、老叶和老茎病原的检测结果,说明植株下部幼嫩组织是卷叶病毒最适的检测部位。 展开更多
关键词 葡萄 扇叶病毒 卷叶病毒 DAS—ELISA
在线阅读 下载PDF
叶面喷施壳寡糖对感染卷叶病毒葡萄果实糖分积累的影响 被引量：5
18
作者 单守明 李映龙 +1 位作者 平吉成 刘成敏 《中国果树》 2017年第6期24-27,共4页
为了降低葡萄卷叶病毒侵染对酿酒葡萄造成的损失,提高葡萄产量和品质,以'赤霞珠'为试材,研究谢花后叶面喷施壳寡糖处理对葡萄果实糖分卸载和果实品质的影响结果表明,壳寡糖处理没有显著影响葡萄结果枝叶片中病毒的含量,但可提... 为了降低葡萄卷叶病毒侵染对酿酒葡萄造成的损失,提高葡萄产量和品质,以'赤霞珠'为试材,研究谢花后叶面喷施壳寡糖处理对葡萄果实糖分卸载和果实品质的影响结果表明,壳寡糖处理没有显著影响葡萄结果枝叶片中病毒的含量,但可提高果实转化酶和ATPase酶活性,促进糖分卸载速率,其中100mg/L壳寡糖(T2)在处理后40~80d显著提高了果实转化酶和ATPase酶活性,显著促进果实糖分卸载,采收时果实品质得到显著提高。因此,在谢花后,叶面喷施适当浓度壳寡糖可以通过调节转化酶和ATPase酶活性来促进果实糖分的积累,提高已感染卷叶病毒葡萄的果实品质。 展开更多
关键词 壳寡糖 葡萄卷叶病毒 糖分积累 果实品质
在线阅读 下载PDF
葡萄种质资源卷叶病毒病田间自然发病调查 被引量：5
19
作者 刘崇怀 孔庆山 《果树科学》 CSCD 北大核心 1998年第3期228-231,共4页
对郑州果树所国家果树种质郑州葡萄圃内的808份种质（品种和野生类型）的卷叶病自然发病情况进行了调查研究。在美洲种群、东亚种群及山美杂种中没有发现卷叶病症状；欧亚种葡萄中有卷叶病症状的品种比例最高，且程度严重；具有欧亚种... 对郑州果树所国家果树种质郑州葡萄圃内的808份种质（品种和野生类型）的卷叶病自然发病情况进行了调查研究。在美洲种群、东亚种群及山美杂种中没有发现卷叶病症状；欧亚种葡萄中有卷叶病症状的品种比例最高，且程度严重；具有欧亚种葡萄血统的欧美杂种和欧山杂种均有表现卷叶病症状的品种，但发病率和严重程度较欧亚种低。在欧亚种葡萄中以鲜食葡萄品种为主的东方品种群的卷叶病的发病率较低，而以酿酒品种为主的西欧和黑海品种群发生卷叶病的比例较高，而且病情最严重。 展开更多
关键词 葡萄 种质资源 卷叶病毒病 自然发病
在线阅读 下载PDF
葡萄卷叶伴随病毒-3复制酶基因克隆及其在大肠杆菌中的表达 被引量：2
20
作者 徐章逸 王国平 洪霓 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期252-255,共4页
以感染有葡萄卷叶伴随病毒-3(Grapevineleafroll-associatedvirus-3,GLRaV-3)的葡萄韧皮部组织中提取到的dsRNA为模板,利用RT-PCR和重叠延伸PCR技术,对GLRaV-3的复制酶(RNA-dependentRNApolymerase,RdRp)基因进行克隆,获得了预期大小的... 以感染有葡萄卷叶伴随病毒-3(Grapevineleafroll-associatedvirus-3,GLRaV-3)的葡萄韧皮部组织中提取到的dsRNA为模板,利用RT-PCR和重叠延伸PCR技术,对GLRaV-3的复制酶(RNA-dependentRNApolymerase,RdRp)基因进行克隆,获得了预期大小的目标片段。将此片段克隆到载体pBluescriptSKⅡ,酶切鉴定后测序。测序结果表明:RdRpcDNA全长为1618bp。经BLAST分析推导其可能编码538个氨基酸,与报道的GLRaV-3美国分离物NY1RdRp核苷酸相似性为99.3%,氨基酸相似性为99.6%;推导的氨基酸序列与其同属的PMWaV-2、GLRaV-1和LChV-2的RdRp氨基酸序列相似性分别为53%,50%和38%,包含了GDD在内的8个保守基元序列。将该段RdRp连接到表达载体pET22b(+)上,获得的重组子pET-RdRp转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS后,用1mmol/L的IPTG进行诱导。SDS-PAGE分析表明,RdRp在大肠杆菌中被诱导表达,融合蛋白分子量约为61kDa。 展开更多
关键词 葡萄卷叶伴随病毒-3 复制酶 反转录-聚合酶联反应 原核表达
在线阅读 下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 4 下一页 到第 页
关于我们 | 版权声明 | 联系我们 | 帮助中心| 意见反馈
主办单位：上海市教育委员会
技术支持：重庆维普资讯有限公司
渝公网安备 50019002500403号
使用帮助 返回顶部