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里氏木霉QM9414尿嘧啶缺陷型转化体系改进和β-葡萄糖苷酶的过量表达
被引量：
1
1
作者
钟立霞
钱远超
+1 位作者
戴美学
钟耀华
《化工学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期2510-2518,共9页
里氏木霉是广泛应用于纤维素酶生产的工业真菌,但高产突变株遗传操作困难,限制了菌种改良。首先利用定点整合策略敲除里氏木霉突变株QM9414的pyr4基因,成功构建尿嘧啶营养缺陷型菌株QP4,其遗传转化效率显著提高,而且产酶能力不受影响。...
里氏木霉是广泛应用于纤维素酶生产的工业真菌,但高产突变株遗传操作困难,限制了菌种改良。首先利用定点整合策略敲除里氏木霉突变株QM9414的pyr4基因,成功构建尿嘧啶营养缺陷型菌株QP4,其遗传转化效率显著提高,而且产酶能力不受影响。进一步在QP4中过量表达β-葡萄糖苷酶(BGL)基因bgl1,经大量平板显色筛选获得2株BGL活力明显增强的工程菌QPB4和QPB5,其酶活分别提高10.01倍和8.26倍。利用发酵酶液对2种不同预处理的玉米芯底物进行水解糖化实验,结果显示以酸处理玉米芯为底物时QPB4和QPB5的葡萄糖得率比QP4分别提高60.98%和52.44%,而以脱木素处理玉米芯为底物时其葡萄糖得率分别提高80.01%和86.00%。研究表明改进里氏木霉高产突变株遗传转化体系可以显著促进菌株改良,提高糖化应用效果。
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关键词
纤维素酶
里氏木霉高产突变株
遗传转化
水解糖化
尿嘧啶
营养
缺陷
型
标记
构建和表达
生物技术
生物工程
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职称材料
热球菌目(Thermococcales)遗传操作系统研究与应用进展
2
作者
付寅坤
肖湘
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期28-34,共7页
热球菌目(Thermococcales)是一类分离自浅海热泉或者深海热液口的超嗜热微生物,包括火球菌(Pyrococcus)、热球菌(Thermococcus)、古老球菌(Palaeococcus)。研究其生命活动的分子机制,基因的功能等必须借助遗传操作系统。由于选择标记的...
热球菌目(Thermococcales)是一类分离自浅海热泉或者深海热液口的超嗜热微生物,包括火球菌(Pyrococcus)、热球菌(Thermococcus)、古老球菌(Palaeococcus)。研究其生命活动的分子机制,基因的功能等必须借助遗传操作系统。由于选择标记的限制,Thermococcales遗传操作系统落后于其他菌株。近年来,在Thermococcales发现了内源质粒并可以将其改造用作遗传工具。如在Thermococcus kodakarensis及Pyrococcus furious等菌株内都建立了成熟的遗传系统,并用于基因敲除以及基因表达。将就Thermococcales内源质粒的发现和遗传操作系统的发展与应用加以阐述。
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关键词
Thermococcales
遗传操作系统
营养缺陷标记
抗生素
标记
穿梭载体
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职称材料
题名
里氏木霉QM9414尿嘧啶缺陷型转化体系改进和β-葡萄糖苷酶的过量表达
被引量：
1
1
作者
钟立霞
钱远超
戴美学
钟耀华
机构
山东师范大学生命科学学院
山东大学生命科学学院
出处
《化工学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期2510-2518,共9页
基金
国家自然科学基金面上项目(31370135)
山东省农业科技成果转化资金项目(2014No.45)
山东大学基本科研业务费专项资金项目(2015CJ005)~~
文摘
里氏木霉是广泛应用于纤维素酶生产的工业真菌,但高产突变株遗传操作困难,限制了菌种改良。首先利用定点整合策略敲除里氏木霉突变株QM9414的pyr4基因,成功构建尿嘧啶营养缺陷型菌株QP4,其遗传转化效率显著提高,而且产酶能力不受影响。进一步在QP4中过量表达β-葡萄糖苷酶(BGL)基因bgl1,经大量平板显色筛选获得2株BGL活力明显增强的工程菌QPB4和QPB5,其酶活分别提高10.01倍和8.26倍。利用发酵酶液对2种不同预处理的玉米芯底物进行水解糖化实验,结果显示以酸处理玉米芯为底物时QPB4和QPB5的葡萄糖得率比QP4分别提高60.98%和52.44%,而以脱木素处理玉米芯为底物时其葡萄糖得率分别提高80.01%和86.00%。研究表明改进里氏木霉高产突变株遗传转化体系可以显著促进菌株改良,提高糖化应用效果。
关键词
纤维素酶
里氏木霉高产突变株
遗传转化
水解糖化
尿嘧啶
营养
缺陷
型
标记
构建和表达
生物技术
生物工程
Keywords
cellulases
Trichoderma reesei high-production mutant
genetic transformation
saccharification
uracil auxotroph
construction and expression
biotechnology
biological engineering
分类号
TQ812 [化学工程]
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职称材料
题名
热球菌目(Thermococcales)遗传操作系统研究与应用进展
2
作者
付寅坤
肖湘
机构
上海交通大学生命科学技术学院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期28-34,共7页
基金
上海市自然科学基金重点项目(10JC1406700)
文摘
热球菌目(Thermococcales)是一类分离自浅海热泉或者深海热液口的超嗜热微生物,包括火球菌(Pyrococcus)、热球菌(Thermococcus)、古老球菌(Palaeococcus)。研究其生命活动的分子机制,基因的功能等必须借助遗传操作系统。由于选择标记的限制,Thermococcales遗传操作系统落后于其他菌株。近年来,在Thermococcales发现了内源质粒并可以将其改造用作遗传工具。如在Thermococcus kodakarensis及Pyrococcus furious等菌株内都建立了成熟的遗传系统,并用于基因敲除以及基因表达。将就Thermococcales内源质粒的发现和遗传操作系统的发展与应用加以阐述。
关键词
Thermococcales
遗传操作系统
营养缺陷标记
抗生素
标记
穿梭载体
Keywords
Thermococcale Genetic manipulation system Nutrient auxotrophic marker Antibiotic marker Shuttle vector
分类号
Q933 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
里氏木霉QM9414尿嘧啶缺陷型转化体系改进和β-葡萄糖苷酶的过量表达
钟立霞
钱远超
戴美学
钟耀华
《化工学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
在线阅读
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职称材料
2
热球菌目(Thermococcales)遗传操作系统研究与应用进展
付寅坤
肖湘
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
在线阅读
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职称材料
已选择
0
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