产毒性大肠杆菌菌毛K_(99)抗原单克隆抗体的研制及初步鉴定

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作者 李元 吕苹 +1 位作者 吴玉水 汪美先 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第1期94-94,共1页

本文应用Sephadex A-SO层析柱纯化的产毒性大肠杆菌(ETEC·O101·K99^+·H^-株)免疫BALB／c小鼠，取其脾脏细胞与Sp2／0—Ag14骨髓瘤细胞系融合，获得17株抗K99抗原杂交瘤细胞。对其中5C5细胞株经三次克隆化，100％阳性，... 本文应用Sephadex A-SO层析柱纯化的产毒性大肠杆菌(ETEC·O101·K99^+·H^-株)免疫BALB／c小鼠，取其脾脏细胞与Sp2／0—Ag14骨髓瘤细胞系融合，获得17株抗K99抗原杂交瘤细胞。对其中5C5细胞株经三次克隆化，100％阳性，传代三个月及液氨保存复苏，生长良好，并能持续分泌抗K99抗原的单克隆抗体．IF法测定杂交瘤细胞培养上清，阳性滴度为10^-2，诱生腹水阳性滴度为10^-4。免疫球蛋白类型鉴定为lgM。杂交瘤细胞经染色体鉴定为95条，证实为sp2／0与小鼠的杂交细胞。 展开更多

关键词 产毒性大肠杆菌 菌毛k99抗原单克隆抗体 研制 鉴定

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大肠杆菌K_(99)菌毛抗原的制备及其免疫抗体效价的测定 被引量：5

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作者 张永红 崔德凤 +2 位作者 李焕荣 于同泉 李志敏 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2003年第12期10-11,共2页

关键词 大肠杆菌 k99菌 毛抗原 制备技术 免疫抗体 测定技术

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产毒性大肠杆菌菌毛F_(41)抗原单克隆抗体及其免疫学特性的鉴定

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作者 李元 吕苹 +1 位作者 吴玉水 汪美先 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第1期93-94,共2页

产毒性大肠杆菌(ETEC)是婴儿和幼畜急性腹泻的重要病原之一，其致病因子主要有腑毒素和定居因子(又称粘附素)。现已证明，菌毛抗原是介导ETEC粘附肠上皮细胞的定居因子；是该茁感染的第一步．也是人们注目的预防该菌感染的菌毛疫苗组分... 产毒性大肠杆菌(ETEC)是婴儿和幼畜急性腹泻的重要病原之一，其致病因子主要有腑毒素和定居因子(又称粘附素)。现已证明，菌毛抗原是介导ETEC粘附肠上皮细胞的定居因子；是该茁感染的第一步．也是人们注目的预防该菌感染的菌毛疫苗组分。F41菌毛抗原是近年来才发现的畜源性ETEC的一种新的定居因子。因此．F41菌毛抗原单克隆抗体及其免疫学特性的研究，对探讨ETEC的致病与免疫机制，检验诊断及特异预防将提供有用的制剂。 展开更多

关键词 产毒性大肠杆菌 菌毛F41抗原 单克隆抗体 免疫学特性 鉴定

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大肠杆菌菌毛抗原K99与耐热肠毒素STⅠ融合基因的克隆与核苷酸序列测定

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作者 李书光 沈志强 +5 位作者 单虎 管宇 肖跃强 王金良 南松剑 刘吉山 《中国兽药杂志》 2007年第4期11-14,共4页

采用PCR技术,从大肠杆菌K99中扩增出0.54kb的K99菌毛抗原基因,然后将其克隆到pUCm-T载体上,用BglⅡ鉴定K99插入的方向并测序。选择目的基因片段插入方向正确的重组质粒经BamHⅠ和SalⅠ双酶切后,通过T4连接酶与同样经BamHⅠ和SalⅠ双酶... 采用PCR技术,从大肠杆菌K99中扩增出0.54kb的K99菌毛抗原基因,然后将其克隆到pUCm-T载体上,用BglⅡ鉴定K99插入的方向并测序。选择目的基因片段插入方向正确的重组质粒经BamHⅠ和SalⅠ双酶切后,通过T4连接酶与同样经BamHⅠ和SalⅠ双酶切合成的耐热肠毒素STⅠ核苷酸序列连接,通过PCR方法鉴定分析和核苷酸序列测序分析,证明插入的K99-STⅠ融合基因片段具有正确的核苷酸序列。 展开更多

关键词 k99菌毛抗原基因 STⅠ基因合成片断 融合基因 克隆与测序

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产毒性大肠杆菌菌毛抗原F_(41)单克隆抗体的制备及其特异性研究

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作者 李元 吕苹 +1 位作者 吴玉水 汪美先 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第3期22-26,共5页

本文报道以纯化的产毒性大肠杆菌菌毛F_(41)抗原,利用杂交瘤技术获得5株抗F_(41)抗原的单克隆抗体(1F6,2C5,3B6为IgG 1。1 H 5,4E11为IgM)。腹水抗体效价达10^(-6)培养上清抗体效价10^(-3)。通过免疫扩散、免疲印迹法及固相菌体ELISA试... 本文报道以纯化的产毒性大肠杆菌菌毛F_(41)抗原,利用杂交瘤技术获得5株抗F_(41)抗原的单克隆抗体(1F6,2C5,3B6为IgG 1。1 H 5,4E11为IgM)。腹水抗体效价达10^(-6)培养上清抗体效价10^(-3)。通过免疫扩散、免疲印迹法及固相菌体ELISA试验证实,5株单克隆抗体均为针对ETEC菌毛F_(41)抗原的特异性抗体;红血球凝集抑制及肠上皮细胞粘附阻断试验证明1F6、2C5、3B6具有生物学活性,1H5与4E11无生物学活性,这可能(1)建立ELISA捕捉法,从粪便中直接检测F_(41)抗原以及用玻板凝集试验鉴定临床分离菌株。(2)用于F_(41)抗原性的分析及ETEC基因工程疫苗的监控手段。(3)为ETEC·F_(41)菌的致病性研究及被动免疫预防急性腹泻提供依据。 展开更多

关键词 产毒性大肠杆菌 单克隆抗体 特异性研究 菌毛抗原 ELISA捕捉法 肠上皮细胞粘附 制备 ETEC 临床分离菌株 基因工程疫苗 抗体效价 杂交瘤技术 免疫印迹法 特异性抗体 红血球凝集 生物学活性 致病性研究 IgG1 培养上清 免疫扩散

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产肠毒素大肠杆菌F17菌毛黏附亚基单克隆抗体的制备及其抗原表位分析 被引量：6

6

作者 刘嘉利 侯美佳 +4 位作者 赵佳慧 董秀梅 杨巍 张萍 师东方 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1208-1215,共8页

为获得产肠毒素大肠杆菌(ETEC)F17菌毛黏附亚基G的单克隆抗体(MAb)及其抗原表位信息,本研究通过原核表达系统表达了重组F17-G蛋白(rF17-G-His)并纯化,SDS-PAGE和western blot检测结果显示表达的rF17-G-His大小为53 ku,纯化后条带单一。... 为获得产肠毒素大肠杆菌(ETEC)F17菌毛黏附亚基G的单克隆抗体(MAb)及其抗原表位信息,本研究通过原核表达系统表达了重组F17-G蛋白(rF17-G-His)并纯化,SDS-PAGE和western blot检测结果显示表达的rF17-G-His大小为53 ku,纯化后条带单一。利用该重组蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术获得了F17-G的MAb并制备腹水,采用间接ELISA、SDS-PAGE、western blot、抗体亚类鉴定试剂盒对所获得的MAb进行鉴定。结果显示,获得了3株可稳定分泌MAb的阳性杂交瘤细胞株F2G、C3G、E5G。3株MAb亚类均为IgG1,轻链为κ链,其中MAb F2G效价最高,上清效价为1:2 048,腹水效价为1:1 000 000。3株MAb均不与其他菌毛反应,具有较强的特异性。其中MAb E5G可以有效抑制ETEC DN1502株黏附肠上皮细胞。对MAb识别的抗原表位鉴定和分析结果显示,MAb F2G识别的抗原表位区域是aa1~aa15:1AAVSFIGSTENDVGP15,MAb C3G识别的表位区域是aa211~aa225:211GTTSLKLQCDAGVTV225,二者均为线性表位。MAb E5G识别的是构象表位,且位于凝集素结构域第89位天冬氨酸。采用软件分析F17-G生物学特性,结果显示,F17-G是稳定的亲水性蛋白,aa1~aa15是较活跃的表位区域,aa1~aa15、aa211~aa225在变体F17-G1、F17-G2中较为保守,aa89在3个变体中均高度保守。综合分析后认为MAb E5G具有预防和治疗携带F17菌毛ETEC引发的疾病的潜力。本研究为相应疾病的新型药物、诊断方法和疫苗的研发提供了有效生物制剂和可靠的生物学信息。 展开更多

关键词 产肠毒素大肠杆菌 F17菌毛 G亚基 单克隆抗体 抗原表位

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产肠毒素性大肠杆菌K99菌毛抗原成熟肽的克隆表达及部分免疫学特性的分析 被引量：2

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作者 姜文亿 盛金良 +1 位作者 王远志 陈创夫 《上海畜牧兽医通讯》 2008年第3期28-30,共3页

采用PCR方法,以83912(含K99)标准株菌液为模板扩增K99菌毛基因,克隆至pBS-T载体。提取阳性质粒,进行PCR和酶切鉴定。经测序正确后,构建原核表达载体pET-28a-K99,将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达后,菌体蛋白经SDS-PAGE... 采用PCR方法,以83912(含K99)标准株菌液为模板扩增K99菌毛基因,克隆至pBS-T载体。提取阳性质粒,进行PCR和酶切鉴定。经测序正确后,构建原核表达载体pET-28a-K99,将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达后,菌体蛋白经SDS-PAGE,在约18Ku有一明显特异性条带,表达产物经初步纯化后,免疫印迹法(Western blotting)分析证实,此重组蛋白与K99阳性血清发生特异性反应。然后将初步纯化的重组蛋白免疫实验兔,并设对照组,建立间接ELISA法进行抗体检测,分析表达产物的抗原性和免疫原性,并对各组进行攻毒试验,为进一步对幼畜腹泻疫苗的研制奠定基础。 展开更多

关键词 大肠杆菌k99 菌毛抗原 克隆表达 免疫学特性分析

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大肠杆菌K99和F41菌毛抗原的不同缓冲液热处理提取方法比较的研究 被引量：8

8

作者 崔玉东 侯喜林 +2 位作者 朱战波 赵淑兰 朴范泽 《中国畜禽传染病》 CSCD 1998年第5期281-283,共3页

本试验用Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液（Ｔ）、ＰＢＳ缓冲液（Ｐ）、生理盐水（Ｓ）和２Ｍ尿素ＰＢＳ缓冲液（Ｕ）以热处理的方法提取大肠杆菌Ｋ９９和Ｆ４１菌毛抗原，并用硫酸铵盐析纯化Ｋ９９以及用１Ｎ醋酸滴定和氯化镁沉淀分别纯化Ｆ４... 本试验用Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液（Ｔ）、ＰＢＳ缓冲液（Ｐ）、生理盐水（Ｓ）和２Ｍ尿素ＰＢＳ缓冲液（Ｕ）以热处理的方法提取大肠杆菌Ｋ９９和Ｆ４１菌毛抗原，并用硫酸铵盐析纯化Ｋ９９以及用１Ｎ醋酸滴定和氯化镁沉淀分别纯化Ｆ４１。根据ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳和蛋白质含量测定结果，四种缓冲液对Ｋ９９的提取量依次是Ｕ＞Ｓ＞Ｐ，而Ｔ检不出Ｋ９９；对Ｆ４１的提取量依次是Ｕ＞Ｔ＞Ｐ＞Ｓ。Ｋ９９纯化后取得了满意的纯化结果，Ｆ４１纯化后大量上样做电泳时仍有微细的污染带出现，而且氯化镁沉淀后造成Ｆ４１严重损失。Ｋ９９和Ｆ４１纯化前后的各个样品经超声波处理、０．５％脱氧胆酸钠处理和未处理的原液与自家因子血清做琼扩试验以及Ｋ９９和Ｆ４１做交叉琼扩试验，均具有良好的特异性，而且以超声波处理后的样品做琼扩试验效果最佳。 展开更多

关键词 大肠杆菌 菌毛抗原 热处理 k99 F41 犊牛

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ETEC K99、K88菌毛蛋白抗原表位多肽的设计合成及免疫反应 被引量：1

9

作者 余丽芸 田斌 +6 位作者 温丽娟 王桂华 曹宁 魏小曼 郭东伟 齐浩 刘秋晨 《江西农业学报》 CAS 2013年第3期88-92,共5页

目的:通过生物信息学及蛋白分析软件等,寻找ETEC K88、K99菌毛蛋白的抗原表位。方法:通过生物信息学技术、DNAStar Protean蛋白分析软件及网络共享软件对ETEC K88、K99菌毛蛋白抗原性相关的参数进行预测分析,从而设计ETEC K88、K99菌毛... 目的:通过生物信息学及蛋白分析软件等,寻找ETEC K88、K99菌毛蛋白的抗原表位。方法:通过生物信息学技术、DNAStar Protean蛋白分析软件及网络共享软件对ETEC K88、K99菌毛蛋白抗原性相关的参数进行预测分析,从而设计ETEC K88、K99菌毛蛋白的抗原表位多肽;采用腹腔注射的方式将合成的抗原表位多肽免疫小鼠,用ELISA法检测血清中产生的抗体,并对免疫小鼠进行了攻毒试验。结果:多肽免疫小鼠后均能诱导抗体产生,攻毒试验表明合成肽对小鼠具有保护作用。结论:成功预测了抗原表位,合成的表位多肽具有较好的抗原性。 展开更多

关键词 ETEC k99菌毛蛋白 ETEC k88菌毛蛋白 抗原表位 合成肽

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产肠毒素大肠埃希菌K99菌毛基因的克隆与原核表达 被引量：14

10

作者 姜宣鹏 张焕容 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第5期12-16,共5页

本试验采用产肠毒素大肠埃希菌(ETEC)K99菌毛基因完整编码框的特异性引物,以牛源大肠埃希菌C83912基因组DNA为模板,扩增出大小为498bp的ETEC K99菌毛基因完整编码框,克隆至pMD19-T载体,阳性重组质粒pMD19-T-K99经PCR、双酶切鉴定和测序... 本试验采用产肠毒素大肠埃希菌(ETEC)K99菌毛基因完整编码框的特异性引物,以牛源大肠埃希菌C83912基因组DNA为模板,扩增出大小为498bp的ETEC K99菌毛基因完整编码框,克隆至pMD19-T载体,阳性重组质粒pMD19-T-K99经PCR、双酶切鉴定和测序正确后,双酶切产物与pET-32a(+)载体连接,构建原核表达载体pET-32a(+)-K99,转化原核表达工程菌BL21(DE3),阳性转化子经IPTG诱导获高效表达,Western blot证明原核表达的K99重组蛋白能与K99单因子血清发生特异性反应,重组蛋白免疫家兔后可产生特异性抗体,证明重组蛋白具有良好的抗原性。ETEC K99原核表达质粒的构建和表达产物抗原性研究,为进一步研究K99亚单位疫苗以及制备K99特异性抗体奠定了基础。 展开更多

关键词 产肠毒素大肠埃希菌 k99 菌毛 克隆 原核表达 抗原性

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纯化ETEC K88菌毛特异性卵黄抗体的加工贮藏及体外抗粘附性研究 被引量：5

11

作者 程学慧 王劼 +2 位作者 蒋思文 彭健 詹志春 《饲料研究》 CAS 2005年第4期3-5,共3页

分离、纯化产肠毒素大肠杆菌(ETEC) K88ac菌毛蛋白,将其免疫产蛋鸡,经喷雾干燥制备抗ETEC菌毛抗原特异性卵黄抗体粉。间接ELISA法检测卵黄抗体效价,试验结果表明,喷雾干燥(140℃进气,65℃出气)对卵黄抗体活性无影响,加工前后抗体滴度均... 分离、纯化产肠毒素大肠杆菌(ETEC) K88ac菌毛蛋白,将其免疫产蛋鸡,经喷雾干燥制备抗ETEC菌毛抗原特异性卵黄抗体粉。间接ELISA法检测卵黄抗体效价,试验结果表明,喷雾干燥(140℃进气,65℃出气)对卵黄抗体活性无影响,加工前后抗体滴度均为1∶1280;卵黄抗体粉在90℃干热条件下处理5min后抗体效价下降50%,而90℃湿热条件下处理5min抗体效价无明显变化,但处理15min后下降75%;经过1h的干热或湿热处理,抗体均基本失活;4℃和常温下放置半年对卵黄抗体粉活性无影响;体外抑制粘附试验表明,抗K88卵黄抗体能抑制K88对肠上皮细胞的粘附。 展开更多

关键词 卵黄抗体 ETEC 特异性 k88菌毛 纯化 粘附性 间接ELISA法 抗体效价 贮藏 喷雾干燥 肠上皮细胞 湿热条件 抗体滴度 抗体活性 粘附试验 试验结果 加工前后 湿热处理 产肠毒素 大肠杆菌 体外抑制 菌毛抗原 产蛋鸡 毛蛋白 下降

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^(99m)Tc标记抗癌胚抗原单抗C50片段Fab’及其生物分布研究 被引量：2

12

作者 杨志 林保和 +3 位作者 韩燕 牟阿平 孔健 张梅颖 《北京医科大学学报》 CSCD 2000年第6期536-539,共4页

目的 :研究克服99mTc标记抗癌胚抗原 (carcinoembryonicantigen ,CEA)单抗体内生物半衰期长、血液廓清速度慢、晚时相放射性信号弱等缺点的方法 ,用直接标记法进行了99mTc标记抗CEA抗体C5 0片断Fab’的研究。方法 :经胃蛋白酶切得的C5 ... 目的 :研究克服99mTc标记抗癌胚抗原 (carcinoembryonicantigen ,CEA)单抗体内生物半衰期长、血液廓清速度慢、晚时相放射性信号弱等缺点的方法 ,用直接标记法进行了99mTc标记抗CEA抗体C5 0片断Fab’的研究。方法 :经胃蛋白酶切得的C5 0片断F(ab’) 2 用适量的 2 巯基乙醇还原 ,SephadexG5 0柱分离获得纯度大于 90 %的Fab’片断。取 0 .6～ 1.0mg纯化的片段Fab’(体积 <1.0ml) ,加入 0 .4～ 0 .8mg葡庚糖酸钠及新鲜配制的SnCl2溶液 5～ 10 μg ,然后加入新鲜淋洗的Na99mTcO4 淋洗液 ,反应 10～ 15min。用高压液相色谱监测放化纯度和抗体纯度。荷CL 187(结肠癌 )裸鼠静脉注射99mTc Fab’ ,观察标记抗体片段在不同时相的体内分布。结果 :标记率大于 90 %。荷瘤裸鼠体内分布结果显示 :在注射99mTc Fab’ 4h后瘤 /血、瘤 /肝、瘤 /肺放射性摄取比分别为 1.93、2 .35和 3 .13 ,2 4h后则分别为 4.91、2 .6 2和 5 .2 6 ,肿瘤的ID(% ) / g(每克组织的摄取率 )为 2 .73。虽然注射99mTc标记的全抗C5 0后 2 4h ,肿瘤的ID(% ) /g高达 12 .5 ,但瘤 /血比值仅为 1.5 1。结论 :采用99mTc直接法标记Fab’是成功的 ,肿瘤与非肿瘤 (T/NT)的比值除肾外在早期 4h时均大于 2 .0 ,明显高于全抗的T/NT比值 。 展开更多

关键词 单克隆抗体 癌胚抗原 同位素标记 锝^99M 肿瘤

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用荧光抗体技术和肠细胞粘附试验检测K88^+E.coli对仔猪小肠上皮的粘附作用

13

作者 徐香 黄翠芬 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第S1期108-109,共2页

细菌粘附到宿主粘膜表面是细菌致病的前提,在引起人、畜腹泻的大肠杆菌中已经发现了许多具有粘附作用的蛋白质抗原,例如 K88、K99、987P、F₄₁、CFA/I、CFA/Ⅱ等抗原。这些抗原也叫菌毛或粘附素,它们位于菌体表面... 细菌粘附到宿主粘膜表面是细菌致病的前提,在引起人、畜腹泻的大肠杆菌中已经发现了许多具有粘附作用的蛋白质抗原,例如 K88、K99、987P、F₄₁、CFA/I、CFA/Ⅱ等抗原。这些抗原也叫菌毛或粘附素,它们位于菌体表面,能特异粘附到宿主小肠上皮细胞上,使细菌克服肠道蠕动的排斥在小肠内定居、繁殖。目前已经用遗传工程技术克隆3菌毛基因,用菌毛蛋白制成的疫苗,预防大肠杆菌腹泻,效果很好。在我国,新生仔猪大肠杆菌腹泻的发病率很高,仔猪腹泻大肠杆菌多数具有K88抗原,本实验建立了荧光抗体染色和肠细胞粘附二种方法,检测了K88⁺E.coli的粘附能力和菌毛的生物活性。 展开更多

关键词 粘附作用 E.COLI k88 细胞粘附 小肠上皮 蛋白质抗原 菌毛 仔猪大肠杆菌 荧光抗体染色 粘附能力

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猪K_(88)、K_(99)、987P、F_(41)埃希氏大肠杆菌高密度发酵培养技术的初步探讨

14

作者 巫月生 齐冬梅 +3 位作者 张毓金 赖月辉 李嘉爱 王卓明 《中国兽药杂志》 2011年第5期8-10,共3页

采用高密度发酵和普通深层通气两种方法培养含K88、K99、987P、F41菌毛抗原的四株猪埃希氏大肠杆菌,对其培养液进行活菌数、OD值、pH值、效价的测定。实验结果表明,运用高密度发酵方法培养,各菌活菌数可达4.1×1010~4.9×1010CF... 采用高密度发酵和普通深层通气两种方法培养含K88、K99、987P、F41菌毛抗原的四株猪埃希氏大肠杆菌,对其培养液进行活菌数、OD值、pH值、效价的测定。实验结果表明,运用高密度发酵方法培养,各菌活菌数可达4.1×1010~4.9×1010CFU/mL,效价为211~213;运用普通深层通气方法培养,各菌活菌数为0.51×1010~0.59×1010CFU/mL,效价为24~25,可选择高密度发酵方法替代普通深层通气方法培养,用于制备猪埃希氏大肠杆菌K88、K99、987P、F41四价菌毛提纯苗。 展开更多

关键词 猪埃希氏大肠杆菌 k88、k99、987P、F41 菌毛抗原 高密度发酵培养

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适用于蛋鸡免疫的猪源ETEC菌毛蛋白佐剂的筛选

15

作者 陈曦 赵兴华 +2 位作者 俞伏松 杨金先 宋铁英 《福建畜牧兽医》 2013年第4期1-5,共5页

为筛选卵黄抗体的优良佐剂,以3株猪源致病性大肠杆菌(ETEC)菌毛蛋白为模式抗原,分别与6种佐剂制备多价菌毛蛋白疫苗,免疫海兰褐壳蛋鸡。结果显示,3次免疫后,所有试验组蛋鸡产蛋率均有不同程度下降,但SPA、ISCOMs、弗氏佐剂、蜂胶佐剂组... 为筛选卵黄抗体的优良佐剂,以3株猪源致病性大肠杆菌(ETEC)菌毛蛋白为模式抗原,分别与6种佐剂制备多价菌毛蛋白疫苗,免疫海兰褐壳蛋鸡。结果显示,3次免疫后,所有试验组蛋鸡产蛋率均有不同程度下降,但SPA、ISCOMs、弗氏佐剂、蜂胶佐剂组的产蛋率下降程度较为轻微;对鸡体血清抗体和制备获得的卵黄抗体的效价检测结果均显示:SPA和ISCOMs组虽较SPB、SPC、弗氏佐剂组抗体水平略低,但持久度较好,且通过对蛋鸡外观形态和注射部位组织变化情况的观察显示,两者不会刺激鸡体热反应或炎症反应,无任何表观副作用。因此,更适合作为蛋鸡制备猪源ETEC卵黄抗体的优良佐剂。 展开更多

关键词 免疫佐剂 猪源ETEC菌毛蛋白(k88、k99和987P) 产蛋率 卵黄抗体 炎症反应

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